CellLight™ Nucleus-GFP, BacMam 2.0
CellLight™ Nucleus-GFP, BacMam 2.0
Invitrogen™

CellLight™ Nucleus-GFP, BacMam 2.0

CellLight™ Nucleus-GFP, BacMam 2.0, proporciona un método sencillo de etiquetar núcleos con proteína verde fluorescente (GFP) en células vivas. SolamenteMás información
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Número de catálogoCantidad
C106021 vial
Número de catálogo C10602
Precio (MXN)
-
Cantidad:
1 vial
CellLight™ Nucleus-GFP, BacMam 2.0, proporciona un método sencillo de etiquetar núcleos con proteína verde fluorescente (GFP) en células vivas. Solamente tiene que añadir reactivo a las células y dejarlas incubar toda la noche; por la mañana, las células estarán listas.

¿Desea etiquetar otras estructuras celulares? Obtenga más información sobre las herramientas de etiquetado de proteínas fluorescentes CellLight™

Esta construcción lista para su uso se transfecta en las células donde expresa la GFP fusionada a la secuencia de localización nuclear SV40, mediante tecnología BacMam 2.0. Puede observar el comportamiento de núcleo GFP en células vivas sin la toxicidad celular asociada a los intercaladores y etiquetar con múltiples colorantes de seguimiento o rastreo para obtener imágenes de procesos celulares dinámicos.

Las células que expresan construcciones CellLight™ también se pueden fijar con formaldehído para la adquisición de imágenes multiplex mediante técnicas inmunocitoquímicas.

La tecnología CellLight™ es:
Rápida y cómoda: solamente tiene que añadir reactivo CellLight™ a las células, dejarlas incubar durante la noche y realizar la adquisición de imágenes, o bien almacenar las células congeladas listas para ensayos para utilizarlas posteriormente
Muy eficaz: hasta un 90 % de transducción de una amplia variedad de líneas celulares de mamíferos, incluidas las células primarias, las células madre y las neuronas.
Flexible: cotransduzca más de un reactivo BacMam para experimentos multiplex o estudios de colocalización; controle de cerca los niveles de expresión mediante simples variaciones de la dosis.
Menos tóxica: Los reactivos CellLight™ no se replican en células de mamíferos y son adecuados para la manipulación de nivel de bioseguridad (BSL) 1

Tecnología BacMam
CellLight™ Nucleus-GFP, BacMam 2.0 es una construcción fusionada de la secuencia de localización nuclear SV40 y emGFP que se dirige de forma precisa y específica al núcleo celular-GFP. Esta construcción fusionada está envasada en el baculovirus del virus de insecto, que no se replica en las células humanas y está designado como seguro para su uso en la mayoría de laboratorios con nivel de bioseguridad (BSL) 1. La tecnología BacMam garantiza que la mayoría de los tipos de células de mamíferos se transduzcan o transfecten con alta eficacia y una toxicidad mínima. Esta transfección transitoria se puede detectar tras una incubación nocturna durante hasta cinco días, tiempo suficiente para llevar a cabo la mayoría de análisis celulares dinámicos. Como cualquier otra técnica de transfección o transducción, el método BacMam no transfecta o transduce todas las células con la misma eficacia, lo que hace que no sea adecuado para estudios de población celular o procesos de recuento o adquisición de imágenes automatizados. Los reactivos CellLight™ son perfectos para experimentos en los que se requiere la colocalización celular o subcelular o para estudios de la función celular que necesiten una resolución especial.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
ColorVerde
Método de detecciónFluorescente
Tipo de coloranteGFP (EmGFP)
EmisiónVisible
Intervalo de longitud de onda de excitación488⁄510
Para utilizar con (equipo)Microscopio confocal, microscopio de fluorescencia
FormularioLíquido
Línea de productosCellLight
Cantidad1 vial
Condiciones de envíoHielo húmedo
TécnicaIntensidad de fluorescencia
Tipo de etiquetaProteína fluorescente
Tipo de productoNucleus
SubCellular LocalizationNucleus
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Almacenar de 2 °C a 6 °C, protegido de la luz. No congelar.

