CellLight™ Lysosomes-GFP, BacMam 2.0
CellLight™ Lysosomes-GFP, BacMam 2.0
Invitrogen™

CellLight™ Lysosomes-GFP, BacMam 2.0

CellLight™ Lysosomes-GFP, BacMam 2.0, proporciona un método sencillo de etiquetar lisosomas con proteína verde fluorescente (GFP) en células vivas. SolamenteMás información
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Número de catálogoCantidad
C105961 vial
Número de catálogo C10596
Precio (MXN)
-
Cantidad:
1 vial
CellLight™ Lysosomes-GFP, BacMam 2.0, proporciona un método sencillo de etiquetar lisosomas con proteína verde fluorescente (GFP) en células vivas. Solamente tiene que añadir reactivo a las células y dejarlas incubar toda la noche; por la mañana, las células estarán listas.

¿Desea etiquetar otras estructuras celulares? Obtenga más información sobre las herramientas de etiquetado de proteínas fluorescentes CellLight™

Esta construcción lista para su uso se transfecta en las células donde expresa la GFP fusionada a Lamp1 (proteína 1 de membrana asociada al lisosoma) mediante tecnología BacMam 2.0. Puede observar el comportamiento de lisosomas-GFP en células vivas independientemente del pH de organelos y etiquetarlos con varios colorantes de seguimiento o rastreo para obtener imágenes de procesos celulares dinámicos.

Las células que expresan construcciones CellLight™ también se pueden fijar con formaldehído para la adquisición de imágenes multiplex mediante técnicas inmunocitoquímicas.

La tecnología CellLight™ es:
Rápida y cómoda: solamente tiene que añadir reactivo CellLight™ a las células, dejarlas incubar durante la noche y realizar la adquisición de imágenes, o bien almacenar las células congeladas listas para ensayos para utilizarlas posteriormente
Muy eficaz: hasta un 90 % de transducción de una amplia variedad de líneas celulares de mamíferos, incluidas las células primarias, las células madre y las neuronas.
Flexible: cotransduzca más de un reactivo BacMam para experimentos multiplex o estudios de colocalización; controle de cerca los niveles de expresión mediante simples variaciones de la dosis.
Menos tóxica: Los reactivos CellLight™ no se replican en células de mamíferos y son adecuados para la manipulación de nivel de bioseguridad (BSL) 1

Tecnología BacMam
CellLight™ Lysosomes-GFP, BacMam 2.0 es una construcción fusionada de Lamp1 (proteína 1 de membrana asociada al lisosoma) y emGFP que se dirige de forma precisa y específica al lisosoma celular-GFP. Esta construcción fusionada está envasada en el baculovirus del virus de insecto, que no se replica en las células humanas y está designado como seguro para su uso en la mayoría de laboratorios con nivel de bioseguridad (BSL) 1. La tecnología BacMam garantiza que la mayoría de los tipos de células de mamíferos se transduzcan o transfecten con alta eficacia y una toxicidad mínima. Esta transfección transitoria se puede detectar tras una incubación nocturna durante hasta cinco días, tiempo suficiente para llevar a cabo la mayoría de análisis celulares dinámicos. Como cualquier otra técnica de transfección o transducción, el método BacMam no transfecta o transduce todas las células con la misma eficacia, lo que hace que no sea adecuado para estudios de población celular o procesos de recuento o adquisición de imágenes automatizados. Los reactivos CellLight™ son perfectos para experimentos en los que se requiere la colocalización celular o subcelular o para estudios de la función celular que necesiten una resolución especial.

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

Especificaciones
ColorVerde
Método de detecciónFluorescente
Tipo de coloranteGFP (EmGFP)
EmisiónVisible
Intervalo de longitud de onda de excitación488⁄510
Para utilizar con (equipo)Microscopio confocal, microscopio de fluorescencia
FormularioLíquido
Línea de productosCellLight
Cantidad1 vial
Condiciones de envíoHielo húmedo
TécnicaIntensidad de fluorescencia
Tipo de etiquetaProteína fluorescente
Tipo de productoSonda lisosomal
SubCellular LocalizationLisosomas
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Almacenar de 2 °C a 6 °C, protegido de la luz. No congelar.

