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Citas y referencias (53)
Invitrogen™
EnzChek™ Caspase-3 Activity Assay Kits
Detecte apoptosis en extractos celulares y preparaciones enzimáticas purificadas con kits de ensayo de actividad de la caspasa-3 EnzChek con sustrato Z-DEVD-AMC o sustratos Z-DEVD-R110.
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| Número de catálogo | Etiqueta o tinte |
|---|---|
| E13183 | AMC (7-amino-4-metilcumarina) |
| E13184 | Rodamina 110 |
Número de catálogo E13183
Precio (MXN)
-
Etiqueta o tinte:
AMC (7-amino-4-metilcumarina)
Logre la detección sencilla y fiable de la apoptosis mediada por la actividad de la caspasa-3 con el kit de ensayo de actividad de la caspasa-3 EnzChek, que aprovecha los sustratos especialmente diseñados que se vuelven fluorescentes al momento de la escisión mediante la enzima caspasa-3. El kit de ensayo de actividad de la caspasa-3 EnzChek está disponible con el sustrato Z-DEVD-AMC o Z-DEVD-R110, que da un producto fluorescente brillante al momento de la escisión proteolítica por caspasa 3/7.
El kit de ensayo de actividad de caspasa-3 EnzChek permite la detección de apoptosis al proporcionar un método sencillo y fiable para analizar la actividad de la caspasa-3/7. El kit se puede utilizar para medir continuamente la actividad de la caspasa-3/7 en extractos celulares y preparaciones enzimáticas purificadas mediante un fluorímetro o un lector de microplacas de fluorescencia.
Las características clave del kit de ensayo de actividad de caspasa-3 EnzChek incluyen:
• Ensayo fluorescente con ajustes estándar de excitación/emisión de fluoresceína (FITC)
• Su formato permite la medición continua de la actividad de la caspasa-3/7 en extractos celulares
• Controles fluorescentes y enzimáticos incluidos
El sustrato derivado de la aminometilcumarina (AMC) (Z-ácido aspártico-ácido glutámico-ácido valina-aspártico (DEVD)-AMC) que se incluye en el kit de ensayo de actividad de la caspasa-3 EnzChek es poco fluorescente en el intervalo de UV (excitación/emisión máxima de ˜ 330/390 nm), pero produce un producto azul fluorescente brillante (excitación/emisión máxima de ˜ 342/441 nm) tras la escisión proteolítica. El kit se puede utilizar para medir continuamente la actividad de la caspasa-3 y las proteasas estrechamente relacionadas en extractos celulares y preparaciones enzimáticas purificadas mediante un fluorímetro o un lector de microplacas de fluorescencia.
El sustrato derivado de rodamina 110 (Z-DEVD-R110) utilizado en el kit de ensayo de actividad de la caspasa-3 EnzChek es un compuesto de bisamida no fluorescente que, tras la escisión enzimática, se convierte en un proceso de dos pasos en la monoamida fluorescente y, luego, en el producto R110 aún más fluorescente. Ambos productos de hidrólisis presentan propiedades espectrales similares a las de la fluoresceína, con longitudes de onda de excitación y emisión máximas de 496 nm y 520 nm, respectivamente.
Además de los sustratos, el kit de ensayo de actividad de la caspasa EnzChek contiene el inhibidor de aldehído reversible Ac-DEVD-CHO, así como una AMC o R110 estándar de referencia. El inhibidor Ac-DEVD-CHO confirma que las señales de fluorescencia tanto en las poblaciones celulares inducidas como en las de control se deben a la actividad de la proteasa caspasa-3/7. El estándar de referencia permite cuantificar la cantidad de AMC o R110 liberada en la reacción.
Las características clave del kit de ensayo de actividad de caspasa-3 EnzChek incluyen:
• Ensayo fluorescente con ajustes estándar de excitación/emisión de fluoresceína (FITC)
• Su formato permite la medición continua de la actividad de la caspasa-3/7 en extractos celulares
• Controles fluorescentes y enzimáticos incluidos
El sustrato derivado de la aminometilcumarina (AMC) (Z-ácido aspártico-ácido glutámico-ácido valina-aspártico (DEVD)-AMC) que se incluye en el kit de ensayo de actividad de la caspasa-3 EnzChek es poco fluorescente en el intervalo de UV (excitación/emisión máxima de ˜ 330/390 nm), pero produce un producto azul fluorescente brillante (excitación/emisión máxima de ˜ 342/441 nm) tras la escisión proteolítica. El kit se puede utilizar para medir continuamente la actividad de la caspasa-3 y las proteasas estrechamente relacionadas en extractos celulares y preparaciones enzimáticas purificadas mediante un fluorímetro o un lector de microplacas de fluorescencia.
