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Invitrogen™
Click-iT™ HPG Alexa Fluor™ 488 Protein Synthesis Assay Kit
El kit de ensayo de síntesis de proteínas Click-iT™ HPG Alexa Fluor™ 488 proporciona un método rápido, sensible, no tóxicoMás información
| Número de catálogo | Cantidad |
|---|---|
| C10428 | 1 kit |
Número de catálogo C10428
Precio (MXN)
-
Cantidad:
1 kit
El kit de ensayo de síntesis de proteínas Click-iT™ HPG Alexa Fluor™ 488 proporciona un método rápido, sensible, no tóxico y no radiactivo para la detección de la síntesis de proteínas nacientes utilizando microscopía de fluorescencia, imágenes de alto contenido o citometría de flujo. El kit incluye L-homopropargilglicina (HPG), un aminoácido análogo de la metionina que contiene una moiedad de alquinos y azida de Alexa Fluor™ 488. Con la HPG se alimenta a células cultivadas y se incorpora a proteínas durante la síntesis de proteínas activas. La adición de la azida de Alexa Fluor™ 488 genera una ligadura quimioselectiva o reacción de clic entre la azida fluorescente verde y el alquino, lo que permite que las proteínas modificadas se detecten mediante un análisis basado en imágenes.
• Alternativa no radiactiva: una alternativa a la tradicional 35S-metionina
• Visualizar los valores dinámicos de proteínas en bloque: el etiquetado fluorescente de proteínas permite determinar su localización, incluyendo la agregación
• Especificidad: reacción específica y selectiva entre etiquetas de detección y de etiquetado
• Estabilidad: el producto contiene un enlace covalente irrevesible
• Multiplex activado: se usa en conjunto con Click™-iT AHA (aminoácido azida y colorante alquino) para detectar diferencias espaciales y temporales
• Aplicabilidad a muestras biológicas: detección sencilla, alta sensibilidad y bajo fondo, independientemente de la complejidad
El kit de ensayo de síntesis de proteínas Click-iT™ HPG Alexa Fluor™ 488 se ha probado con éxito en células HeLa, A549 y U-2 OS con una variedad de reactivos que inhiben la síntesis de proteínas, incluyendo cicloheximida y anisomicina. La aplicabilidad de estas sondas para supervisar la degradación de las proteínas también se ha demostrado mediante inhibidores del proteasoma (MG132 y Bortezomib) y bloqueadores de la autofagia (cloroquina) en células HeLa.
Además, debido a las diferencias en la química de Click-iT™ entre el kit de ensayo de síntesis de proteínas Click-iT™ HPG Alexa Fluor™ 488 y Click™-iT AHA con Alexa Fluor™ 594 Alkyne, estos reactivos pueden usarse en conjunto para la determinación espacial o temporal de las diferencias en la síntesis de proteínas nacientes.
• Alternativa no radiactiva: una alternativa a la tradicional 35S-metionina
• Visualizar los valores dinámicos de proteínas en bloque: el etiquetado fluorescente de proteínas permite determinar su localización, incluyendo la agregación
• Especificidad: reacción específica y selectiva entre etiquetas de detección y de etiquetado
• Estabilidad: el producto contiene un enlace covalente irrevesible
• Multiplex activado: se usa en conjunto con Click™-iT AHA (aminoácido azida y colorante alquino) para detectar diferencias espaciales y temporales
• Aplicabilidad a muestras biológicas: detección sencilla, alta sensibilidad y bajo fondo, independientemente de la complejidad
El kit de ensayo de síntesis de proteínas Click-iT™ HPG Alexa Fluor™ 488 se ha probado con éxito en células HeLa, A549 y U-2 OS con una variedad de reactivos que inhiben la síntesis de proteínas, incluyendo cicloheximida y anisomicina. La aplicabilidad de estas sondas para supervisar la degradación de las proteínas también se ha demostrado mediante inhibidores del proteasoma (MG132 y Bortezomib) y bloqueadores de la autofagia (cloroquina) en células HeLa.
Además, debido a las diferencias en la química de Click-iT™ entre el kit de ensayo de síntesis de proteínas Click-iT™ HPG Alexa Fluor™ 488 y Click™-iT AHA con Alexa Fluor™ 594 Alkyne, estos reactivos pueden usarse en conjunto para la determinación espacial o temporal de las diferencias en la síntesis de proteínas nacientes.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Método de detecciónFluorescente
Tipo de coloranteProteínas (nacientes)
FormularioLíquido
Características ecológicasMenos peligroso
Cantidad1 kit
ColorVerde
EmissionVisible
Para utilizar con (aplicación)Ensayo de síntesis de proteínas
Para utilizar con (equipo)Microscopio de fluorescencia, Generador de imágenes de fluorescencia
Línea de productosAlexa Fluor, Click-iT
Tipo de productoKit de ensayo de síntesis de proteínas
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
- Almacenar entre 2 °C y 6 °C
- NO CONGELAR
- Proteja el material de la exposición a la luz a largo plazo; puede estar expuesto a la luz durante periodos cortos de tiempo.
Citations & References (5)
Citations & References
Abstract
Selective identification of newly synthesized proteins in mammalian cells using bioorthogonal noncanonical amino acid tagging (BONCAT).
Journal:Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America
PubMed ID:16769897
In both normal and pathological states, cells respond rapidly to environmental cues by synthesizing new proteins. The selective identification of a newly synthesized proteome has been hindered by the basic fact that all proteins, new and old, share the same pool of amino acids and thus are chemically indistinguishable. We
In situ visualization and dynamics of newly synthesized proteins in rat hippocampal neurons.
Journal:Nature neuroscience
PubMed ID:20543841
Protein translation has been implicated in different forms of synaptic plasticity, but direct in situ visualization of new proteins is limited to one or two proteins at a time. Here we describe a metabolic labeling approach based on incorporation of noncanonical amino acids into proteins followed by chemoselective fluorescence tagging
Two-color labeling of temporally defined protein populations in mammalian cells.
Journal:Bioorganic & medicinal chemistry letters
PubMed ID:18774715
The proteome undergoes complex changes in response to disease, drug treatment, and normal cellular signaling processes. Characterization of such changes requires methods for time-resolved protein identification and imaging. Here, we describe the application of two reactive methionine (Met) analogues, azidohomoalanine (Aha) and homopropargylglycine (Hpg), to label two protein populations in
Fluorescence visualization of newly synthesized proteins in mammalian cells.
Journal:Angewandte Chemie (International ed. in English)
PubMed ID:17036290
Noncanonical amino acid tagging enables the selective fluorescent visualization of newly synthesized proteins in mammalian cells (see the picture). Susceptibility to tagging is determined by the spatial and temporal character of the protein synthesis, thus providing a complement to methods which identify relevant members of the proteome.
Spatial coupling of mTOR and autophagy augments secretory phenotypes.
Journal:Science (New York, N.Y.)
PubMed ID:21512002
Protein synthesis and autophagic degradation are regulated in an opposite manner by mammalian target of rapamycin (mTOR), whereas under certain conditions it would be beneficial if they occurred in unison to handle rapid protein turnover. We observed a distinct cellular compartment at the trans side of the Golgi apparatus, the