Los colorantes ANEP son moléculas que fluorescen en respuesta a los cambios eléctricos potenciales en su entorno. Se trata de sondas de respuesta rápida que funcionan mediante cambios en su estructura electrónica y, en consecuencia, en sus propiedades de fluorescencia, en respuesta a cambios en el campo eléctrico circundante Su respuesta óptica es lo suficientemente rápida para detectar cambios potenciales transitorios (milisegundo) en células excitables, incluyendo neuronas individuales, células cardíacas y cerebros intactos. Sin embargo, la magnitud de su cambio de fluorescencia dependiente del potencial suele ser pequeña; las sondas de respuesta rápida suelen mostrar un 2-10 % de cambio de fluorescencia por 100 mV. Además, estos colorantes muestran un desplazamiento dependiente del potencial en sus espectros de excitación, permitiendo así la cuantificación del potencial de la membrana utilizando mediciones de la relación de excitación.

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Especificaciones del colorante ANEP potencialmente sensible:
• Molécula catiónica; presenta una internalización muy baja y una buena relación señal-ruido y es útil para visualizar dominios lipídicos enriquecidos con colesterol en membranas modelo
• Las Ex/Em máximas unidas a las membranas de fosfolípidos modelo son ∼465/635 nm (pero las propiedades espectrales dependen en gran medida del entorno)
• No fluorescente hasta que se une a las membranas
• Soluble en etanol, DMSO y DMF (di-2-ANEPEQ es un colorante ANEP soluble en agua)
• El colorante se introduce en las células mediante la adición directa de la solución madre al medio de cultivo celular, mediante el uso de Pluronic™ F-127 o mediante etiquetado retrógrado
• Sonda de respuesta rápida, adecuada para detectar posibles cambios en la membrana de menos de submilisegundos

Aplicaciones para sondas potenciométricas
La membrana plasmática de la célula normalmente tiene un potencial transmembrana de aproximadamente -70 mV (negativo en el interior) como consecuencia de los gradientes de concentración de K+, Na+ y Cl- que se mantienen mediante procesos de transporte activos. Las sondas potenciométricas ofrecen un método indirecto de detección de la translocación de estos iones.

Los aumentos y disminuciones en el potencial de la membrana, conocidos como hiperpolarización y despolarización de la membrana, respectivamente, desempeñan un papel central en muchos procesos fisiológicos, incluyendo la propagación del impulso nervioso, la contracción muscular, la señalización celular y la sincronización del canal de iones. Las sondas potenciométricas son herramientas importantes para el estudio de estos procesos.

Encuentre más colorantes ANEP
Ofrecemos colorantes ANEP en varias formas. Consulte la sección 22.2 Sondas de respuesta rápida del manual de Molecular Probes™ para obtener más información sobre estas sondas.

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso diagnóstico o terapéutico en humanos ni en animales.