CellLight™ ER-RFP, BacMam 2.0
CellLight™ ER-RFP, BacMam 2.0
Invitrogen™

CellLight™ ER-RFP, BacMam 2.0

CellLight™ ER-RFP, BacMam 2.0, proporciona un método sencillo para etiquetar el retículo endoplásmico (ER) con proteína rojo fluorescente (RFP) enMás información
Have Questions?
Número de catálogoCantidad
C105911 vial
Número de catálogo C10591
Precio (MXN)
-
Cantidad:
1 vial
CellLight™ ER-RFP, BacMam 2.0, proporciona un método sencillo para etiquetar el retículo endoplásmico (ER) con proteína rojo fluorescente (RFP) en células vivas. Solamente tiene que añadir reactivo a las células y dejarlas incubar toda la noche; por la mañana, las células estarán listas.

¿Desea etiquetar otras estructuras celulares? Más información sobre las herramientas de marcado de proteínas fluorescentes CellLight™

Esta construcción lista para usar se transfecta en las células utilizando la tecnología BacMam 2.0 y expresa RFP fusionada a la secuencia de señal ER de calreticulina y KDEL (señal de retención ER) con una interrupción celular mínima. Puede observar el comportamiento de ER-RFP en células vivas mediante imágenes fluorescentes y multiplexado con otras proteínas fluorescentes o colorantes orgánicos.

Las células que expresan construcciones CellLight™ también se pueden fijar con formaldehído para la adquisición de imágenes multiplexadas mediante técnicas inmunocitoquímicas.

La tecnología CellLight™ es:
Rápida y cómoda: solamente tiene que añadir reactivo CellLight™ a las células, dejarlas incubar durante la noche y realizar la adquisición de imágenes, o bien almacenar las células congeladas listas para ensayos para utilizarlas posteriormente
Muy eficaz: hasta un 90 % de transducción de una amplia variedad de líneas celulares de mamíferos, incluidas las células primarias, las células madre y las neuronas.
Flexible: cotransduzca más de un reactivo BacMam para experimentos multiplex o estudios de colocalización; controle de cerca los niveles de expresión mediante simples variaciones de la dosis.
Menos tóxica: Los reactivos CellLight™ no se replican en células de mamíferos y son adecuados para la manipulación de nivel de bioseguridad (BSL) 1

Tecnología BacMam
CellLight™ ER-RFP, BacMam 2.0, es una construcción fusionada de secuencia de señal de ER de calreticulina y KDEL (señal de retención de ER) y TagRFP que se dirige de forma precisa y específica al ER celular-RFP. Esta construcción fusionada está envasada en el baculovirus del virus de insecto, que no se replica en las células humanas y está designado como seguro para su uso en la mayoría de laboratorios con nivel de bioseguridad (BSL) 1. La tecnología BacMam garantiza que la mayoría de los tipos de células de mamíferos se transduzcan o transfecten con alta eficacia y una toxicidad mínima. Esta transfección transitoria se puede detectar tras una incubación nocturna durante hasta cinco días, tiempo suficiente para llevar a cabo la mayoría de análisis celulares dinámicos. Como cualquier otra técnica de transfección o transducción, el método BacMam no transfecta o transduce todas las células con la misma eficacia, lo que hace que no sea adecuado para estudios de población celular o procesos de recuento o adquisición de imágenes automatizados. Los reactivos CellLight™ son perfectos para experimentos en los que se requiere la colocalización celular o subcelular o para estudios de la función celular que necesiten una resolución especial.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
ColorRojo-naranja, naranja
Método de detecciónFluorescente
Tipo de coloranteRFP (TagRFP)
EmisiónVisible
Intervalo de longitud de onda de excitación555⁄584
Para utilizar con (equipo)Microscopio confocal, microscopio de fluorescencia
FormularioLíquido
Línea de productosCellLight
Cantidad1 vial
Condiciones de envíoHielo húmedo
TécnicaIntensidad de fluorescencia
Tipo de etiquetaProteína fluorescente
Tipo de productoRetículo endoplásmico
SubCellular LocalizationRetículo endoplásmico
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Almacenar de 2 °C a 6 °C, protegido de la luz. No congelar.

Preguntas frecuentes

How can I increase the transduction efficiency with the BacMam 2.0 reagents such as the the CellLight and Premo products?

