El kit TaqMan Fast Advanced Cells-to-Ct es un completo sistema de lisado celular diseñado para el análisis de expresión génica directamente de células cultivadas sin purificación de ARN. Los reactivos de lisis celular TaqMan Fast Advanced Cells-to-Ct se suministran con la mezcla de enzimas de transcripción inversa Fast Advanced de mayor sensibilidad, 2X tampones RT y la mejor mezcla maestra TaqMan Fast Advanced de su clase. El kit TaqMan Fast Advanced Cells-to-Ct le proporciona toda la sensibilidad que necesita en el flujo de trabajo más rápido disponible: obtenga los resultados del análisis de expresiones genéticas de una placa completa de células en aproximadamente 80 minutos.

• Completo: el flujo de trabajo optimizado incluye reactivos de lisis celular con eliminación de ADNg, nueva mezcla de enzimas Fast Advanced RT, tampón y nueva mezcla maestra TaqMan Fast Advanced
• Rápido: preparación de muestras en 7 minutos, lo que incluye el tratamiento de ADNasa, a temperatura ambiente
• Fácil: muestras lisas en un tubo o directamente en placas de cultivo
• Sólido: realice análisis de expresión génica de entre 10–100.000 células por muestra; los resultados son equivalentes a los que se obtienen con ARN purificado
• Eficaz: contiene reactivos suficientes para generar 500 resultados de PCR en tiempo real a partir de 100 muestras iniciales

Método único que elimina la necesidad de aislar el ARN de células cultivadas
El método Cells-to-Ct tiene como característica un reactivo de lisis único que lisa las células y protege el ARN. La extracción de ADN se produce simultáneamente en el paso de lisis de 5 minutos para ahorrar tiempo y mejorar la facilidad de uso. La lisis se detiene mediante la adición de “una solución de parada” que se une irreversiblemente a los reactivos de lisis.

El kit TaqMan Fast Advanced Cells-to-CT contiene reactivos de transcripción inversa (RT) para la síntesis de ADNc y la mezcla maestra TaqMan Fast Advanced para el análisis de PCR en tiempo real. Los juegos de cebadores/sondas TaqMan se venden por separado.

Preparación de muestras sencilla en 7 minutos
El kit TaqMan Fast Advanced Cells-to-CT está diseñado para 10–100.000 células/muestra cultivadas. Las células se lavan en PBS y se lisan en la solución durante cinco minutos a temperatura ambiente; el tratamiento de ADNasa se puede realizar simultáneamente. Para finalizar la lisis, las células se deben someter a un proceso de incubación de 2 minutos con solución de parada a temperatura ambiente. Los lisados ya están listos para la transcripción inversa o almacenamiento a –20 °C a corto plazo o -80 °C a largo plazo.

Maximizar la sensibilidad de la detección
A diferencia de algunos kits de la competencia que limitan la cantidad de lisado en la reacción de RT al 10 %, el kit TaqMan Fast Advanced Cells-to-CT puede albergar el 45 % del volumen total de reacción de RT como lisado celular. Además, el ADNc puede constituir hasta el 45 % del volumen de la reacción de PCR en tiempo real. El elevado volumen de lisados en la reacción de RT optimizada, junto con el elevado volumen de ADNc que se obtiene en la posterior PCR en tiempo real con la mezcla maestra TaqMan Fast Advanced, producen una sensibilidad máxima. La mezcla maestra amplifica el objetivo de forma precisa y exacta, y permite la detección de pequeñas cantidades de objetivo, como transcripciones expresadas a niveles bajos.

Reducción de la pérdida de muestras y del error de transferencia
Dado que las muestras se pueden procesar directamente en pocillos de cultivo (96 o 384 pocillos), la manipulación de las muestras y la posibilidad de pérdida de las muestras o de error de transferencia se reducen al mínimo, lo que permite disfrutar de un procesamiento de alto rendimiento rápido. A diferencia de los antiguos protocolos de aislamiento de ARN compuestos por varios pasos, con este kit no es necesario llevar a cabo ningún paso de calentamiento, lavado o centrifugación. El kit simplifica enormemente un laborioso proceso de 30–60 minutos y lo reduce a 7 minutos.

Compatible con los ensayos de expresión génica TaqMan estándar de oro
El flujo de trabajo del kit TaqMan Fast Advanced Cells-to-CT permite una evaluación de la expresión génica inigualable con cualquiera de los > 700 000 ensayos de expresión génica TaqMan. Este kit ha sido ampliamente probado para la especificidad con una amplia selección de ensayos de expresión génica TaqMan.

Rendimiento probado, probado en conjunto
Todos los componentes del kit TaqMan Fast Advanced Cells-to-CT se han optimizado para un rendimiento consistente y fiable. Esto elimina las conjeturas asociadas con la preparación de muestras separadas, la RT y los kits de PCR en tiempo real. Además, el kit TaqMan Fast Advanced Cells-to-CT se ha validado con los ensayos de expresión génica TaqMan para ofrecer una mayor garantía de calidad, lo que le da la sensibilidad que necesita en el flujo de trabajo de muestra a respuesta más rápido disponible.