Agarosa magnética anti-DYKDDDDK Pierce™
Agarosa magnética anti-DYKDDDDK Pierce™
Thermo Scientific™

Agarosa magnética anti-DYKDDDDK Pierce™

La agarosa magnética Thermo Scientific Pierce Anti-DYKDDDDK proporciona un método rápido y cómodo para la purificación e inmunoprecipitación (IP) deMás información
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Número de catálogoCantidad
A3679820 mL
A367974 mL
Número de catálogo A36798
Precio (MXN)
-
Cantidad:
20 mL
La agarosa magnética Thermo Scientific Pierce Anti-DYKDDDDK proporciona un método rápido y cómodo para la purificación e inmunoprecipitación (IP) de proteínas marcadas con DYKDDDDK de sistemas de expresión de proteínas in vitro, bacterias, levaduras y células de mamíferos. La secuencia de aminoácidos DYKDDDDK, comúnmente conocida como FLAG, es reconocida por un anticuerpo monoclonal de rata de alta afinidad (clon L5) que se une covalentemente a una partícula central de agarosa incrustada en magnetita.

Para la purificación de proteínas, la agarosa magnética se añade a una muestra que contiene proteínas marcadas con DYKDDDDK con la etiqueta en el terminal N o C. Las proteínas capturadas se separan magnéticamente del sobrenadante, y las proteínas no vinculadas específicamente se pueden lavar antes de disociar las proteínas marcadas con DYKDDDDK enlazadas con tampón de elución. La agarosa magnética se elimina de la solución mediante un soporte magnético o un instrumento como el procesador de partículas magnéticas KingFisher Flex. Los instrumentos automatizados son especialmente útiles para la purificación de mayor rendimiento y la detección de condiciones de purificación.

Las características incluyen:
Específico: los gránulos de base únicos y el anticuerpo altamente específico minimizan la unión fuera del objetivo (baja unión no específica)
Alta pureza: el protocolo de unión, lavado y elución optimizado permite una alta pureza
Alto rendimiento: el método de conjugación de anticuerpos especiales ofrece un alto rendimiento
Rápido: el protocolo de purificación completo normalmente tarda menos de 40 minutos
Económico: el protocolo de purificación permite múltiples usos
Versátil: los gránulos son compatibles con flujos de trabajo manuales y automáticos (p. ej., instrumentos KingFisher)

Características de la agarosa magnética Pierce Anti-DYKDDDDK:

Composición: anticuerpo anti-DYKDDDDK covalentemente enlazado a un soporte de agarosa magnética altamente entrecruzada
Magnetización: ferromagnético con baja remanencia
Tamaño de gránulo: 10–40 μm
Concentración de gránulos: 25 % de mezcla en solución salina tamponada con fosfato, 0,01 % de detergente Tween-20, 0,02 % de ácida sódica, pH 7,2
Capacidad de fijación: ≥3,2 mg de proteína DYKDDDDK-tGFP-HIS (∼32 kDa)/ml de gránulos sedimentados

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Volumen del lecho5 mL
Capacidad20 mL
FormularioLíquido
FormatoLíquido
FormulaciónSlurry: 25%
Tamaño de partículas25 to 30 μm
Línea de productosPierce
Tipo de productoAgarosa magnética
Cantidad20 mL
Condiciones de envíoHielo húmedo
Fase estacionariaAnticuerpos monoclonales anti-DYKDDDDK
MatrixMagnetic Agarose
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
5 ml de gránulos asentados. 20 ml suministrados en suspensión al 25 % en PBS con un 0,02 % de azida sódica.

Almacenar a 2–8 °C.

Preguntas frecuentes

How does Pierce Anti-DYKDDDDK Magnetic Agarose (Cat. No. A36797, A36798) work for purification of DYKDDDK-tagged recombinant proteins?

The amino acid sequence DYKDDDDK, commonly known as the ''Flag'' epitope group, is recognized by a high-affinity rat monoclonal antibody (clone L5) that is covalently attached to a magnetite-embedded agarose core particle.

For protein purification, the magnetic agarose is added to a sample containing DYKDDDDK-tagged proteins with the tag on either the N- or the C-terminus. Captured proteins are then magnetically separated from the supernatant, and non-specifically bound proteins can be washed away before dissociating bound DYKDDDDK-tagged proteins with elution buffer. The magnetic agarose is removed from the solution using a magnetic stand or an instrument such as the KingFisher Flex Magnetic Particle Processor. Automated instruments are especially useful for higher-throughput purifications and screening of purification conditions.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Purification and Isolation Support Center.

What is the slurry/suspension percentage for your anti-DYKDDDDK ("FLAG") products?

Anti-DYKDDDDK Magnetic Agarose (Cat. Nos. A36797, A36798, A36799B) is offered as a 25% suspension (1 mL of 25% suspension = 0.25 mL of settled beads). UltraLink-based Anti-DYKDDDDK Affinity Resin (Cat. Nos, A36801, A36803, A36804) is offered as a 50% slurry (1 mL of 50% slurry = 0.5 mL of settled resin).

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What is the binding capacity for your Anti-DYKDDDDH Magnetic Agarose?

Here is the binding capacity: ≥3.2 mg DYKDDDDK-tGFP-His protein (˜32kDa)/mL settled beads.

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How do I cleave off the DYKDDDDK ("FLAG") tag after purification?

An enterokinase cleavage site behind the DYKDDDDK (“FLAG”) tag can allow complete removal of the DYKDDDDK (“FLAG”) tag leaving no additional amino acids. We offer EKMax Enterokinase (Cat. Nos. E18001 and E18002) that can be used for this purpose. Subsequently, the EKMax Enterokinase can be removed using EK-Away Resin (Cat. No. R18001), a resin conjugated with soybean trypsin inhibitor, which has high affinity for enterokinase.

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