Kit de proliferación de CellTrace™ Violet, para citometría de flujo
Kit de proliferación de CellTrace™ Violet, para citometría de flujo
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Kit de proliferación de CellTrace™ Violet, para citometría de flujo

El kit de proliferación de células CellTrace™ Violet se emplea para el marcaje de células in vitro e in vivoMás información
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C34557Un kit
C3457120 ensayos
Número de catálogo C34557
Precio (MXN)
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El kit de proliferación de células CellTrace™ Violet se emplea para el marcaje de células in vitro e in vivo con el fin de rastrear múltiples generaciones utilizando una dilución con colorantes a través de citometría de flujo.

• Rendimiento superior: la tinción brillante y de un solo pico permite la visualización de varias generaciones
• Estabilidad de la señal a largo plazo: estable en las células durante varios días después de la tinción
• Versátil: varios colores disponibles para combinar fácilmente con anticuerpos o marcadores de la función celular, como GFP
• Protocolo de tinción sencillo y sólido

Consulte la guía de selección para todos los kits de proliferación celular CellTrace™ para citometría de flujo.

Tinción fluorescente superior
Un análisis correcto de proliferación mediante dilución de tinte (consulte la figura siguiente) requiere un tinte muy brillante para distinguir las células etiquetadas con fluorescencia de las autofluorescencias después de varias divisiones celulares. La intensa tinción fluorescente proporcionada por el colorante CellTrace™ Violet permite visualizar diez o más generaciones de células proliferantes antes de que la señal se vea interrumpida por la auto-fluorescencia celular intrínseca. Los resultados de la tinción son homogéneos y consistentes con muy poca variación de fluorescencia entre las células de una población, por lo que se pueden ver distintas generaciones sin necesidad de un software de modelado complejo.

Retención de la señal a largo plazo
A diferencia de las tinciones que etiquetan la membrana lipídica de las células, la tinción de CellTrace™ Violet atraviesa fácilmente la membrana plasmática y se adhiere de manera covalente al interior de las células donde el colorante fluorescente estable proporciona una señal consistente, incluso después de varios días en un entorno de cultivo celular. La tinción CellTrace™ Violet se adhiere covalentemente a todas las aminas libres en la superficie y el interior de las células y muestra poca citotoxicidad, con un efecto mínimo observado en la capacidad proliferativa o biología de las células.

Fácil multiplexado con otros fluoróforos
La excitación en violeta y el estrecho rango de emisión del colorante CellTrace™ Violet lo hace ideal para multiplexar debido al solapamiento espectral limitado con otros tintes comunes (Alexa Fluor™ 488, FITC, Y RPE) y proteínas fluorescentes (proteína fluorescente verde (GFP) y mCherry) (consulte los espectros de fluorescencia para la tinción CellTrace™ Violet a continuación).

Protocolo de tinción sencillo y sólido
el kit de proliferación de células CellTrace™ Violet contiene viales prácticos de un solo uso de colorante seco que permiten realizar experimentos a pequeña escala sin necesidad preparar cantidades excesivas de colorante. Se prepara una solución madre mediante la disolución del contenido de un vial en dimetilsulfóxido (DMSO) anhidro antes del uso. Para teñir 1 ml de células en un medio sin proteínas, se suele emplear 1 µl de esta solución madre. Las células deben teñirse durante 20 minutos a temperatura ambiente mediante una agitación suave. A continuación, un breve lavado con un medio completo eliminará cualquier colorante que pudiera quedar en la solución.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Método de detecciónFluorescente
Tipo de coloranteOtras etiquetas o colorantes
FormularioLiofilizado
FormatoTubo(s)
CantidadUn kit
Condiciones de envíoTemperatura ambiente
SolubilidadDMSO (dimetilsulfóxido)
Emission405⁄450
Para utilizar con (aplicación)Ensayo de proliferación
Para utilizar con (equipo)Citómetro de flujo
Línea de productosCellTrace
Tipo de productoKit de proliferación celular
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Contiene 9 viales de CellTrace™ Violet (polvo liofilizado) y 1 vial de DMSO (500 μl). Almacenar en el congelador (de – 5 a – 30 °C) y proteger de la luz.

Preguntas frecuentes

I want a dye that can track cells similar to CFSE, but excited with 405 nm violet laser. What is available?

CellTrace Violet and CellTracker Violet BMQC work in the same way as CFSE, but are efficiently excited with the violet laser. They are comparable to CFSE in terms of cell retention, and has been used for tracking cells with microscopy as well as flow cytometry.

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I want to do a cell migration study for around 4 hours and need to fluorescently label the cells with a dye. What do you recommend?

Calcein, AM and FDA (fluorescein diaceate) are examples of some dyes used for this application. Since these dyes are not incorporated or covalently attached to any cellular components, they may have a short retention time as some cell types may actively efflux the dye out of the cells. The CellTracker and CellTrace dyes include either a mild thiol-reactive chloromethyl group or amine-reactive succinnimidyl ester group to allow for covalent binding to cellular components, providing for better retention. As with any reagent, one should empirically determine retention times for the cell type used.

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I labeled my cells with Calcein, AM, but when I imaged the next day, there was no fluorescence from Calcein. Why?

Calcein, AM is a good choice for cell tracking and as a general cytoplasmic stain. However, it doesn't bind to anything and may be actively pumped out of the cells within a couple hours, which is likely what happened. The retention of Calcein within live cells is dependent upon the inherent properties of the cell type and culture conditions.

For long-term imaging, you may wish to consider a reactive cytoplasmic stains such as CFDA, SE or the CellTracker and CellTrace dyes.

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How should I prepare the stock solution for CellTrace Violet Cell Proliferation Kit, for flow cytometry (Cat. No. C34557, C34571)?

To prepare a stock solution of CellTrace Violet Cell Proliferation Kit, for flow cytometry (Cat. No. C34557, C34571), dissolve the contents of one vial in 20 µL of anhydrous DMSO, just prior to use, to give a stock concentration of 5 mM. The recommended working concentration is 5 µM.

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I would like to label two cell populations with two different CellTrace reagents and then co-culture these cells. Will the CellTrace reagent leave the cells to stain other cells?

We have not tested the use of the CellTrace reagents for co-culture applications. In theory, this may work, but you would have to test this on your cells of interest.

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Citations & References (2)

Citations & References
Abstract
Appraising the suitability of succinimidyl and lipophilic fluorescent dyes to track proliferation in non-quiescent cells by dye dilution.
Authors:Filby A, Begum J, Jalal M, Day W,
Journal:
PubMed ID:25802116
Successful completion of the cell cycle usually results in two identical daughter progeny. This process of generational doubling is termed proliferation and when it occurs in a regulated fashion the benefits range from driving embryonic development to mounting a successful immune response. However when it occurs in a dis-regulated fashion, ... More
Isolation and Activation of Murine Lymphocytes.
Authors:Lim JF, Berger H, Su IH
Journal:J Vis Exp
PubMed ID:27842342
'B and T cells, with their extremely diverse antigen-receptor repertoires, have the ability to mount specific immune responses against almost any invading pathogen(1,2). Understandably, such intricate abilities are controlled by a large number of molecules involved in various cellular processes to ensure timely and spatially regulated immune responses(3). Here, we ... More