La mezcla maestra PowerUp™ SYBR® Green es una mezcla maestra 2X, preformulada, optimizada y universal para flujos de trabajo de PCR en tiempo real. Junto con una plantilla y conjuntos de cebador suministrados por el usuario, la mezcla maestra PowerUp™ SYBR® Green se ha diseñado para amplificar los objetivos de análisis precisos de expresión génica.

Las características de la mezcla maestra PowerUp™ SYBR® Green incluyen:
• Mecanismo doble de inicio en caliente para ofrecer una excelente especificidad
• Valores de CT altamente reproducibles en un amplio intervalo dinámico
• Inclusión de la UDG para ayudar a prevenir la contaminación cruzada
• Estabilidad de reacciones ya montadas durante un máximo de 72 horas
• Compatibilidad con la mayoría de instrumentos de PCR en tiempo real (qPCR)

Especificidad excepcional con mecanismo doble de inicio en caliente
La especificidad es primordial en la obtención de datos de alta calidad en reacciones SYBR® Green y se puede mejorar mediante el control de la ADN polimerasa Taq a temperaturas inferiores antes de la unión rigurosa de los cebadores. La mezcla maestra PowerUp™ SYBR® Green utiliza la enzima ADN polimerasa Taq Dual-Lock™ que combina dos mecanismos de inicio en caliente únicos para ayudar a controlar su actividad y evitar la actividad prematura no deseable de la polimerasa a bajas temperaturas. En un experimento para evaluar 24 conjuntos diferentes de cebadores, la mezcla maestra PowerUp™ SYBR® Green generó curvas de fusión únicas el 100 % del tiempo, de conformidad con una amplificación muy específica.

Reproducibilidad ajustada en valores de CT en un amplio rango dinámico
La mezcla maestra PowerUp™ SYBR® Green demuestra una reproducibilidad excelente en un amplio rango dinámico para una variedad de dianas analizadas (consulte la figura). Además, esta mezcla maestra proporciona una amplificación eficaz en más de 6 registros de entrada de muestras. A diferencia de las mezclas de la competencia que pueden presentar inhibición en entradas elevadas de ADNc y bajos coeficientes de correlación en un experimento de rango dinámico, la mezcla maestra PowerUp™ SYBR® Green se mantiene de manera eficaz en el rango dinámico completo para ayudar a ofrecer la máxima confianza en la calidad de los datos (consulte la figura).

Inclusión de UDG para el control de la contaminación cruzada
La inclusión de uracilo-ADN glicosilasa (UDG) y dUTP en la mezcla maestra PowerUp™ SYBR® Green permite la degradación de cualquier producto de PCR anteriormente amplificado, lo que ayuda a evitar la contaminación de las reacciones posteriores de qPCR y posibles falsos positivos.

Estabilidad de reacciones montadas previamente
El control estricto de la ADN polimerasa Taq Dual-Lock™ en la mezcla maestra PowerUp™ SYBR® Green permite montar las reacciones hasta con 72 horas de antelación al inicio del ciclo sin afectar a los datos (consulte la figura). Esta uniformidad otorga a los usuarios confianza y flexibilidad para utilizar la mezcla maestra PowerUp™ SYBR® Green en numerosos flujos de trabajo¹.

Amplia compatibilidad con instrumentos
La mezcla maestra PowerUp™ SYBR® Green se puede emplear tanto en el modo de ciclo rápido como estándar y es compatible con todos los instrumentos de PCR en tiempo real de Applied Biosystems®2. También es compatible con los sistemas Bio-Rad IQ™5 y CFX96™ / CFX384™, así como con los sistemas Roche LightCycler® LC480 y Stratagene® MX3005P®. Para obtener resultados óptimos, las concentraciones de cebador recomendadas son de 300–800 nM.

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¹ La estabilidad anterior a la PCR se ve afectada no solo por la mezcla maestra, sino también por la diana que se está analizando. Para obtener la máxima confianza, los investigadores deben confirmar los perfiles de estabilidad de sus dianas específicas.
² Para obtener un rendimiento óptimo, se recomienda un ciclo estándar mediante el uso del sistema Applied Biosystems® 7900.