El kit de mesopreparación para la filtración de plásmidos PureLink™ HiPure está diseñado para aislar el ADN plasmídico más puro de volúmenes de 25 a 100 ml de bacterias cultivadas durante una noche. Los kits de filtración de plásmidos PureLink™ HiPure incluyen columnas de filtración HiPure, que combinan la filtración para clarificación del lisado bacteriano con la purificación de resina de intercambio de aniones de ADN plásmido en una sola unidad. El ADN plasmídico resultante es de una calidad equivalente a la que se obtiene mediante la purificación con dos pases a través de gradientes de cloruro de cesio, el método de purificación de ADN. Purifique ADN de alta calidad en menos de dos horas para transfecciones y otras aplicaciones sin necesidad de pasos adicionales para extraer contaminantes como ARN, proteínas o endotoxinas. Además, la eliminación de fenol, cloroformo, bromuro de etidio y cloruro de cesio del protocolo minimiza la exposición a materiales peligrosos y su eliminación. Los kits de filtración de plásmidos PureLink™ HiPure proporcionan:

• Protocolos simples: aclarado de lisado bacteriano sin centrifugación
• Resultados rápidos: ahorre tiempo al purificar ADN plasmídico en menos de dos horas
• Gran producción: hasta 200 µg para mesopreparaciones y hasta 850 µg para maxipreparaciones (consulte la tabla)
• Rendimiento fiable: el ADN plasmídico de alta calidad purificado con estos kits es adecuado para una amplia variedad de aplicaciones

Funcionamiento
La adición de una columna de filtración HiPure a los kits de plásmidos PureLink™ HiPure proporciona un aclarado rápido del lisado bacteriano sin necesidad de centrifugación (consulte la figura). El cartucho de filtración de lisado se integra en la columna de unión de ADN para crear un paso combinado de clarificación de lisado y de unión de ADN plasmídico directamente a la resina de intercambio de aniones. Un único lavado de columna elimina las impurezas como ARN, proteínas, metabolitos y otras moléculas de bajo peso molecular; a continuación, el ADN plasmídico ultrapuro se eluye con un tampón de alto contenido de sal. A continuación, el ADN se desala y se concentra con un paso de precipitación de isopropanol para ser posteriormente recogido mediante centrifugación. Todo el protocolo se puede completar en unas dos horas.