CellLight™ Golgi-GFP, BacMam 2.0
CellLight™ Golgi-GFP, BacMam 2.0
Invitrogen™

CellLight™ Golgi-GFP, BacMam 2.0

CellLight™ Golgi-GFP, BacMam 2.0, proporciona un método sencillo de etiquetar golgi con proteína verde fluorescente (GFP) en células vivas. SolamenteMás información
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Número de catálogoCantidad
C105921 vial
Número de catálogo C10592
Precio (MXN)
-
Cantidad:
1 vial
CellLight™ Golgi-GFP, BacMam 2.0, proporciona un método sencillo de etiquetar golgi con proteína verde fluorescente (GFP) en células vivas. Solamente tiene que añadir reactivo a las células y dejarlas incubar toda la noche; por la mañana, las células estarán listas.

¿Desea etiquetar otras estructuras celulares? Obtenga más información sobre las herramientas de etiquetado de proteínas fluorescentes CellLight™

Esta construcción lista para su uso se transfecta en las células utilizando la tecnología BacMam 2.0 donde expresa la GFP fusionada a la enzima residente golgi humana (N-acetilgalactosaminiltransferasa). Puede observar el comportamiento de Golgi-GFP en células vivas mediante imágenes fluorescentes y multiplexado con otras proteínas fluorescentes o colorantes orgánicos.

Las células que expresan construcciones CellLight™ también se pueden fijar con formaldehído para la adquisición de imágenes multiplexadas mediante técnicas inmunocitoquímicas.

La tecnología CellLight™ es:
Rápida y cómoda: solamente tiene que añadir reactivo CellLight™ a las células, dejarlas incubar durante la noche y realizar la adquisición de imágenes, o bien almacenar las células congeladas listas para ensayos para utilizarlas posteriormente
Muy eficaz: hasta un 90 % de transducción de una amplia variedad de líneas celulares de mamíferos, incluidas las células primarias, las células madre y las neuronas.
Flexible: cotransduzca más de un reactivo BacMam para experimentos multiplex o estudios de colocalización; controle de cerca los niveles de expresión mediante simples variaciones de la dosis.
Menos tóxica: Los reactivos CellLight™ no se replican en células de mamíferos y son adecuados para la manipulación de nivel de bioseguridad (BSL) 1

Tecnología BacMam
CellLight™ Golgi-GFP, BacMam 2.0 es una construcción fusionada de la enzima residente golgi humana (N-acetilgalactosaminiltransferasa) y emGFP que se dirige de forma precisa y específica al golgi celular-GFP. Esta construcción fusionada está envasada en el baculovirus del virus de insecto, que no se replica en las células humanas y está designado como seguro para su uso en la mayoría de laboratorios con nivel de bioseguridad (BSL) 1. La tecnología BacMam garantiza que la mayoría de los tipos de células de mamíferos se transduzcan o transfecten con alta eficacia y una toxicidad mínima. Esta transfección transitoria se puede detectar tras una incubación nocturna durante hasta cinco días, tiempo suficiente para llevar a cabo la mayoría de análisis celulares dinámicos. Como cualquier otra técnica de transfección o transducción, el método BacMam no transfecta o transduce todas las células con la misma eficacia, lo que hace que no sea adecuado para estudios de población celular o procesos de recuento o adquisición de imágenes automatizados. Los reactivos CellLight™ son perfectos para experimentos en los que se requiere la colocalización celular o subcelular o para estudios de la función celular que necesiten una resolución especial.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
ColorVerde
Método de detecciónFluorescente
Tipo de coloranteGFP (EmGFP)
EmisiónVisible
Intervalo de longitud de onda de excitación488⁄510
Para utilizar con (equipo)Microscopio confocal, microscopio de fluorescencia
FormularioLíquido
Línea de productosCellLight
Cantidad1 vial
Condiciones de envíoHielo húmedo
TécnicaIntensidad de fluorescencia
Tipo de etiquetaProteína fluorescente
Tipo de productoGolgi
SubCellular LocalizationGolgi
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Almacenar de 2 °C a 6 °C, protegido de la luz. No congelar.