Preguntas frecuentes

How can I increase the transduction efficiency with the BacMam 2.0 reagents such as the the CellLight and Premo products?

Try varying particle-to-cell ratio (PPC), incubation volume, temperature and, cell density (if adherent cells are transduced). For adherent cells, we recommend a confluence of about 70%. Following the PPC, adjusting the volume is the next best parameter to change to optimize protein expression. If that doesn't work, you can also use the BacMam Enhancer Kit (Cat. No. B10107).

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Is there any way to preserve the CellLights labeling beyond 5 days?

Cells transduced with the CellLights reagents can be stored frozen for several months after transduction, without loss of expression.

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Are the CellLights products toxic to cells?

If the viral particles are used at the level we recommend, they are very well tolerated by cells.

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For how long will the CellLights products label my cells?

The BacMam 2.0 CellLights typically express for 5 days after transduction.

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What cell types can the CellLights products be used with?

The first generation BacMam reagents were shown to efficiently transduce over 90 cell types, including stable cell lines and primary cells. With BacMam 2.0, it is now possible to also efficiently transduce primary neurons and stem cells.

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Citations & References (9)

Citations & References
Abstract
Fractional proliferation: a method to deconvolve cell population dynamics from single-cell data.
Authors:Tyson DR, Garbett SP, Frick PL, Quaranta V,
Journal:Nat Methods
PubMed ID:22886092
'We present an integrated method that uses extended time-lapse automated imaging to quantify the dynamics of cell proliferation. Cell counts are fit with a quiescence-growth model that estimates rates of cell division, entry into quiescence and death. The model is constrained with rates extracted experimentally from the behavior of tracked ... More
Analysis of nucleocytoplasmic transport using green fluorescent protein.
Authors:Stauber RH,
Journal:Methods Mol Biol
PubMed ID:12136753
A hallmark of eukaryotic cells is their spatial and functional separation into the nucleus and the cytoplasm by the nuclear envelope. Although this separation introduces a potent and sophisticated level of regulation, it also requires highly effective and selective transport machinery. ... More
Functional Screening Assays with Neurons Generated from Pluripotent Stem Cell-Derived Neural Stem Cells.
Authors:Efthymiou A, Shaltouki A, Steiner JP, Jha B, Heman-Ackah SM, Swistowski A, Zeng X, Rao MS, Malik N,
Journal:
PubMed ID:24019252
Rapid and effective drug discovery for neurodegenerative disease is currently impeded by an inability to source primary neural cells for high-throughput and phenotypic screens. This limitation can be addressed through the use of pluripotent stem cells (PSCs), which can be derived from patient-specific samples and differentiated to neural cells for ... More
Modulation of nucleocytoplasmic trafficking by retention in cytoplasm or nucleus.
Authors:Roth DM, Harper I, Pouton CW, Jans DA,
Journal:J Cell Biochem
PubMed ID:19507231
Nuclear protein transport processes have largely been studied using in vitro semi-intact cell systems where high concentrations of nuclear localizing substrates are used, and cytoplasmic components such as the microtubule (MT) network, are either absent or damaged. Here we use the fluorescence recovery after photobleaching (FRAP) technique to analyze the ... More
Assessment of GFP expression and viability using the tali image-based cytometer.
Authors:Remple K, Stone L,
Journal:J Vis Exp
PubMed ID:22127256
Single-cell and population information are commonly obtained either by flow cytometry or fluorescence microscopy. However, these two methods provide different information. Flow cytometry gives quantitative multi-parametric information about physical characteristics and staining or expression, but doesn't allow for visualization. Stand-alone fluorescence microscopy provides visual data, but doesn't allow for straightforward ... More