CellTrace™ Blue Cell Proliferation Kit, for flow cytometry

El kit de proliferación de células azul CellTrace se emplea para el etiquetado de células in vitro e in vivo con el fin de detectar varias generaciones mediante una dilución con tintes a través de citometría de flujo. El reactivo CellTrace Blue está diseñado específicamente para la excitación mediante un láser UV (a 355 nm o 375 nm), y se puede multiplexar fácilmente con reactivos y anticuerpos excitados por otros láseres de uso común.

• Rendimiento superior: la tinción brillante de rendimiento superior con un solo pico permite la visualización de múltiples generaciones
• Estabilidad de la señal a largo plazo: se conserva bien en las células durante varios días tras la tinción
• Versátil: varios colores disponibles para combinar fácilmente con anticuerpos o marcadores de la función celular, como el GFP
• Protocolo de tinción sencillo y sólido

Tinción fluorescente superior
Un análisis correcto de proliferación mediante dilución de tinte (consulte la siguiente figura) requiere un tinte muy brillante para distinguir las células etiquetadas con fluorescencia de las autofluorescencias después de varias divisiones celulares. La intensa tinción fluorescente proporcionada por el colorante CellTrace azul permite visualizar 5 o más generaciones de células proliferantes antes de que la señal se vea desbordada por la autofluorescencia celular intrínseca. Resultados de tinción homogéneos y consistentes con muy poca variación de fluorescencia entre las células de una población, por lo que se pueden ver distintas generaciones sin necesidad de un software de modelado complejo. La concentración de trabajo recomendada para las células mononucleares de sangre periférica es de 5 - 10 µm. Sin embargo, como con todos los reactivos utilizados en citometría de flujo, para obtener una señal óptima, se recomienda encarecidamente la valoración de reactivos.

Retención de la señal a largo plazo
A diferencia de los tintes que etiquetan la membrana lipídica de las células, la tinción de CellTrace azul atraviesa fácilmente la membrana plasmática y se adhiere de manera covalente al interior de las células donde el colorante fluorescente estable proporciona una señal consistente, incluso después de varios días en un entorno de cultivo celular. La tinción CellTrace azul se adhiere covalentemente a todas las aminas libres en la superficie y el interior de las células y muestra poca citotoxicidad, con un efecto mínimo observado en la capacidad proliferativa o biología de las células.

Multiplexado fácil con otros fluoróforos
La excitación UV y la emisión estrecha del colorante CellTrace azul lo hacen ideal para multiplexar ya que se encuentra fuera de los perfiles de emisión espectral de la mayoría de otros colorantes y proteínas fluorescentes.

Protocolo de tinción sencillo y sólido
El kit de proliferación de células CellTrace azul tiene viales prácticos de un solo uso de colorante seco que permiten realizar experimentos a pequeña escala sin necesidad preparar cantidades excesivas de colorante. Se prepara una solución madre mediante la disolución del contenido de un vial en dimetilsulfóxido (DMSO) anhidro antes del uso. Para teñir 1 ml de células en un medio sin proteínas, se suele emplear 1 µl de esta solución madre. Las células deben teñirse durante 20 minutos a temperatura ambiente mediante una agitación suave. A continuación, un breve lavado con un medio completo eliminará cualquier coorante que pudiera quedar en la solución.