Preguntas frecuentes

How can I increase the transduction efficiency with the BacMam 2.0 reagents such as the the CellLight and Premo products?

Try varying particle-to-cell ratio (PPC), incubation volume, temperature and, cell density (if adherent cells are transduced). For adherent cells, we recommend a confluence of about 70%. Following the PPC, adjusting the volume is the next best parameter to change to optimize protein expression. If that doesn't work, you can also use the BacMam Enhancer Kit (Cat. No. B10107).

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Is there any way to preserve the CellLights labeling beyond 5 days?

Cells transduced with the CellLights reagents can be stored frozen for several months after transduction, without loss of expression.

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Are the CellLights products toxic to cells?

If the viral particles are used at the level we recommend, they are very well tolerated by cells.

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For how long will the CellLights products label my cells?

The BacMam 2.0 CellLights typically express for 5 days after transduction.

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What cell types can the CellLights products be used with?

The first generation BacMam reagents were shown to efficiently transduce over 90 cell types, including stable cell lines and primary cells. With BacMam 2.0, it is now possible to also efficiently transduce primary neurons and stem cells.

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Citations & References (24)

Citations & References
Abstract
Substrate stiffness regulates cadherin-dependent collective migration through myosin-II contractility.
Authors:Ng MR, Besser A, Danuser G, Brugge JS,
Journal:J Cell Biol
PubMed ID:23091067
'The mechanical microenvironment is known to influence single-cell migration; however, the extent to which mechanical cues affect collective migration of adherent cells is not well understood. We measured the effects of varying substrate compliance on individual cell migratory properties in an epithelial wound-healing assay. Increasing substrate stiffness increased collective cell ... More
Dynamic colocalization microscopy to characterize intracellular trafficking of nanomedicines.
Authors:Vercauteren D, Deschout H, Remaut K, Engbersen JF, Jones AT, Demeester J, De Smedt SC, Braeckmans K,
Journal:ACS Nano
PubMed ID:21923168
'To gain a better understanding of intracellular processing of nanomedicines, we employed quantitative live-cell fluorescence colocalization microscopy to study endosomal trafficking of polyplexes in retinal pigment epithelium cells. A new, dynamic colocalization algorithm was developed, based on particle tracking and trajectory correlation, allowing for spatiotemporal characterization of internalized polyplexes in ... More
Intracellular trafficking mechanism, from intracellular uptake to extracellular efflux, for phospholipid/cholesterol liposomes.
Authors:Un K, Sakai-Kato K, Oshima Y, Kawanishi T, Okuda H,
Journal:Biomaterials
PubMed ID:22858002
'Liposomes are widely used as drug delivery vehicles to transfer chemotherapeutic agents, proteins, and nucleic acids into target cells. To improve therapeutic effects and reduce unexpected toxic side-effects, it is necessary to understand the mechanism of liposomal uptake into cells, and the intracellular fate of internalized liposomes. The intracellular fate ... More
Glycophthalocyanines as photosensitizers for triggering mitotic catastrophe and apoptosis in cancer cells.
Authors:Soares AR, Neves MG, Tomé AC, Iglesias-de la Cruz MC, Zamarrón A, Carrasco E, González S, Cavaleiro JA, Torres T, Guldi DM, Juarranz A,
Journal:Chem Res Toxicol
PubMed ID:22394248
'Photodynamic therapy (PDT) is a treatment modality for different forms of cancer based on the combination of light, molecular oxygen, and a photosensitizer (PS) compound. When activated by light, the PS generates reactive oxygen species leading to tumor destruction. Phthalocyanines are compounds that have already shown to be efficient PSs ... More
A Review of Reagents for Fluorescence Microscopy of Cellular Compartments and Structures, Part III: Reagents for Actin, Tubulin, Cellular Membranes, and Whole Cell and Cytoplasm.
Authors:Kilgore JA, Dolman NJ, Davidson MW,
Journal:
PubMed ID:24510770
'Non-antibody commercial fluorescent reagents for imaging of cytoskeletal structures have been limited primarily to tubulin and actin, with the main factor in choice based mainly on whether cells are live or fixed and permeabilized. A wider range of options exist for cell membrane dyes, and the choice of reagent primarily ... More