Kits de preparación de muestras para MS EasyPep™
Kits de preparación de muestras para MS EasyPep™
Citas y referencias (4)
Thermo Scientific™

Kits de preparación de muestras para MS EasyPep™

Genere muestras proteómicas de alta calidad para el análisis mediante MS en menos de cuatro horas gracias a los kits optimizados de preparación de muestras para MS EasyPep.
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Número de catálogoDescripción
A45733Kit de preparación de muestras MS
A40006Kit de preparación de muestras Mini para MS
A57864Kit de preparación de muestras Micro MS
A45734Kit de preparación de muestras Maxi
A45735Tampón de lisis
A57865Placa de limpieza de péptidos
Número de catálogo A45733
Precio (MXN)
-
Descripción:
Kit de preparación de muestras MS

Los kits de preparación de muestras para MS EasyPep Mini permiten el procesamiento eficaz y reproducible de células y tejidos cultivados de mamíferos para el análisis proteómico de MS. El kit contiene tampones preformulados, mezcla de enzimas de grado MS, columnas de limpieza de péptidos y un protocolo optimizado para generar muestras de péptidos compatibles con MS en menos de tres horas. Los kits están optimizados para procesar muestras de proteínas de 10 a 100 μg con un alto rendimiento de péptidos preparados para MS.

• Completo: incluye reactivos preformulados para la lisis mediante digestión con columnas de limpieza de péptidos y un protocolo optimizado para hasta 20 muestras
• Optimizado: el protocolo y los reactivos optimizados minimizan el número de pasos y el tiempo necesario para procesar las muestras
• Flexible: los reactivos y el protocolo se han verificado utilizando muestras de células y tejidos para muestras entre 10 y 100 µg
• Ahorro de tiempo: tiempo de procesamiento de muestras reducido de más de un día a menos de tres horas
• Compatible: la preparación final está lista para el análisis directo de MS y otras aplicaciones posteriores, incluido el etiquetado TMT

La preparación de muestras de péptidos para el análisis de MS es compleja, con numerosos pasos y protocolos variados, lo que resulta en variabilidad de la muestra tanto de calidad como de cantidad. Este kit se ha diseñado para mejorar la reproducibilidad y, al mismo tiempo, ahorrar tiempo de manipulación y procesamiento. El número de pasos y el tiempo de procesamiento se han reducido mediante la adición de nucleasas universales para reducir la viscosidad de los ácidos nucleicos (sustitución de la administración de ultrasonidos), una rápida solución de reducción/alquilación de «un pocillo» para la modificación de la cisteína (carbamidometilación, + 57,02) y una mezcla de tripsina/proteasa Lys-C para una digestión más completa. Además, el kit incluye columnas de limpieza de péptidos y tampones para preparar muestras de péptidos sin detergente para el análisis de MS. Los reactivos y protocolos optimizados producen péptidos de alta calidad que son compatibles con el etiquetado TMT y otras aplicaciones posteriores, o que están listos para el análisis de MS.

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
Especificaciones
DescripciónKit de preparación de muestras MS
Tipo de producto finalpéptidos
Para utilizar con (equipo)Espectrómetro de masas
Etiqueta o tinteSin marcar
Cantidad96 reacciones
Condiciones de envíoHielo húmedo
Paso del flujo de trabajoDigestión de proteínas
Método de detecciónEspectrometría de masas
FormatoKit
Línea de productosEasyPep
Tipo de productoKit de preparación de muestras
Material de partidaMuestras de proteínas
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
  • Solución de lisis, 25 ml, almacenar a 4 °C
  • Nucleasa universal, 25 kU, almacenar a - 20 °C
  • Solución de reducción, 7 ml, almacenar a 4 °C.
  • Solución de alquilación, 7 ml, almacenar a 4 °C
  • Solución de reconstitución enzimática, 7 ml, almacenar a 4 °C.
  • Mezcla de proteasas Pierce Tripsina / Lys-C, grado MS, 5 x 100 µg, almacenar a - 20 °C
  • Solución de parada de digestión, 7 ml, almacenar a 4 °C.
  • Placa de limpieza de péptidos, 1 Ea., almacenar a 4 °C.
  • Placa de lavado y elución, 1 Ea., almacenar a 4 °C
  • Placa de preparación de muestras, 1 Ea., almacenar a 4 °C.
  • Solución de lavado A, 40 ml, almacenar a 4 °C.
  • Solución de lavado B, 3 x 27 ml, almacenar a 4 °C.
  • Solución de elución, 2 x 20 ml, almacenar a 4 °C.

