Las células competentes DH5α Thermo Scientific para la subclonación son células de E. coli químicamente competentes recomendadas para la subclonaciónMás información
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EC0111
4 × 500 μl
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Las células competentes DH5α Thermo Scientific para la subclonación son células de E. coli químicamente competentes recomendadas para la subclonación rutinaria en vectores plasmídicos. Las células Subcloning efficiency no son adecuadas para la generación de bibliotecas de ADNc. El marcador φ80dlacZΔM15 proporciona α-complementación del gen β-galactosidasa de pUC o vectores similares para permitir la detección de colonias azules/blancas en placas de agar bacterianas que contienen Bluo-Gal o X-Gal.
• Eficacia de la transformación: > 1 x 106 cfu/µg de ADN pUC19 • Adecuado para aplicaciones de clonación rutinarias • Envase práctico y económico • Contiene marcadores genéticos que permiten la detección de colonias azules/blancas
Aplicaciones Las células competentes DH5α para la subclonación son adecuadas para las aplicaciones de clonación de ADN estándar: • Clonación de ADN tras PCR o reacciones de digestión de restricción • Subclonación (transferencia de ADN de un vector primario a un vector de destino) • Aislamiento plasmídico
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Cepa bacteriana o de levaduraDH5α
Tramado azul/blancoSí
Tipo de célulaQuímicamente competente
Clonación de ADN metiladoNo
Contiene el episoma F'Carece de episoma F'
Eficacia1 x 10^6 cfu/µg
Para utilizar con (aplicación)Clonación
Compatibilidad de alto rendimientoNo compatible con alto rendimiento
Línea de productosThermo Scientific
Tipo de productoCélula competente
Propagación de vectores ccdBNo para propagación vectorial ccdB
Cantidad4 × 500 μl
Condiciones de envíoHielo seco
FormatoTubo
EspecieE. coli
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
• 4 x células competentes DH5α para subclonación (500 µl) • ADN pUC19 (50 µl) (100 pg/µl)
Almacenar a -80 °C.
Preguntas frecuentes
Can I store my competent E. coli in liquid nitrogen?
We do not recommend storing competent E. coli strains in liquid nitrogen as the extreme temperature can be harmful to the cells. Also, the plastic storage vials are not intended to withstand the extreme temperature and may crack or break.
How should I store my competent E. coli?
We recommend storing our competent E. coli strains at -80°C. Storage at warmer temperatures, even for a brief period of time, will significantly decrease transformation efficiency.
I'm getting overgrowth of colonies. Why?
Ensure that you are using the correct antibiotic at the appropriate concentration. Additionally, make sure the antibiotic is not expired. If colonies exhibit unexpected morphologies, contamination could be a factor. Check your S.O.C. medium and LB growth medium.
I'm only getting white colonies, but none of the clones have an insert. What can I do?
Here are a few suggestions:
- Small fragments/linkers are cloning in to your vector instead of your insert; to correct this, gel-purify the insert before ligation
- Ensure that the correct concentrations of X-gal and/or IPTG (if vector contains the lacIq marker) are used
- If spreading X-gal and/or IPTG on your plate, allow sufficient time for the reagents to diffuse into the plate
- Incubate your plate for a longer period to ensure full color development
I'm getting no colonies at all on my plates. Can you help?
We recommend trying the following:
- Carry out the puc19 transformation control; this gives you information about the performance of the cells.
- Check plates for expiration and correct media used (LB/agar).
- Confirm that the correct antibiotic and concentration was used.