ADN polimerasa de alta fidelidad Phusion™ y mezcla de dNTP (10 mm cada una)
ADN polimerasa de alta fidelidad Phusion™ y mezcla de dNTP (10 mm cada una)
Thermo Scientific™

ADN polimerasa de alta fidelidad Phusion™ y mezcla de dNTP (10 mm cada una)

Este paquete incluye ADN polimerasa de alta fidelidad Phusion (4 x 500 U) y mezcla de dNTP de alta calidadMás información
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Número de catálogoCantidad
F530N2000 reactions
Número de catálogo F530N
Precio (MXN)
-
Cantidad:
2000 reactions
Este paquete incluye ADN polimerasa de alta fidelidad Phusion (4 x 500 U) y mezcla de dNTP de alta calidad (10 mm cada uno, 2 x 1 ml).

ADN polimerasa de alta fidelidad Phusion
Las ADN polimerasas de alta fidelidad Thermo Scientific Phusion establecen un alto estándar para PCR de alto rendimiento. Con una tasa de errores 52 veces menor que la de Taq y 6 veces inferior a la de Pfu, la ADN polimerasa de alta fidelidad Phusion es una excelente opción para la clonación y otras aplicaciones que requieren alta fidelidad. Las ADN polimerasas Phusion ofrecen un rendimiento sólido con tiempos de protocolo cortos, incluso en presencia de inhibidores de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Además, generan una mayor producción con menos cantidad de enzimas que otras polimerasas de ADN.

• Alta fidelidad (52X Taq)
• PCR rápida gracias a los breves tiempos de extensión (de 15 a 30 s/kb)
• Sólido rendimiento, mínima optimización necesaria
• Gran producción de productos de PCR con cantidades de enzimas mínimas

Uso de ADN polimerasas Phusion
Las reglas de recocido para ADN polimerasas Phusion son diferentes de las de las ADN polimerasas comunes (como ADN polimerasas Taq). Para obtener unos resultados óptimos, utilice nuestra calculadora Tm en www.thermofisher.com/tmcalculator.

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La mezcla de dNTP Thermo Scientific contiene soluciones acuosas premezcladas de dATP, dCTP, dGTP y dTTP, cada una con una concentración final de 10 mm. Los nucleótidos tienen más del 99 % de pureza, no contienen actividades de nucleasa, ni ADN humano ni de E. coli. Las mezclas ofrecen la posibilidad de reducir el número de pasos de pipeteo y el riesgo de errores de preparación de reacción.

• Pureza superior al 99 % confirmada por HPLC
• Libre de ADN humano y de E. coli
• Estable después de varios ciclos de congelación y descongelación
• Hasta el 95 % de los dNTP permanecen en forma de trifosfato después de siete semanas a temperatura ambiente
• Hasta el 90 % de los dNTP permanecen en forma de trifosfato después de 30 ciclos de PCR (1 minuto a 94 °C; 3 minutos a 72 °C)

Para su uso en todas las aplicaciones de biología molecular, incluyendo PCR, PCR en tiempo real, PCR de alta fidelidad y larga, LAMP-PCR, síntesis de ADNc, RT-PCR, RDA, MDA, etiquetado de ADN y secuenciación de ADN.

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Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Fidelidad (frente a Taq)52 X
Inicio en calienteNo
N.º de reacciones2000 reacciones
SobranteRomo
PolimerasaADN polimerasa de alta fidelidad Phusion
Tipo de productoADN polimerasa de alta fidelidad
Cantidad2000 reactions
Formato de reacciónComponentes separados
Condiciones de envíoHielo seco
Tamaño (producto final)20 kb o menos
Concentración10 mm cada una
Método de detecciónSonda de cebado
Para utilizar con (aplicación)PCR estándar, Clonación
GC-Rich PCR PerformanceAlto
Método de PCRRT-qPCR de 1 paso
Velocidad de reacciónFast
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
• ADN polimerasa Phusion (2 U/µl)
• 5 tampones HF Phusion
• 5 tampones GC Phusion
• DMSO
• 50 mm de solución de MgCl2
• Mezcla de dNTP de 10 mm

Almacenar a una temperatura de –5 a –30 °C.

Preguntas frecuentes

What is enzyme concentration in Phusion Hot Start II High-Fidelity PCR Master Mix?

Phusion Hot Start II DNA polymerase concentration is optimized to give good results in most reactions. When the PCR reaction is set up according to the instructions, the final concentration of Phusion enzyme is 1 U in 50 µL reaction (0.4 U in 20 µL reaction).

Do Phusion DNA Polymerases add the non-template dependent 3'-A overhang?

Phusion DNA Polymerases generate blunt end products; therefore, blunt end cloning is recommended. If TA cloning is required, it can be performed by adding A overhangs to the blunt PCR product with e.g. Taq DNA Polymerase (Cat. No. EP0401). However, before adding the overhangs it is very important to remove all the Phusion DNA Polymerase by purifying the PCR product carefully, as the proofreading activity in Phusion DNA Polymerase is very strong. Any remaining Phusion DNA Polymerase will degrade the A overhangs, thus creating blunt ends again.

Can Phusion DNA Polymerases extend at 1 second/kb?

Yes it is possible, especially when amplifying smaller amplicons. Processivity of Phusion DNA Polymerases is 10 times that of Pfu. We recommend extension times of 15 s/kb for Phusion Flash PCR Master Mix. 15 s/kb is a conservative value that we can promise to work with almost any amplicon. In many cases, significantly shorter extension times (0-5 s/kb) can be used without compromising the yield. What separates Phusion Flash DNA Polymerase from other fast polymerases is that all steps in the PCR protocol can be shortened, including annealing and denaturation. This results in extremely fast protocols as compared with any other polymerase.

Can protocols optimized for Phusion DNA Polymerase be directly applied to Phusion Hot Start II DNA Polymerase?

Yes, protocols optimized for Phusion DNA Polymerase can be applied to Phusion Hot Start II DNA Polymerase reactions.

Do Phire and Phusion Hot Start II DNA Polymerases need a separate activation step in the PCR protocol?

No separate activation step is required since Phire and Phusion Hot Start II DNA Polymerases are inactivated by a reversibly bound, specific Affibody ligand that dissociates during initial denaturation.