Thermo Scientific™

Kit de transcripción inversa RT RevertAid

El kit de transcriptasa inversa (RT) Thermo Scientific RevertAid es un sistema completo para una síntesis eficaz de ADN complementarioMás información

Número de catálogo	Cantidad
K1691	500 reacciones

Número de catálogo K1691

Precio (MXN)

Cantidad:

500 reacciones

Pedido a granel o personalizado

El kit de transcriptasa inversa (RT) Thermo Scientific RevertAid es un sistema completo para una síntesis eficaz de ADN complementario de primera cadena a partir de moldes de ARN total o ARN mensajero. El kit emplea RT RevertAid, que tiene una menor actividad de ARNasa H en comparación con la transcriptasa inversa AMV. La enzima mantiene la actividad a 42-50 °C y es adecuada para la síntesis de ADN complementario de hasta 13 kb. El inhibidor de ARNasa recombinante Thermo Scientific RiboLock, suministrado con el kit, protege eficazmente al ARN de la degradación a temperaturas de hasta 55 °C. El ADN complementario de primera cadena sintetizado con este sistema se puede usar directamente como un molde en la PCR o en la PCR en tiempo real. También es ideal como primer paso para la síntesis de ADN complementario de segunda cadena o la amplificación de ARN lineal. Se pueden incorporar nucleótidos etiquetados de forma radioactiva y no radioactiva a este ADN de primera cadena para emplearlos como una sonda en experimentos de hibridación, incluidas las micromatrices.

Aspectos destacados

• Primera cadena de ADNc completa de hasta 13 kb
• Temperatura de reacción óptima de 42 °C
• Kit completo: se incluyen todos los componentes de la reacción RT

Aplicaciones

• Síntesis de la primera cadena de ADNc para RT-PCR y RT-qPCR
• Construcción de bibliotecas de ADNc de longitud completa
• Síntesis de ARN antidetección

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

Especificaciones

Tipo de producto finalPrimera cadena de ADNc

FormatoKit

N.º de reacciones500 reacciones

Temperatura óptima de reacción42 °C

Cantidad500 reacciones

Formato de reacciónComponentes separados

Tipo de reactivoTranscripción reversa

Transcriptasa inversaRevertAid

Actividad de la ribonucleasa HSí

Condiciones de envíoDry Ice

Tamaño (producto final)Hasta 13 kb

Material de partidaARN

TécnicaTranscripción reversa

Para utilizar con (aplicación)Real Time PCR (qPCR)

Velocidad de reacción60 min

Unit SizeEach

Contenido y almacenamiento

El kit de RT RevertAid contiene lo siguiente:

Almacenar a – 20 °C.

Preguntas frecuentes

What steps should I take while performing first strand cDNA synthesis using low purity template (e.g., inhibitors in RNA sample)?

Trace amounts of reagents used in RNA purification protocols may remain in solution and inhibit first-strand synthesis, e.g., SDS, EDTA, guanidine salts, phosphate, pyrophosphate, polyamines, spermidine. To remove trace contaminants, we recommend re-precipitating the RNA with ethanol and washing the pellet with 75% ethanol, or re-purifying the RNA.

For reverse transcription, how important is the quality of RNA template?

RNA purity and integrity are essential for synthesis and quantification of cDNA. Always assess the integrity of RNA prior to cDNA synthesis. Use freshly prepared RNA. Multiple freeze/thaw cycles of the RNA sample and synthesized cDNA is not recommended. Avoid RNase contamination and discard low quality RNA.

When should I choose regular RevertAid RT or Maxima RT vs. RevertAid H Minus RT or Maxima H Minus RT?

It is generally beneficial to minimize RNase H activity when aiming to produce long transcripts for cDNA cloning. RNase H degrades RNA from RNA-DNA duplexes, which can result in truncated cDNA during reverse transcription of long mRNA. We also recommended using RNase H Minus RTs for template-independent addition of C nucleotides. In contrast, reverse transcriptases with intrinsic RNase H activity are often favored in 1-step RT-qPCR applications.

Do Thermo Scientific reverse transcriptases (RevertAid RT, RevertAid H Minus RT, Maxima RT, and Maxima H Minus RT) possess terminal deoxynucleotidyl (TdT) activity?

All Thermo Scientific reverse transcriptases (RevertAid RT, RevertAid H Minus RT, Maxima RT, and Maxima H Minus RT) possess intrinsic TdT activity, although at varying degrees depending upon the reaction conditions. We recommend specialized SuperScript IV Template Switching RT Master Mix for high efficiency in applications requiring template switching RT.