CellLight™ Peroxisome-GFP, BacMam 2.0
CellLight™ Peroxisome-GFP, BacMam 2.0
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CellLight™ Peroxisome-GFP, BacMam 2.0

CellLight™ Peroxisome-GFP, BacMam 2.0, proporciona un método sencillo de etiquetar peroxisomas con proteína verde fluorescente (GFP) en células vivas. SolamenteMás información
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Número de catálogoCantidad
C106041 vial
Número de catálogo C10604
Precio (MXN)
-
Cantidad:
1 vial
CellLight™ Peroxisome-GFP, BacMam 2.0, proporciona un método sencillo de etiquetar peroxisomas con proteína verde fluorescente (GFP) en células vivas. Solamente tiene que añadir reactivo a las células y dejarlas incubar toda la noche; por la mañana, las células estarán listas.

¿Desea etiquetar otras estructuras celulares? Obtenga más información sobre las herramientas de etiquetado de proteínas fluorescentes CellLight™

Esta construcción lista para su uso se transfecta en las células donde expresa la GFP fusionada a la secuencia de orientación del C-terminal peroxisomal, mediante tecnología BacMam 2.0. Puede observar el comportamiento de peroxisoma-GFP en células vivas y utilizar múltiples colorantes de seguimiento o rastreo para obtener imágenes de procesos celulares dinámicos.

Las células que expresan construcciones CellLight™ también se pueden fijar con formaldehído para la adquisición de imágenes multiplex mediante técnicas inmunocitoquímicas.

La tecnología CellLight™ es:
Rápida y cómoda: solamente tiene que añadir reactivo CellLight™ a las células, dejarlas incubar durante la noche y realizar la adquisición de imágenes, o bien almacenar las células congeladas listas para ensayos para utilizarlas posteriormente
Muy eficaz: hasta un 90 % de transducción de una amplia variedad de líneas celulares de mamíferos, incluidas las células primarias, las células madre y las neuronas.
Flexible: cotransduzca más de un reactivo BacMam para experimentos multiplex o estudios de colocalización; controle de cerca los niveles de expresión mediante simples variaciones de la dosis.
Menos tóxica: Los reactivos CellLight™ no se replican en células de mamíferos y son adecuados para la manipulación de nivel de bioseguridad (BSL) 1

Tecnología BacMam
CellLight™ Peroxisome-GFP, BacMam 2.0, es una construcción fusionada de la secuencia de orientación del C-terminal peroxisomal y emGFP que se dirige de forma precisa y específica al peroxisoma celular-GFP. Esta construcción fusionada está envasada en el baculovirus del virus de insecto, que no se replica en las células humanas y está designado como seguro para su uso en la mayoría de laboratorios con nivel de bioseguridad (BSL) 1. La tecnología BacMam garantiza que la mayoría de los tipos de células de mamíferos se transduzcan o transfecten con alta eficacia y una toxicidad mínima. Esta transfección transitoria se puede detectar tras una incubación nocturna durante hasta cinco días, tiempo suficiente para llevar a cabo la mayoría de análisis celulares dinámicos. Como cualquier otra técnica de transfección o transducción, el método BacMam no transfecta o transduce todas las células con la misma eficacia, lo que hace que no sea adecuado para estudios de población celular o procesos de recuento o adquisición de imágenes automatizados. Los reactivos CellLight™ son perfectos para experimentos en los que se requiere la colocalización celular o subcelular o para estudios de la función celular que necesiten una resolución especial.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
ColorVerde
Método de detecciónFluorescente
Tipo de coloranteGFP (EmGFP)
EmisiónVisible
Intervalo de longitud de onda de excitación488⁄510
Para utilizar con (equipo)Microscopio confocal, microscopio de fluorescencia
FormularioLíquido
Línea de productosCellLight
Cantidad1 vial
Condiciones de envíoHielo húmedo
TécnicaIntensidad de fluorescencia
Tipo de etiquetaProteína fluorescente
Tipo de productoPeroxisoma
SubCellular LocalizationPeroxisomas
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Almacenar de 2 °C a 6 °C, protegido de la luz. No congelar.

Preguntas frecuentes

How can I increase the transduction efficiency with the BacMam 2.0 reagents such as the the CellLight and Premo products?

