Kit de ensayo de calcio Fluo-4 NW

Los kits de ensayo de calcio Fluo-4 NW (sin lavado) ofrecen una formulación de ensayo de calcio patentada que no requiere pasos de lavado ni colorante desactivador. El ensayo Fluo-4 NW consigue un aumento de la intensidad de la fluorescencia en comparación con los ensayos estándar de Fluo-3 y Fluo-4 con un paso de lavado. Al eliminar el paso de lavado se obtiene una variabilidad más baja y valores de Z´ más altos que los del ensayo Fluo-4 estándar, al tiempo que se proporciona un ensayo más fácil y rápido.

El indicador Fluo-4NW es no fluorescente y estable en tampón de pH 7-7,5 durante varias horas, por lo que la conversión espontánea a la forma sensible a Ca²⁺ no es una fuente significativa de fluorescencia de fondo. Las contribuciones a la fluorescencia de línea de base por el medio de crecimiento (por ejemplo, la actividad de la esterasa, proteínas que interactúan con los receptores de interés o rojo fenol) se eliminan eliminando el medio antes de añadir el tinte indicador a los pocillos.

Otra fuente de fluorescencia potencial fuera de las células es la extrusión del indicador fuera de la célula mediante transportadores de aniones orgánicos. Probenecid se utiliza comúnmente para inhibir este transporte y reducir la señal de línea de base. Hemos sintetizado un probenecid soluble en agua patentado, que se suministra con los kits de ensayo de calcio Fluo-4 NW. Esta forma de probenecid tiene las ventajas de ser fácil de disolver en tampón y más seguro que el ácido libre, que requiere cáustica 1 M NaOH para disolverse. Los kits de ensayo de calcio Fluo-4 NW se han diseñado para microplacas y HTS, y el ensayo se puede realizar en células adherentes y no adherentes.

Fluo-4 AM es un indicador fluorescente Ca⁺² que se usa ampliamente para la medición en células de la señalización de calcio estimulada por agonistas e inhibida por antagonistas en aplicaciones de cribado analítico masivo (HTS). Su excitación de longitud de onda visible (compatible con fuentes láser de iones de argón), alta sensibilidad y gran aumento de la fluorescencia al unirse con Ca²⁺ lo ha convertido en el indicador preferido para caracterizar la farmacología y la función de los receptores acoplados a proteínas G (GPCR). Estas propiedades han hecho que Fluo-4 AM sea atractivo no solo para aplicaciones de detección de microplacas, sino también para la formicroscopia y la citometría de flujo.