CellLight™ Lysosomes-RFP, BacMam 2.0
CellLight™ Lysosomes-RFP, BacMam 2.0
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CellLight™ Lysosomes-RFP, BacMam 2.0

CellLight™ Lysosomes-RFP, BacMam 2.0, proporciona un método sencillo de etiquetar lisosomas con proteína rojo fluorescente (RFP) en células vivas. SolamenteMás información
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Número de catálogoCantidadColor
C105971 vialRojo-naranja, naranja
Número de catálogo C10597
Precio (MXN)
-
Cantidad:
1 vial
Color:
Rojo-naranja, naranja
CellLight™ Lysosomes-RFP, BacMam 2.0, proporciona un método sencillo de etiquetar lisosomas con proteína rojo fluorescente (RFP) en células vivas. Solamente tiene que añadir reactivo a las células y dejarlas incubar toda la noche; por la mañana, las células estarán listas.

¿Desea etiquetar otras estructuras celulares? Obtenga más información sobre las herramientas de etiquetado de proteínas fluorescentes CellLight™

Esta construcción lista para su uso se transfecta en las células donde expresa la RFP fusionada a Lamp1 (proteína 1 de membrana asociada al lisosoma) mediante tecnología BacMam 2.0. Puede observar el comportamiento de lisosomas-RFP en células vivas independientemente del pH de organelos y etiquetarlos con varios colorantes de seguimiento o rastreo para obtener imágenes de procesos celulares dinámicos.

Las células que expresan construcciones CellLight™ también se pueden fijar con formaldehído para la adquisición de imágenes multiplex mediante técnicas inmunocitoquímicas.

La tecnología CellLight™ es:
Rápida y cómoda: solamente tiene que añadir reactivo CellLight™ a las células, dejarlas incubar durante la noche y realizar la adquisición de imágenes, o bien almacenar las células congeladas listas para ensayos para utilizarlas posteriormente
Muy eficaz: hasta un 90 % de transducción de una amplia variedad de líneas celulares de mamíferos, incluidas las células primarias, las células madre y las neuronas.
Flexible: cotransduzca más de un reactivo BacMam para experimentos multiplex o estudios de colocalización; controle de cerca los niveles de expresión mediante simples variaciones de la dosis.
Menos tóxica: Los reactivos CellLight™ no se replican en células de mamíferos y son adecuados para la manipulación de nivel de bioseguridad (BSL) 1

Tecnología BacMam
CellLight™ Lysosomes-RFP, BacMam 2.0 es una construcción fusionada de Lamp1 (proteína 1 de membrana asociada al lisosoma) y TagRFP que se dirige de forma precisa y específica al lisosoma celular-RFP. Esta construcción fusionada está envasada en el baculovirus del virus de insecto, que no se replica en las células humanas y está designado como seguro para su uso en la mayoría de laboratorios con nivel de bioseguridad (BSL) 1. La tecnología BacMam garantiza que la mayoría de los tipos de células de mamíferos se transduzcan o transfecten con alta eficacia y una toxicidad mínima. Esta transfección transitoria se puede detectar tras una incubación nocturna durante hasta cinco días, tiempo suficiente para llevar a cabo la mayoría de análisis celulares dinámicos. Como cualquier otra técnica de transfección o transducción, el método BacMam no transfecta o transduce todas las células con la misma eficacia, lo que hace que no sea adecuado para estudios de población celular o procesos de recuento o adquisición de imágenes automatizados. Los reactivos CellLight™ son perfectos para experimentos en los que se requiere la colocalización celular o subcelular o para estudios de la función celular que necesiten una resolución especial.

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

Especificaciones
ColorRojo-naranja, naranja
Método de detecciónFluorescente
Tipo de coloranteRFP (TagRFP)
EmisiónVisible
Intervalo de longitud de onda de excitación555⁄584
Para utilizar con (equipo)Microscopio confocal, microscopio de fluorescencia
FormularioLíquido
Línea de productosCellLight
Cantidad1 vial
Condiciones de envíoHielo húmedo
TécnicaIntensidad de fluorescencia
Tipo de etiquetaProteína fluorescente
Tipo de productoSonda lisosomal
SubCellular LocalizationLisosomas
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Almacenar de 2 °C a 6 °C, protegido de la luz. No congelar.

Preguntas frecuentes

How can I increase the transduction efficiency with the BacMam 2.0 reagents such as the the CellLight and Premo products?

Try varying particle-to-cell ratio (PPC), incubation volume, temperature and, cell density (if adherent cells are transduced). For adherent cells, we recommend a confluence of about 70%. Following the PPC, adjusting the volume is the next best parameter to change to optimize protein expression. If that doesn't work, you can also use the BacMam Enhancer Kit (Cat. No. B10107).

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Is there any way to preserve the CellLights labeling beyond 5 days?

Cells transduced with the CellLights reagents can be stored frozen for several months after transduction, without loss of expression.

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Are the CellLights products toxic to cells?

If the viral particles are used at the level we recommend, they are very well tolerated by cells.

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For how long will the CellLights products label my cells?

The BacMam 2.0 CellLights typically express for 5 days after transduction.

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What cell types can the CellLights products be used with?

The first generation BacMam reagents were shown to efficiently transduce over 90 cell types, including stable cell lines and primary cells. With BacMam 2.0, it is now possible to also efficiently transduce primary neurons and stem cells.

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Citations & References (22)

Citations & References
Abstract
Cell entry and trafficking of human adenovirus bound to blood factor X is determined by the fiber serotype and not hexon:heparan sulfate interaction.
Authors:Corjon S, Gonzalez G, Henning P, Grichine A, Lindholm L, Boulanger P, Fender P, Hong SS,
Journal:PLoS One
PubMed ID:21637339
'Human adenovirus serotype 5 (HAdV5)-based vectors administered intravenously accumulate in the liver as the result of their direct binding to blood coagulation factor X (FX) and subsequent interaction of the FX-HAdV5 complex with heparan sulfate proteoglycan (HSPG) at the surface of liver cells. Intriguingly, the serotype 35 fiber-pseudotyped vector HAdV5F35 ... More
Particles on the move: intracellular trafficking and asymmetric mitotic partitioning of nanoporous polymer particles.
Authors:Yan Y, Lai ZW, Goode RJ, Cui J, Bacic T, Kamphuis MM, Nice EC, Caruso F,
Journal:
PubMed ID:23713907
'Nanoporous polymer particles (NPPs) prepared by mesoporous silica templating show promise as a new class of versatile drug/gene delivery vehicles owning to their high payload capacity, functionality, and responsiveness. Understanding the cellular dynamics of such particles, including uptake, intracellular trafficking, and distribution, is an important requirement for their development as ... More
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Authors:Schwartz-Roberts JL, Shajahan AN, Cook KL, Wärri A, Abu-Asab M, Clarke R,
Journal:Mol Cancer Ther
PubMed ID:23395885
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The possible
Authors:Benjaminsen RV, Mattebjerg MA, Henriksen JR, Moghimi SM, Andresen TL,
Journal:Mol Ther
PubMed ID:23032976
Polycations such as polyethylenimine (PEI) are used in many novel nonviral vector designs and there are continuous efforts to increase our mechanistic understanding of their interactions with cells. Even so, the mechanism of polyplex escape from the endosomal/lysosomal pathway after internalization is still elusive. The  ... More
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Journal:Traffic
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