Try varying particle-to-cell ratio (PPC), incubation volume, temperature and, cell density (if adherent cells are transduced). For adherent cells, we recommend a confluence of about 70%. Following the PPC, adjusting the volume is the next best parameter to change to optimize protein expression. If that doesn't work, you can also use the BacMam Enhancer Kit (Cat. No. B10107).

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Is there any way to preserve the CellLights labeling beyond 5 days?

Cells transduced with the CellLights reagents can be stored frozen for several months after transduction, without loss of expression.

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Are the CellLights products toxic to cells?

If the viral particles are used at the level we recommend, they are very well tolerated by cells.

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For how long will the CellLights products label my cells?

The BacMam 2.0 CellLights typically express for 5 days after transduction.

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What cell types can the CellLights products be used with?

The first generation BacMam reagents were shown to efficiently transduce over 90 cell types, including stable cell lines and primary cells. With BacMam 2.0, it is now possible to also efficiently transduce primary neurons and stem cells.

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Citations & References (17)

Citations & References
Abstract
Mutations in ABCD4 cause a new inborn error of vitamin B12 metabolism.
Authors:Coelho D, Kim JC, Miousse IR, Fung S, du Moulin M, Buers I, Suormala T, Burda P, Frapolli M, Stucki M, Nürnberg P, Thiele H, Robenek H, Höhne W, Longo N, Pasquali M, Mengel E, Watkins D, Shoubridge EA, Majewski J, Rosenblatt DS, Fowler B, Rutsch F, Baumgartner MR,
Journal:Nat Genet
PubMed ID:22922874
Inherited disorders of vitamin B12 (cobalamin) have provided important clues to how this vitamin, which is essential for hematological and neurological function, is transported and metabolized. We describe a new disease that results in failure to release vitamin B12 from lysosomes, which mimics the cblF defect caused by LMBRD1 mutations. ... More
An incremental approach to automated protein localisation.
Authors:Tscherepanow M, Jensen N, Kummert F,
Journal:BMC Bioinformatics
PubMed ID:18937856
'BACKGROUND: The subcellular localisation of proteins in intact living cells is an important means for gaining information about protein functions. Even dynamic processes can be captured, which can barely be predicted based on amino acid sequences. Besides increasing our knowledge about intracellular processes, this information facilitates the development of innovative ... More
Live cell imaging of G protein-coupled receptors.
Authors:Teichmann A, Schmidt A, Wiesner B, Oksche A, Schülein R,
Journal:Methods Mol Biol
PubMed ID:22674164
Live cell imaging experiments with G protein-coupled receptors (GPCRs) tagged with fluorescent fusion proteins were originally performed to study trafficking and subcellular location of these important drug targets. In the past decade, however, substantial progress came from improved imaging methods and from the cloning of novel fluorescent fusion proteins. Today, ... More
MAVS regulates apoptotic cell death by decreasing K48-linked ubiquitination of voltage-dependent anion channel 1.
Authors:Guan K, Zheng Z, Song T, He X, Xu C, Zhang Y, Ma S, Wang Y, Xu Q, Cao Y, Li J, Yang X, Ge X, Wei C, Zhong H,
Journal:
PubMed ID:23754752
The mitochondrial antiviral signaling protein MAVS (IPS-1, VISA, or Cardif) plays an important role in the host defense against viral infection by inducing type I interferon. Recent reports have shown that MAVS is also critical for virus-induced apoptosis. However, the mechanism of MAVS-mediated apoptosis induction remains unclear. Here, we show ... More
A patient-derived stem cell model of hereditary spastic paraplegia with SPAST mutations.
Authors:Abrahamsen G, Fan Y, Matigian N, Wali G, Bellette B, Sutharsan R, Raju J, Wood SA, Veivers D, Sue CM, Mackay-Sim A,
Journal:Dis Model Mech
PubMed ID:23264559
Hereditary spastic paraplegia (HSP) leads to progressive gait disturbances with lower limb muscle weakness and spasticity. Mutations in SPAST are a major cause of adult-onset, autosomal-dominant HSP. Spastin, the protein encoded by SPAST, is a microtubule-severing protein that is enriched in the distal axon of corticospinal motor neurons, which degenerate ... More