5'			Cm5	N	N	G	N9	↓		3'
3'			G	N	N	C	N13	↑		5'

SgeI fragmenta objetivos de ADN que contienen 5-metilcitosina en una o ambas cadenas de ADN

La enzima de restricción SgeI Thermo Scientific reconoce los sitios m5CNNG(9/13)^ y corta mejor a 37 °C en su propio tampón exclusivo. Consulte Reaction Conditions for Restriction Enzymes (Condiciones de reacción para enzimas de restricción) para ver una tabla de actividad enzimática, condiciones para digestiones dobles e inactivación por calor para esta y otras enzimas de restricción.

Las endonucleasas de restricción convencionales Thermo Scientific representan una gran colección de enzimas de restricción de alta calidad, optimizadas para funcionar en uno de los tampones del sistema de cinco tampones. Además, se proporciona el tampón universal Tango para mayor comodidad en digestiones dobles. Todas las enzimas muestran una actividad del 100 % en las condiciones de reacción y tampón recomendadas. Para garantizar uniformidad en el rendimiento, los tampones de enzimas de restricción Thermo Scientific contienen BSA previamente mezclada, lo que mejora la estabilidad de numerosas enzimas y fija sustancias contaminantes que pueden estar presentes en preparaciones de ADN.

Características

• Calidad superior: control de calidad riguroso y proceso de fabricación líder en el sector
• Cómodo sistema de cinco tampones codificados por colores
• Incluye tampón Tango universal para digestiones dobles
• BSA premezclada en tampones de reacción
• Amplia selección de especificidades de endonucleasas de restricción

Aplicaciones

• Clonación molecular
• Mapas de sitios de restricción
• Genotipificación
• Southern blotting
• Polimorfismo en la longitud de fragmentos de restricción (RFLP)
• SNP

Nota: El ADN metilado por las Dcm o CpG metiltransferasas será un sustrato para SgeI. Una sobredigestión con más de 3 veces la cantidad recomendada de SgeI puede provocar una fragmentación incompleta. Se necesitan al menos dos copias de la secuencia de reconocimiento de SgeI para que la fragmentación sea eficaz. La cantidad necesaria de la enzima para digerir completamente el ADN metilado depende del número de puntos de reconocimiento de SgeI. Los productos de fragmentación del ADN generados por la fragmentación del punto diana facilitan la fragmentación no específica mediante SgeI. Por tanto, se recomienda optimizar la cantidad de la enzima para la fragmentación del ADN. El ADN pBR322 aislado de la cepa E.coli dcm+ (SD0041) puede utilizarse para controlar la eficacia de la fragmentación del ADN. SgeI fragmenta seis dianas metiladas por dcm en el ADN pBR322. Para conocer la sensibilidad de metilación, consulte las especificaciones del producto.