Preguntas frecuentes

Are the EasyPep MS Sample Prep Kits compatible with vacuum pumps/dry-down devices?

As per protocol, peptide samples need to be dried down prior to LC-MS analysis. This step can be performed using vacuum pumps/dry-down devices without any harm caused to the device by the components present in the elution buffer within the EasyPep MS Sample Prep Kits.

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I have a lot of plasma samples to prepare for mass spectrometry analysis. Is there a way to perform abundant protein depletion in a 96-well plate?

The bulk Top14 depletion resin is compatible with a 96-well filter plate such as the Agilent filter microplate (Cat. No. 200957-100). Add 600 µL of resin slurry (50%) to each of the wells in the 96-well filter plate, add 10-20 µL of sample, and incubate with gentle shaking. Depleted samples can be collected in a new 96-well polypropylene plate by centrifugation for 2 mins at 1,000 x g or by using a vacuum manifold.

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After cell lysis, my mass spectrometry sample is very viscous and difficult to pipette. How do I reduce the sample viscosity?

High sample viscosity after lysis is due to release of DNA from the nucleus. Sonication or addition of a nuclease such as the Pierce Universal Nuclease (Cat. No. 88700, 88701, or 88702) can be used to degrade DNA and reduce sample viscosity.

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How do I process yeast samples with EasyPep Mini MS Sample prep Kit?

Add 0.5 mm diameter glass beads to the sample pelleted in Easy Pep Lysis Solution and proceed as recommended in the Easy Pep sample prep protocol. Vortex vigorously for few minutes, spin at 16,000 x g for 5 mins, and extract the supernatant for protein assay and further downstream sample preparation.

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How do I process bacterial samples with EasyPep MS Sample Prep kits?

Add 1-2 µL of 50 mg/mL Lysozyme Solution (Cat. No. 90082) to 200 µL of the EasyPep lysis buffer provided in the kit and proceed with the sample prep. Add 200 µL of the prepared lysis solution to 5 X 10E8 bacterial cells (E. coli cells) (OD600 equal to 1, corresponding to 1 X 10E8 CFUs). Lyse by pipetting the sample repeatedly and centrifuge at 16,000 x g for 5 mins. Alternatively, E. coli cells can be lysed in lysis buffer using bead beating or sonication instead of lysozyme. After lysis, dilute samples to 1 mg/mL using lysis buffer, proceed with the EasyPep protocol for reduction, alkylation, digestion, and clean up as described in the product manual.

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Citations & References (4)

Citations & References
Abstract
Discovery of Orally Available and Brain Penetrant AEP Inhibitors.
Authors:Krummenacher D,He W,Kuhn B,Schnider C,Beurier A,Brom V,Sivasothy T,Marty C,Tosstorff A,Hewings DS,Mesch S,Pinard E,Brändlin M,Hochstrasser R,Westwood P,Rothe J,Kronenberger A,Morandi F,Gutbier S,Schuler A,Heer D,Gloria LE,Joedicke L,Rudolph MG,Müller L,Grüninger F,Baumann K,Kaniyappan S,Manevski N,Bartels B
Journal:Journal of medicinal chemistry
PubMed ID:38090813
Alzheimer's Disease (AD) is the most widespread form of dementia, with one of the pathological hallmarks being the formation of neurofibrillary tangles (NFTs). These tangles consist of phosphorylated Tau fragments. Asparagine endopeptidase (AEP) is a key Tau cleaving enzyme that generates aggregation-prone Tau fragments. Inhibition of AEP to reduce the ... More
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Journal:Research square
PubMed ID:38659866
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PubMed ID:39254217
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