CellLight™ Actin-RFP, BacMam 2.0
CellLight™ Actin-RFP, BacMam 2.0
Invitrogen™

CellLight™ Actin-RFP, BacMam 2.0

CellLight™ Actin-RFP, BacMam 2.0, proporciona un método sencillo de etiquetar actina con proteína roja fluorescente (RFP) en células vivas. SolamenteMás información
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Número de catálogoCantidad
C105831 vial(es)
Número de catálogo C10583
Precio (MXN)
-
Cantidad:
1 vial(es)
CellLight™ Actin-RFP, BacMam 2.0, proporciona un método sencillo de etiquetar actina con proteína roja fluorescente (RFP) en células vivas. Solamente tiene que añadir reactivo a las células y dejarlas incubar toda la noche; por la mañana, las células estarán listas.

¿Desea etiquetar otras estructuras celulares? Obtenga más información sobre las herramientas de etiquetado de proteínas fluorescentes CellLight™

Esta construcción lista para su uso se transfecta en las células mediante tecnología BacMam 2.0. y expresa la RFP fusionada a la actina humana casi sin citotoxicidad. Estudie la acción dinámica de los filamentos de actina en células vivas y multiplex mediante otras proteínas fluorescentes o tintes orgánicos.

Las células que expresan construcciones CellLight™ también se pueden fijar con formaldehído para la adquisición de imágenes multiplex mediante técnicas inmunocitoquímicas.

La tecnología CellLight™ es:
Rápida y cómoda: solamente tiene que añadir reactivo CellLight™ a las células, dejarlas incubar durante la noche y realizar la adquisición de imágenes, o bien almacenar las células congeladas listas para ensayos para utilizarlas posteriormente
Muy eficaz: hasta un 90 % de transducción de una amplia variedad de líneas celulares de mamíferos, incluidas las células primarias, las células madre y las neuronas.
Flexible: cotransduzca más de un reactivo BacMam para experimentos multiplex o estudios de colocalización; controle de cerca los niveles de expresión mediante simples variaciones de la dosis.
Menos tóxica: Los reactivos CellLight™ no se replican en células de mamíferos y son adecuados para la manipulación de nivel de bioseguridad (BSL) 1

Tecnología BacMam

CellLight™ Actin-RFP, BacMam 2.0, es una construcción fusionada de actina humana y TagRFP que se dirige de forma precisa y específica a la actina celular-RFP. Esta construcción fusionada está envasada en el baculovirus del virus de insecto, que no se replica en las células humanas y está designado como seguro para su uso en la mayoría de laboratorios con nivel de bioseguridad (BSL) 1. La tecnología BacMam garantiza que la mayoría de los tipos de células de mamíferos se transduzcan o transfecten con alta eficacia y una toxicidad mínima. Esta transfección transitoria se puede detectar tras una incubación nocturna durante hasta cinco días, tiempo suficiente para llevar a cabo la mayoría de análisis celulares dinámicos. Como cualquier otra técnica de transfección o transducción, el método BacMam no transfecta o transduce todas las células con la misma eficacia, lo que hace que no sea adecuado para estudios de población celular o procesos de recuento o adquisición de imágenes automatizados. Los reactivos CellLight™ son perfectos para experimentos en los que se requiere la colocalización celular o subcelular o para estudios de la función celular que necesiten una resolución especial.

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

Especificaciones
ColorRojo-naranja
Método de detecciónFluorescente
Tipo de coloranteRFP (TagRFP)
EmisiónVisible
Intervalo de longitud de onda de excitación555⁄584
Para utilizar con (equipo)Microscopio de fluorescencia, citómetro de flujo, imagen fluorescente
FormularioLíquido
Línea de productosCellLight, Molecular Probes
Cantidad1 vial(es)
Condiciones de envíoHielo húmedo
Función de destinoEstructura celular
Tipo de etiquetaProteína fluorescente
Tipo de productoActina
SubCellular LocalizationActina
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
De 2 °C a 6 °C, proteger de la luz No la congele.

