El kit MEGAscript™ T7 es un kit de transcripción in vitro con una producción extremadamente elevada. Los altos niveles de producción se logran mediante la modificación de las condiciones de reacción a la transcripción, de manera que se pueden emplear de manera eficaz concentraciones de nucleótidos muy elevadas. La mezcla de enzimas T7 y el tampón de reacción 10X se calibran específicamente para cada lote y ARN polimerasa.

Uso del kit MEGAscript™ T7
El kit MEGAscript™ T7 contiene componentes de reacción a la transcripción in vitro y una plantilla de control. El kit producirá un total de 3 a 5 mg de ARN (aproximadamente 100 µg de ARN o más por reacción) de la plantilla de control suministrada con el kit. Esto corresponde a entre 400 y 650 moles de ARN para cada mol de la plantilla. Las plantillas de menor tamaño suelen generar una menor masa molar y un mayor rendimiento molar del producto. Las nuevas condiciones de reacción de transcripción y una tecnología patentada de alto rendimiento permiten la síntesis de 10 a 50 veces la cantidad de ARN producida por las reacciones de transcripción convencionales.

Aplicaciones
El kit MEGAscript™ T7 se ha diseñado para sintetizar grandes cantidades de ARN sin etiquetar o de baja actividad específica para diversos usos, incluida la translación in vitro, estudios de antidetección o microinyección y el aislamiento de proteínas de unión de ARN. En reacciones de transcripción a gran escala, la concentración de los 4 nucleótidos es alta, muy por encima de la K_m de la enzima. El kit MEGAscript™ T7 produce generalmente 10 veces más ARN que las reacciones de transcripción in vitro convencionales. El kit no se recomienda para la síntesis de sondas de alta actividad específica.

Productos accesorios
Los kits de amplificación de ARNa MessageAmp™ cuentan con tecnología MEGAscript™ y han sido desarrollados especialmente para la amplificación del ARNc antes del análisis de matrices Para purificar productos de transcripción in vitro de nucleótidos libres, componentes de tampón y enzimas, se recomienda utilizar el kit MEGAclear™ (n.º de cat. AM1908) y el kit MEGAclear™-96 (n.º de de cat. AM1909).