pCR™8/GW/TOPO™ TA Cloning Kit with One Shot™ Mach1™-T1R E. coli
Product Image
Invitrogen™

pCR™8/GW/TOPO™ TA Cloning Kit with One Shot™ Mach1™-T1R E. coli

El kit pCR™8/GW/TOPO™ TA Cloning ofrece una clonación rápida, eficaz y fiable. Además, este vector es ideal para la clonaciónMás información
Have Questions?
Número de catálogoCantidad
K25202020 reacciones
Número de catálogo K252020
Precio (MXN)
-
Cantidad:
20 reacciones
El kit pCR™8/GW/TOPO™ TA Cloning ofrece una clonación rápida, eficaz y fiable. Además, este vector es ideal para la clonación de recombinación Gateway™ en varios vectores de destino para una multitud de aplicaciones.

Este kit de clonación pCR™8 ofrece las siguientes características:
• Una clonación TOPO™ TA rápida de 5 minutos produce 95 % de recombinantes
• Salientes 3´-T para simplificar la clonación de productos de PCR amplificados con Taq
• Las células MachI de crecimiento rápido acortan el tiempo de clonación
• Compatible con la clonación de recombinación Gateway™, por lo que permite el acceso a una multitud de vectores de destino
• Sitios de primer de secuenciación situados cerca del sitio de inserción de clonación, para que pueda secuenciar más insertos y menos vector la primera vez
• Gen de resistencia a la espectinomicina para una selección sólida en E. coli
• Sitios EcoR I que flanquean el sitio de inserción del producto de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) para una sencilla escisión de insertos

Este kit incluye E. coli químicamente competente One Shot™ Mach1™-T1R.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Método de clonaciónTOPO™ con Gateway™
N.º de reacciones20 reactions
Línea de productosOne Shot
Tipo de productoKit de clonación de TA
Cantidad20 reacciones
VectorpCR
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
El kit pCR™8/GW/TOPO™ TA Cloning contiene el vector pCR™8/GW/TOPO™ listo para su uso y adaptado a TOPO™, dNTP, solución salina, agua estéril, cebadores de secuenciación de sentido directo e inverso Gateway, plantilla de control y cebadores de PCR, E. coli químicamente competente One Shot™ Mach1™-T1R, medio SOC. y un plásmido de control de pUC19. Almacenar la E. coli One Shot™ a -80 °C. Almacene todos los demás componentes a - 20 °C. Se garantiza la estabilidad de todos los reactivos durante 6 meses si se almacenan correctamente

Preguntas frecuentes

Can I store my competent E. coli in liquid nitrogen?

We do not recommend storing competent E. coli strains in liquid nitrogen as the extreme temperature can be harmful to the cells. Also, the plastic storage vials are not intended to withstand the extreme temperature and may crack or break.

How should I store my competent E. coli?

We recommend storing our competent E. coli strains at -80°C. Storage at warmer temperatures, even for a brief period of time, will significantly decrease transformation efficiency.

Your Gateway-adapted TOPO vectors are supplied with a control template and control primers. Can I obtain the sequence of the control template?

The sequence of the control template is proprietary.

What is the best ratio of insert:vector to use for cloning? Is there an equation to calculate this?

The optimal ratio is 1:1 insert to vector. Optimization can be done using a ratio of 0.5-2 molecules of insert for every molecule of the vector.

Equation:

length of insert (bp)/length of vector (bp) x ng of vector = ng of insert needed for 1:1 insert:vector ratio

Does Platinum Taq DNA Polymerase High Fidelity enzyme mix leave 3' A-overhangs on the PCR product for subsequent cloning into a TOPO TA or original TA vector?

Yes, the enzyme mix leaves 3' A-overhangs on a portion of the PCR products. However, the cloning efficiency is greatly decreased compared to that obtained with Taq polymerase alone. It is recommended to add 3' A-overhangs to the product for TA cloning.

View all pCR™8/GW/TOPO™ TA Cloning Kit with One Shot™ Mach1™-T1R E. coli FAQs