Preguntas frecuentes

How can I increase the transduction efficiency with the BacMam 2.0 reagents such as the the CellLight and Premo products?

Try varying particle-to-cell ratio (PPC), incubation volume, temperature and, cell density (if adherent cells are transduced). For adherent cells, we recommend a confluence of about 70%. Following the PPC, adjusting the volume is the next best parameter to change to optimize protein expression. If that doesn't work, you can also use the BacMam Enhancer Kit (Cat. No. B10107).

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Is there any way to preserve the CellLights labeling beyond 5 days?

Cells transduced with the CellLights reagents can be stored frozen for several months after transduction, without loss of expression.

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Are the CellLights products toxic to cells?

If the viral particles are used at the level we recommend, they are very well tolerated by cells.

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For how long will the CellLights products label my cells?

The BacMam 2.0 CellLights typically express for 5 days after transduction.

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What cell types can the CellLights products be used with?

The first generation BacMam reagents were shown to efficiently transduce over 90 cell types, including stable cell lines and primary cells. With BacMam 2.0, it is now possible to also efficiently transduce primary neurons and stem cells.

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Citations & References (14)

Citations & References
Abstract
A Review of Reagents for Fluorescence Microscopy of Cellular Compartments and Structures, Part III: Reagents for Actin, Tubulin, Cellular Membranes, and Whole Cell and Cytoplasm.
Authors:Kilgore JA, Dolman NJ, Davidson MW,
Journal:
PubMed ID:24510770
'Non-antibody commercial fluorescent reagents for imaging of cytoskeletal structures have been limited primarily to tubulin and actin, with the main factor in choice based mainly on whether cells are live or fixed and permeabilized. A wider range of options exist for cell membrane dyes, and the choice of reagent primarily ... More
Stress fibers stabilize the position of intranuclear DNA through mechanical connection with the nucleus in vascular smooth muscle cells.
Authors:Nagayama K, Yahiro Y, Matsumoto T,
Journal:FEBS Lett
PubMed ID:22094165
Actin stress fibers (SFs) running across the top surface of the nucleus in vascular smooth muscle cells were dissected using laser nano-dissection technique to release its pretension, and the dynamic behavior of SFs, nucleus, and intranuclear DNA were investigated. SFs shortened across the top surface of the nuclei after their ... More
Role of c-Met/phosphatidylinositol 3-kinase (PI3k)/Akt signaling in hepatocyte growth factor (HGF)-mediated lamellipodia formation, reactive oxygen species (ROS) generation, and motility of lung endothelial cells.
Authors:Usatyuk PV, Fu P, Mohan V, Epshtein Y, Jacobson JR, Gomez-Cambronero J, Wary KK, Bindokas V, Dudek SM, Salgia R, Garcia JG, Natarajan V,
Journal:
PubMed ID:24634221
Hepatocyte growth factor (HGF) mediated signaling promotes cell proliferation and migration in a variety of cell types and plays a key role in tumorigenesis. As cell migration is important to angiogenesis, we characterized HGF-mediated effects on the formation of lamellipodia, a pre-requisite for migration using human lung microvascular endothelial cells ... More
Viscoelastic cell mechanics and actin remodelling are dependent on the rate of applied pressure.
Authors:Pravincumar P, Bader DL, Knight MM,
Journal:PLoS One
PubMed ID:22984454
Living cells are subjected to external and internal mechanical stresses. The effects of these stresses on the deformation and subsequent biological response of the cells remains unclear. This study tested the hypothesis that the rate at which pressure (or stress) is applied influence the viscoelastic properties of the cell associated ... More
Baculovirus-mediated gene transfer into mammalian cells.
Authors:Boyce FM, Bucher NL,
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:8637876
This paper describes the use of the baculovirus Autographa californica multiple nuclear polyhedrosis virus (AcMNPV) as a vector for gene delivery into mammalian cells. A modified AcMNPV virus was prepared that carried the Escherichia coli lacZ reporter gene under control of the Rous sarcoma virus promoter and mammalian RNA processing ... More