El sustrato derivado de rodamina 110 (Z-DEVD-R110) utilizado en el kit de ensayo de actividad de la caspasa-3 EnzChek es un compuesto de bisamida no fluorescente que, tras la escisión enzimática, se convierte en un proceso de dos pasos en la monoamida fluorescente y, luego, en el producto R110 aún más fluorescente. Ambos productos de hidrólisis presentan propiedades espectrales similares a las de la fluoresceína, con longitudes de onda de excitación y emisión máximas de 496 nm y 520 nm, respectivamente.
Además de los sustratos, el kit de ensayo de actividad de la caspasa EnzChek contiene el inhibidor de aldehído reversible Ac-DEVD-CHO, así como una AMC o R110 estándar de referencia. El inhibidor Ac-DEVD-CHO confirma que las señales de fluorescencia tanto en las poblaciones celulares inducidas como en las de control se deben a la actividad de la proteasa caspasa-3/7. El estándar de referencia permite cuantificar la cantidad de AMC o R110 liberada en la reacción.
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
Especificaciones
DescripciónKit de ensayo de caspasa-3 EnzChek n.º 1, sustrato Z-DEVD-AMC
Excitación/emisión342/441 (sustrato escindido)
Para utilizar con (equipo)Fluorímetro, lector de microplacas
Tipo de etiquetaOtras etiquetas o colorantes
Etiqueta o tinteAMC (7-amino-4-metilcumarina)
N.º de reacciones500 ensayos (volumen de reacción de 100 µl por ensayo)
Línea de productosEnzChek
Tipo de productoKit de ensayo de caspasa
Cantidad500 Assays
Condiciones de envíoTemperatura ambiente
Requisitos de almacenamientoAlmacenar en el congelador (de – 5 a – 30 °C) y proteger de la luz.
Método de detecciónFluorescencia
FormatoCubetas, placa de 96 pocillos
Unit SizeEach
Preguntas frecuentes
I am planning to use the EnzChek Caspase-3 Assay Kit #1 with Z-DEVD-AMC substrate. What are the fluorescence excitation/emission maxima of the cleaved substrate?
Citations & References (53)
Citations & References
Abstract
Journal:
PubMed ID:9078237
Jun NH2-terminal kinase (JNK) prevents nuclear beta-catenin accumulation and regulates axis formation in Xenopus embryos.
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:17060633
'Jun NH(2)-terminal kinases (JNKs) regulate convergent extension movements in Xenopus embryos through the noncanonical Wnt/planar cell polarity pathway. In addition, there is a high level of maternal JNK activity spanning from oocyte maturation until the onset of gastrulation that has no defined functions. Here, we show that maternal JNK activation
VDAC-dependent permeabilization of the outer mitochondrial membrane by superoxide induces rapid and massive cytochrome c release.
Journal:J Cell Biol
PubMed ID:11739410
'Enhanced formation of reactive oxygen species (ROS), superoxide (O2*-), and hydrogen peroxide (H2O2) may result in either apoptosis or other forms of cell death. Here, we studied the mechanisms underlying activation of the apoptotic machinery by ROS. Exposure of permeabilized HepG2 cells to O2*- elicited rapid and massive cytochrome c
One-step cellular caspase-3/7 assay.
Journal:Biotechniques
PubMed ID:12765032
Protease involvement in fodrin cleavage and phosphatidylserine exposure in apoptosis.
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:8940103
'A detailed kinetic analysis of three extranuclear end points of apoptosis, phosphatidylserine exposure, alpha-fodrin degradation, and plasma membrane blebbing, was performed and compared with nuclear fragmentation and the activation of the interleukin-1beta-converting enzyme (ICE)-like proteases in Jurkat T lymphocytes stimulated by anti-Fas monoclonal antibody (anti-Fas mAb) and in monocytic U937