Preguntas frecuentes

How can I increase the transduction efficiency with the BacMam 2.0 reagents such as the the CellLight and Premo products?

Try varying particle-to-cell ratio (PPC), incubation volume, temperature and, cell density (if adherent cells are transduced). For adherent cells, we recommend a confluence of about 70%. Following the PPC, adjusting the volume is the next best parameter to change to optimize protein expression. If that doesn't work, you can also use the BacMam Enhancer Kit (Cat. No. B10107).

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Is there any way to preserve the CellLights labeling beyond 5 days?

Cells transduced with the CellLights reagents can be stored frozen for several months after transduction, without loss of expression.

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Are the CellLights products toxic to cells?

If the viral particles are used at the level we recommend, they are very well tolerated by cells.

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For how long will the CellLights products label my cells?

The BacMam 2.0 CellLights typically express for 5 days after transduction.

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What cell types can the CellLights products be used with?

The first generation BacMam reagents were shown to efficiently transduce over 90 cell types, including stable cell lines and primary cells. With BacMam 2.0, it is now possible to also efficiently transduce primary neurons and stem cells.

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Citations & References (26)

Citations & References
Abstract
Dynamic colocalization microscopy to characterize intracellular trafficking of nanomedicines.
Authors:Vercauteren D, Deschout H, Remaut K, Engbersen JF, Jones AT, Demeester J, De Smedt SC, Braeckmans K,
Journal:ACS Nano
PubMed ID:21923168
'To gain a better understanding of intracellular processing of nanomedicines, we employed quantitative live-cell fluorescence colocalization microscopy to study endosomal trafficking of polyplexes in retinal pigment epithelium cells. A new, dynamic colocalization algorithm was developed, based on particle tracking and trajectory correlation, allowing for spatiotemporal characterization of internalized polyplexes in ... More
The possible
Authors:Benjaminsen RV, Mattebjerg MA, Henriksen JR, Moghimi SM, Andresen TL,
Journal:Mol Ther
PubMed ID:23032976
Polycations such as polyethylenimine (PEI) are used in many novel nonviral vector designs and there are continuous efforts to increase our mechanistic understanding of their interactions with cells. Even so, the mechanism of polyplex escape from the endosomal/lysosomal pathway after internalization is still elusive. The  ... More
Inhibitors of intravesicular acidification protect against Shiga toxin in a pH-independent manner.
Authors:Dyve Lingelem AB, Bergan J, Sandvig K,
Journal:Traffic
PubMed ID:22132807
Shiga toxin inhibits protein synthesis after being transported from the cell surface to endosomes and retrogradely through the Golgi apparatus to the endoplasmic reticulum (ER) and into the cytosol. In this study, we have abolished proton gradients across internal membranes in different ways and investigated the effect on the various ... More
Effective endogenous gene silencing mediated by pH responsive peptides proceeds via multiple pathways.
Authors:Lam JK, Liang W, Lan Y, Chaudhuri P, Chow MY, Witt K, Kudsiova L, Mason AJ,
Journal:J Control Release
PubMed ID:22138072
Cationic amphipathic histidine rich peptides possess high plasmid DNA and siRNA delivery capabilities. To further understand the pH responsive siRNA delivery process and evaluate the capabilities of such peptides we have investigated their ability to mediate specific silencing of endogenous GAPDH gene activity in MCF-7 and A549 cells and compared ... More
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Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
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Mitochondrial dysfunctions cause numerous human disorders. A platform technology based on biodegradable polymers for carrying bioactive molecules to the mitochondrial matrix could be of enormous potential benefit in treating mitochondrial diseases. Here we report a rationally designed mitochondria-targeted polymeric nanoparticle (NP) system and its optimization for efficient delivery of various ... More