TA Cloning™ Kit, with pCR™2.1 Vector and One Shot™ TOP10F' Chemically Competent E. coli
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TA Cloning™ Kit, with pCR™2.1 Vector and One Shot™ TOP10F' Chemically Competent E. coli

El kit TA Cloning™ con vector pCR™2.1 proporciona una estrategia de clonación rápida y de un paso para insertar directamenteMás información
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Número de catálogoN.º de reacciones
K20304040 reacciones
K20300120 reacciones
Número de catálogo K203040
Precio (MXN)
-
N.º de reacciones:
40 reacciones
El kit TA Cloning™ con vector pCR™2.1 proporciona una estrategia de clonación rápida y de un paso para insertar directamente un producto de PCR amplificada con Taq en un vector plasmídico. El kit TA Cloning™ usa el vector de clonación pCR™2.1 y ligasa de ADN T4 ExpressLink™ para generar un producto de ligadura en un paso de ligadura de quince minutos a temperatura ambiente. Las reacciones suelen producir > 80 % de recombinantes que contienen insertos.

Características del kit TA Cloning™ con vector 2.1 pCR™:
Rápido y cómodo: ligación de 15 minutos a temperatura ambiente
Eficaz: detección azul/blanco y > 80 % de los clones con inserto adecuado
Flexible: elección de resistencia a kanamicina o ampicilina para la selección flexible de antibióticos
Sin complicaciones: elimina cualquier modificación enzimática del producto de PCR
Optimizado: no requiere el uso de primers de PCR que contengan sitios de restricción

El vector pCR™2.1 proporciona:
• Salientes 3'-T para la ligación directa de productos de PCR amplificados con Taq
• Promotor T7 para transcripción y secuenciación de ARN in vitro
• Un poliligador versátil con sitios EcoR I flanqueados para facilitar la escisión de insertos
• Sitios de primer directo e inverso M13 para secuenciación

Cómo funciona TA Cloning™
La polimerasa Taq tiene una actividad independiente de plantilla que añade una sola desoxiadenosina (A) a los extremos 3' de los productos PCR. El vector linealizado suministrado en este kit tiene residuos de una sola desoxiadenosina 3' (T). Esto permite a los insertos de PCR ligar eficazmente con el vector.

Configuraciones del kit
El kit TA Cloning™ se ofrece en una variedad de configuraciones: sin células competentes (K2020-20 y K2020-40), con E. coli competente químicamente One Shot™ INVF' (K2000-01 y K2000-40), con E. coli competente químicamente One Shot™ TOP10F' (K2030-01 y K2030-40) y con E. coli competente químicamente One Shot™ TOP10 (K2040-01 y K2040-40) en tamaños de kit de 20 y 40 reacciones.

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

Especificaciones
Cepa bacteriana o de levaduraTOP10F ́
Tipo de célulaE. coli químicamente competente
Método de clonaciónTA Cloning
Para utilizar con (aplicación)Clonación PCR
N.º de reacciones40 reacciones
Línea de productosOne Shot
Tipo de productoKit de clonación
PromotorT7
Cantidad40 reactions
VectorpCR2.1
FormatoKit
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Los kits TA Cloning™ contienen el vector pCR™2.1 linealizado, la ligasa de ADN T4 ExpressLink™, el tampón de ligación de ADN T4 5X ExpressLink™, dNTPs, el tampón de PCR 10X, agua esterilizada y controles. Los kits de células competentes contienen E. coli químicamente competente One Shot™, medio SOC y un plásmido de control superenrollado.

Almacene el E. coli de One Shot™ a - 80 °C. Almacene todos los demás componentes a - 20 °C. Se garantiza la estabilidad de todos los reactivos durante 6 meses si se almacenan correctamente.

Preguntas frecuentes

Can I use TOP10F' competent cells for transformation of my TOPO vector that contains the ccdB gene?

Strains that contain an F plasmid, such as TOP10F', are not recommended for transformation and selection of recombinant clones in any TOPO vector containing the ccdB gene. While the F plasmid does encode the CcdA protein, which acts as an inhibitor of the CcdB gyrase-toxin protein, the half-life of the CcdA protein is shorter than that of the CcdB protein. Overexpression of the CcdB protein causes cell death when its action is not prevented by sufficient CcdA.

Citations & References (3)

Citations & References
Abstract
Isolation, cloning, and localization of rat PV-1, a novel endothelial caveolar protein.
Authors:Stan RV, Ghitescu L, Jacobson BS, Palade GE
Journal:J Cell Biol
PubMed ID:10366592
'By using an immunoisolation procedure (Stan, R.-V., W.G. Roberts, K. Ihida, D. Predescu, L. Saucan, L. Ghitescu, and G.E. Palade. 1997. Mol. Biol. Cell. 8:595-605) developed in our laboratory, we have isolated a caveolar subfraction from rat lung endothelium and we have partially characterized the proteins of this subfraction which ... More
Identification and functional analysis of the rat caspase-3 gene promoter.
Authors: Liu Wenfang; Wang Geping; Yakovlev Alexander G;
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:11773055
Caspase-3 is the major effector in apoptosis triggered by various stimuli. Previous studies demonstrated a significant increase in transcriptional activity of the caspase-3 gene during neuronal apoptosis. Recent findings suggest that differential expression of the caspase-3 gene may underlie the regulation of apoptotic susceptibility during brain development and after acute ... More
Immunogene therapy of tumors with vaccine based on Xenopus homologous vascular endothelial growth factor as a model antigen.
Authors: Wei Y Q; Huang M J; Yang L; Zhao X; Tian L; Lu Y; Shu J M; Lu C J; Niu T; Kang B; Mao Y Q; Liu F; Wen Y J; Lei S; Luo F; Zhou L Q; Peng F; Jiang Y; Liu J Y; Zhou H; Wang Q R; He Q M; Xiao F; Lou Y Y; Xie X J; Li Q; Wu Y; Ding Z Y; Hu B; Hu M; Zhang W;
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:11553767
Overcoming immune tolerance of the growth factors associated with tumor growth should be a useful approach to cancer therapy by active immunity. We used vascular endothelial growth factor (VEGF) as a model antigen to explore the feasibility of the immunogene tumor therapy with a vaccine based on a single xenogeneic ... More