CellLight™ Talin-GFP, BacMam 2.0
CellLight™ Talin-GFP, BacMam 2.0
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CellLight™ Talin-GFP, BacMam 2.0

CellLight™ Talin-GFP, BacMam 2.0, proporciona un método sencillo de etiquetar talina con proteína verde fluorescente (GFP) en células vivas. SolamenteMás información
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CellLight™ Talin-GFP, BacMam 2.0, proporciona un método sencillo de etiquetar talina con proteína verde fluorescente (GFP) en células vivas. Solamente tiene que añadir reactivo a las células y dejarlas incubar toda la noche; por la mañana, las células estarán listas.

¿Desea etiquetar otras estructuras celulares? Obtenga más información acerca de las herramientas de etiquetado mediante proteína fluorescente CellLigh™

Esta construcción lista para su uso se transduce/transfecta en las células donde expresa la GFP fusionada al C-terminal de la talina humana, mediante tecnología BacMam 2.0. Puede observar el comportamiento de talina-GFP en células vivas para estudiar la adhesión focal de las integrinas y su interacción con los filamentos de actina con múltiples colorantes de seguimiento o rastreo para obtener imágenes de procesos celulares dinámicos.

Las células que expresan construcciones CellLight™ también se pueden fijar con formaldehído para la adquisición de imágenes multiplex mediante técnicas inmunocitoquímicas.

La tecnología CellLight™ es:
Rápida y cómoda: solamente tiene que añadir reactivo CellLight™ a las células, dejarlas incubar durante la noche y realizar la adquisición de imágenes, o bien almacenar las células congeladas listas para ensayos para utilizarlas posteriormente
Muy eficaz: hasta un 90 % de transducción de una amplia variedad de líneas celulares de mamíferos, incluidas las células primarias, las células madre y las neuronas.
Flexible: cotransduzca más de un reactivo BacMam para experimentos multiplex o estudios de colocalización; controle de cerca los niveles de expresión mediante simples variaciones de la dosis.
Menos tóxica: Los reactivos CellLight™ no se replican en células de mamíferos y son adecuados para la manipulación de nivel de bioseguridad (BSL) 1

Tecnología BacMam
CellLight™ Talin-GFP, BacMam 2.0, es una construcción fusionada del C-terminal de talina humana y emGFP que se dirige de forma precisa y específica a la talina celular-GFP. Esta construcción fusionada está envasada en el baculovirus del virus de insecto, que no se replica en las células humanas y está designado como seguro para su uso en la mayoría de laboratorios con nivel de bioseguridad (BSL) 1. La tecnología BacMam garantiza que la mayoría de los tipos de células de mamíferos se transduzcan o transfecten con alta eficacia y una toxicidad mínima. Esta transfección transitoria se puede detectar tras una incubación nocturna durante hasta cinco días, tiempo suficiente para llevar a cabo la mayoría de análisis celulares dinámicos. Como cualquier otra técnica de transfección o transducción, el método BacMam no transfecta o transduce todas las células con la misma eficacia, lo que hace que no sea adecuado para estudios de población celular o procesos de recuento o adquisición de imágenes automatizados. Los reactivos CellLight™ son perfectos para experimentos en los que se requiere la colocalización celular o subcelular o para estudios de la función celular que necesiten una resolución especial.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
ColorVerde
Método de detecciónFluorescente
Tipo de coloranteGFP (EmGFP)
EmisiónVisible
Intervalo de longitud de onda de excitación488⁄510
Para utilizar con (equipo)Microscopio confocal, microscopio de fluorescencia
FormularioLíquido
Línea de productosCellLight
Cantidad1 vial
Condiciones de envíoHielo húmedo
TécnicaIntensidad de fluorescencia
Tipo de etiquetaProteína fluorescente
Tipo de productoTalina
SubCellular LocalizationCitoesqueleto
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Almacenar de 2 °C a 6 °C, protegido de la luz. No congelar.

Preguntas frecuentes

How can I increase the transduction efficiency with the BacMam 2.0 reagents such as the the CellLight and Premo products?

Try varying particle-to-cell ratio (PPC), incubation volume, temperature and, cell density (if adherent cells are transduced). For adherent cells, we recommend a confluence of about 70%. Following the PPC, adjusting the volume is the next best parameter to change to optimize protein expression. If that doesn't work, you can also use the BacMam Enhancer Kit (Cat. No. B10107).

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Is there any way to preserve the CellLights labeling beyond 5 days?

Cells transduced with the CellLights reagents can be stored frozen for several months after transduction, without loss of expression.

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Are the CellLights products toxic to cells?

If the viral particles are used at the level we recommend, they are very well tolerated by cells.

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For how long will the CellLights products label my cells?

The BacMam 2.0 CellLights typically express for 5 days after transduction.

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What cell types can the CellLights products be used with?

The first generation BacMam reagents were shown to efficiently transduce over 90 cell types, including stable cell lines and primary cells. With BacMam 2.0, it is now possible to also efficiently transduce primary neurons and stem cells.

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Citations & References (6)

Citations & References
Abstract
Baculovirus-mediated gene transfer into mammalian cells.
Authors:Boyce FM, Bucher NL,
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:8637876
This paper describes the use of the baculovirus Autographa californica multiple nuclear polyhedrosis virus (AcMNPV) as a vector for gene delivery into mammalian cells. A modified AcMNPV virus was prepared that carried the Escherichia coli lacZ reporter gene under control of the Rous sarcoma virus promoter and mammalian RNA processing ... More
BacMam technology and its application to drug discovery.
Authors:Ames RS, Kost TA, Condreay JP,
Journal:Expert Opin Drug Discov
PubMed ID:23488908
The recombinant baculovirus/insect cell system was firmly established as a leading method for recombinant protein production when a new potential use for these viruses was revealed in 1995. It was reported that engineered recombinant baculoviruses could deliver functional expression cassettes to mammalian cell types; a system which has come to ... More
Transferrin-targeted porous silicon nanoparticles reduce glioblastoma cell migration across tight extracellular space.
Authors:
Journal:Sci Rep
PubMed ID:32047170
Stress fiber anisotropy contributes to force-mode dependent chromatin stretching and gene upregulation in living cells.
Authors:
Journal:Nat Commun
PubMed ID:32994402
Force-activatable coating enables high-resolution cellular force imaging directly on regular cell culture surfaces.
Authors:
Journal:Phys Biol
PubMed ID:29785968