ProcartaPlex™ Human Cell Death Panel, 4plex

El panel ProcartaPlex humano de muerte celular 4-Plex permite la investigación del cáncer mediante el análisis de cuatro objetivos proteicos implicados en la muerte celular usando la tecnología Luminex xMAP. Recientemente se han descrito muchos tipos diferentes de muerte celular regulada, además de la apoptosis y la necroptosis, a saber, la piroptosis, el partenatos, la autofagia, la ferroptosis, la netosis y la muerte celular inmunogénica, lo que subraya la importancia de la resistencia a la muerte celular como sello distintivo del cáncer.

Este panel contiene prominentes proteínas marcadoras implicadas en la muerte celular. Los patrones moleculares asociados al peligro (DAMP) se liberan ante el estrés celular (HSP70, HSP90) y desempeñan un papel importante en el desarrollo del cáncer, así como en la respuesta a la terapia anticancerígena y la muerte celular inmunogénica (HMGB1). Además, se incluye en el panel la DKK1, que es una proteína secretada que regula la supervivencia celular a través de la vía de señalización WNT.

El panel se suministra en un formato listo para usar con viales individuales de reactivos de captura y detección formulados a una concentración 1X, que requieren menos pipeteo y configuración experimental. No se puede combinar con otros paneles o ensayos simples. Los biomarcadores de este panel complementan los del panel ProcartaPlex de eliminación de células apoptóticas dirigido a las proteínas solubles en suero y plasma y el panel ProcartaPlex de apoptosis 6-Plex dirigido a las proteínas en lisados celulares.

Los paneles preconfigurados ProcartaPlex se han probado exhaustivamente para determinar la capacidad combinatoria, la interferencia y la reactividad cruzada de los analitos con el fin de proporcionar el mayor nivel de validación y precisión. Los paneles multiplex ProcartaPlex están disponibles en múltiples formatos en seis especies (humano, ratón, rata, primate no humano, porcino y canino) y se suministran con los reactivos necesarios para realizar el ensayo. Visite nuestra página de inmunoensayos ProcartaPlex para obtener más información y consultar los productos disponibles.

Lista de objetivos [región de gránulos]: Dkk-1 [27], HMGB1 (HMG-1) [51] HSP70 [29], HSP90 [56]

Acerca de los ensayos ProcartaPlex para la plataforma Luminex
Los inmunoensayos ProcartaPlex se basan en los principios de un ensayo ELISA tipo sándwich, utilizando dos anticuerpos altamente específicos que se vinculan a diferentes epítopos de una proteína para cuantificar todas las proteínas diana simultáneamente utilizando un instrumento Luminex. Para los ensayos ProcartaPlex multiplex se requieren tan solo 25 μl de plasma o suero y solo se necesitan cuatro horas para obtener los resultados analizados.

• Resultados reproducibles y fiables: validados como panel según el estándar más alto del sector que incluye pruebas de combinación de objetivos de proteínas y reactividad cruzada
• Más resultados por muestra: mida múltiples objetivos de proteínas simultáneamente en una única muestra de 25–50 μl
• Tecnología Luminex bien establecida: la plataforma de multiplexing más referenciada para la detección y cuantificación de proteínas

Los ensayos de ProcartaPlex utilizan la tecnología Luminex xMAP (perfil multianalito) para la detección y cuantificación simultáneas de hasta 80 objetivos proteicos en una sola muestra de 25–50 μl a partir de plasma, suero, sobrenadantes de cultivo celular y otros fluidos corporales.

Las microesferas superparamagnéticas Luminex MagPlex del ensayo de ProcartaPlex se tiñen internamente con proporciones precisas de fluoróforos rojos e infrarrojos para crear 100 firmas espectralmente únicas que pueden ser identificadas por los sistemas de detec¬ción Luminex xMAP (sistemas Luminex 200, FLEXMAP 3D y MAGPIX). El ensayo ProcartaPlex, similar a un ELISA tipo sándwich, utiliza pares de anticuerpos emparejados para identificar la proteína de interés. En un ensayo multiplex, cada gránulo espectralmente único se etiqueta con anticuerpos específicos para una sola proteína diana, y las proteínas vinculadas se identifican con anticuerpos biotinilados y estreptavidina–R-ficoeritrina (RPE). La conjugación de anticuerpos específicos de proteínas en un gránulo distinto permite el análisis de varios elementos diana en un solo pocillo.

La diferencia más significativa entre un ensayo ProcartaPlex y uno de tipo ELISA es que el anticuerpo de captura del ensayo ProcartaPlex se conjuga con un gránulo magnético y no se absorbe en el pocillo de la microplaca, por lo que los reactivos del ensayo ProcartaPlex flotan en la solución. Para la detección, el instrumento Luminex 200, por ejemplo, contiene dos láseres, uno para distinguir la firma espectral de cada partícula y el segundo para cuantificar la cantidad de fluorescencia RPE, que es proporcional a la cantidad de proteína presente en la muestra. Los ensayos multiplex ProcartaPlex pueden determinar el perfil de más proteínas diana con mucha menos muestra en el mismo tiempo que se tarda en realizar un ELISA tipo sándwich tradicional.

Los paneles multiplex ProcartaPlex están disponibles en múltiples formatos en seis especies (humano, ratón, rata, primate no humano, porcino y canino). Visite thermofisher.com/procartaplex para obtener más información y consultar los productos disponibles.