Try varying particle-to-cell ratio (PPC), incubation volume, temperature and, cell density (if adherent cells are transduced). For adherent cells, we recommend a confluence of about 70%. Following the PPC, adjusting the volume is the next best parameter to change to optimize protein expression. If that doesn't work, you can also use the BacMam Enhancer Kit (Cat. No. B10107).

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Is there any way to preserve the CellLights labeling beyond 5 days?

Cells transduced with the CellLights reagents can be stored frozen for several months after transduction, without loss of expression.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Are the CellLights products toxic to cells?

If the viral particles are used at the level we recommend, they are very well tolerated by cells.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

For how long will the CellLights products label my cells?

The BacMam 2.0 CellLights typically express for 5 days after transduction.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

What cell types can the CellLights products be used with?

The first generation BacMam reagents were shown to efficiently transduce over 90 cell types, including stable cell lines and primary cells. With BacMam 2.0, it is now possible to also efficiently transduce primary neurons and stem cells.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Citations & References (22)

Citations & References
Abstract
Mutations in MCT8 in patients with Allan-Herndon-Dudley-syndrome affecting its cellular distribution.
Authors:Kersseboom S, Kremers GJ, Friesema EC, Visser WE, Klootwijk W, Peeters RP, Visser TJ,
Journal:Mol Endocrinol
PubMed ID:23550058
'Monocarboxylate transporter 8 (MCT8) is a thyroid hormone (TH)-specific transporter. Mutations in the MCT8 gene are associated with Allan-Herndon-Dudley Syndrome (AHDS), consisting of severe psychomotor retardation and disturbed TH parameters. To study the functional consequences of different MCT8 mutations in detail, we combined functional analysis in different cell types with ... More
Single-cell redox imaging demonstrates a distinctive response of dopaminergic neurons to oxidative insults.
Authors:Horowitz MP, Milanese C, Di Maio R, Hu X, Montero LM, Sanders LH, Tapias V, Sepe S, van Cappellen WA, Burton EA, Greenamyre JT, Mastroberardino PG,
Journal:Antioxid Redox Signal
PubMed ID:21395478
'The study of the intracellular oxido-reductive (redox) state is of extreme relevance to the dopamine (DA) neurons of the substantia nigra pars compacta. These cells possess a distinct physiology intrinsically associated with elevated reactive oxygen species production, and they selectively degenerate in Parkinson''s disease under oxidative stress conditions. To test ... More
Intracellular trafficking mechanism, from intracellular uptake to extracellular efflux, for phospholipid/cholesterol liposomes.
Authors:Un K, Sakai-Kato K, Oshima Y, Kawanishi T, Okuda H,
Journal:Biomaterials
PubMed ID:22858002
'Liposomes are widely used as drug delivery vehicles to transfer chemotherapeutic agents, proteins, and nucleic acids into target cells. To improve therapeutic effects and reduce unexpected toxic side-effects, it is necessary to understand the mechanism of liposomal uptake into cells, and the intracellular fate of internalized liposomes. The intracellular fate ... More
BPIFB3 regulates autophagy and coxsackievirus B replication through a noncanonical pathway independent of the core initiation machinery.
Authors:Delorme-Axford E, Morosky S, Bomberger J, Stolz DB, Jackson WT, Coyne CB,
Journal:
PubMed ID:25491355
'Enteroviruses require autophagy to facilitate the formation of autophagosome (AP)-like double-membrane vesicles that provide the scaffolding for RNA replication. Here, we identify bactericidal/permeability-increasing protein (BPI) fold-containing family B, member 3 (BPIFB3) as a gene whose silencing greatly enhances coxsackievirus B (CVB) replication and induces dramatic alterations in the morphology of ... More
The amyloid precursor protein copper binding domain histidine residues 149 and 151 mediate APP stability and metabolism.
Authors:Spoerri L, Vella LJ, Pham CL, Barnham KJ, Cappai R,
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:22685292
One of the key pathological hallmarks of Alzheimer disease (AD) is the accumulation of the APP-derived amyloid ß peptide (Aß) in the brain. Altered copper homeostasis has also been reported in AD patients and is thought to increase oxidative stress and to contribute to toxic Aß accumulation and regulate APP ... More