Kit de síntesis de ADNc de primera cadena Maxima para RT-qPCR

Thermo Scientific™

Kit de síntesis de ADNc de primera cadena Maxima para RT-qPCR

Name: Kit de síntesis de ADNc de primera cadena Maxima para RT-qPCR
SKU: K1642

El kit de síntesis de ADNc de primera cadena Thermo Scientific Maxima para RT-qPCR es un práctico sistema optimizado paraMás información

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Número de catálogo	Incluye	N.º de reacciones
K1642	Kit only	200 reacciones
K1641	Kit only	50 reacciones
K1671	Kit with dsDNase	50 reacciones
K1672	Kit with dsDNase	200 reacciones

4 opciones

Número de catálogo K1642

Precio (MXN)

Incluye:

Kit only

N.º de reacciones:

200 reacciones

Pedido a granel o personalizado

El kit de síntesis de ADNc de primera cadena Thermo Scientific Maxima para RT-qPCR es un práctico sistema optimizado para la síntesis de ADNc en aplicaciones de RT-PCR cuantitativo (RT-qPCR) de dos pasos. El kit utiliza la transcriptasa inversa Maxima, una enzima avanzada que se obtiene mediante la evolución in vitro de la transcriptasa inversa M-MuLV. La enzima ofrece una termoestabilidad elevada, resistencia y una mejor tasa de síntesis de ADNc en comparación con la transcriptasa inversa M-MuLV natural.

El kit de síntesis de ADNc de primera cadena Maxima para RT-qPCR es capaz de realizar la síntesis reproducible de ADNc a partir de una amplia variedad de cantidades de ARN total (de 1 pg a 5 μg) a temperaturas elevadas (de 42 a 65 °C).La reacción de síntesis se puede completar en un periodo de 15 a 30 minutos. Los componentes del kit de síntesis de ADNc de primera cadena Maxima para RT-qPCR vienen premezclados para ahorrar tiempo y reducir la posibilidad de errores de pipeteo.

Características destacadas

• Alta producción de ADNc de longitud completa (hasta 20 kb).
• Síntesis eficaz de ADNc en un amplio intervalo de temperatura, de 42 °C a 65 °C.
• Mayor velocidad de síntesis: complete la síntesis de ADNc en un periodo de 15 a 30 minutos.
• Alta sensibilidad y especificidad

Aplicaciones

• RT-PCR de dos pasos
• RT-qPCR de dos pasos

El kit de síntesis de ADNc de primera cadena Maxima para RT-qPCR contiene
• Mezcla de enzimas maxima
• Mezcla de la reacción 5X
• Agua libre de nucleasas

Información adicional acerca de los componentes de reacción
La mezcla de enzimas Maxima contiene la transcriptasa inversa Maxima y el inhibidor de la ARNasa Thermo Scientific RiboLock. El inhibidor recombinante de la ARNasa RiboLock protege de forma eficaz las plantillas de ARN de la degradación producida por las ARNasas A, B y C a temperaturas de hasta 55 °C.

La mezcla de la reacción 5X contiene el resto de los componentes de reacción: tampón de reacción, desoxinucleótidos (dNTP), oligo(dT)₁₈ y random hexamer primers.

El agua libre de nucleasas se suministra para preparar la reacción y diluir el ARN de las muestras. La ausencia de endo y exodeoxiribonucleasas, ribonucleasas y fosfatasas se ha confirmado mediante las pruebas de calidad adecuadas.

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Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

Especificaciones

Tipo de producto finalPrimera cadena de ADNc

FormatoKit

IncluyeKit only

N.º de reacciones200 reacciones

Temperatura óptima de reacciónDe 50 °C a 55 °C

CantidadEach

Formato de reacciónComponentes separados

Tipo de reactivoTranscripción reversa

Transcriptasa inversaMaxima

Actividad de la ribonucleasa HSí

Condiciones de envíoDry Ice

Tamaño (producto final)Hasta 20 kb

Material de partidaARN

TécnicaTranscripción reversa

Para utilizar con (aplicación)Real Time PCR (qPCR)

GC-Rich PCR PerformanceHigh

Velocidad de reacción30 min

Unit SizeEach

Contenido y almacenamiento

El kit de síntesis de ADNc de primera cadena Maxima para RT-qPCR contiene:
• Mezcla de enzimas Maxima (transcriptasa inversa Maxima y el inhibidor de ARNasa RiboLock)
• Mezcla de reacción 5X (tampón de reacción, dNTPs, oligo(dT)₁₈ y cebadores hexaméricos aleatorios)
• Agua libre de nucleasas

Almacénese a -20 °C.

Preguntas frecuentes

When should I choose regular RevertAid RT or Maxima RT vs. RevertAid H-minus RT or Maxima H-minus RT?

It is generally beneficial to minimize RNase H activity when aiming to produce long transcripts for cDNA cloning. RNase H degrades RNA from RNA-DNA duplexes, which can result in truncated cDNA during reverse transcription of long mRNA. We also recommended using RNase H-minus RTs for template-independent addition of C nucleotides.

Do Thermo Scientific reverse transcriptases (RevertAid RT, RevertAid H-minus RT, Maxima RT, and Maxima H-minus RT) possess terminal deoxynucleotidyl (TdT) activity?

All Thermo Scientific reverse transcriptases possess intrinsic TdT activity although at varying degrees depending upon the reaction conditions. For addition of template-independent C nucleotides (as for SMART and RACE experiments), this specific TdT activity can be induced by Mn2+. We would recommend Maxima H- or RevertAid H- minus RTs for this purpose.

Is it preferable to use elevated temperature in the RT reaction when using Maxima reverse transcriptases?

cDNA synthesis at higher temperatures ensures successful transcription of RNA with high levels of secondary structure, reducing issues of primer access to template. Therefore, we do recommend to use RT enzymes with high thermostability, e.g. Maxima and Maxima H Minus Reverse Transcriptases, which provide higher yields of full-length cDNA, better sensitivity, and successful transcription of GC-rich templates.

What steps should I take while performing first strand cDNA synthesis using low purity template (e.g., inhibitors in RNA sample)?

Trace amounts of reagents used in RNA purification protocols may remain in solution and inhibit first-strand synthesis, e.g., SDS, EDTA, guanidine salts, phosphate, pyrophosphate, polyamines, spermidine. To remove trace contaminants, we recommend re-precipitating the RNA with ethanol and washing the pellet with 75% ethanol, or re-purifying the RNA.

For reverse transcription, how important is the quality of RNA template?

RNA purity and integrity are essential for synthesis and quantification of cDNA. Always assess the integrity of RNA prior to cDNA synthesis. Use freshly prepared RNA. Multiple freeze/thaw cycles of the RNA sample and synthesized cDNA is not recommended. Avoid RNase contamination and discard low quality RNA.

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