Kit de clonación de PCR Zero Blunt™, sin células competentes
Kit de clonación de PCR Zero Blunt™, sin células competentes
Invitrogen™

Kit de clonación de PCR Zero Blunt™, sin células competentes

El kit Zero Blunt™ PCR Cloning ofrece un método sencillo para la clonación de alta eficacia (> 80 %) deMás información
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K27504040 reacciones
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Número de catálogo K275040
Precio (MXN)
-
Cantidad:
40 reacciones
El kit Zero Blunt™ PCR Cloning ofrece un método sencillo para la clonación de alta eficacia (> 80 %) de productos de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) con extremo romo que se amplifica con ADN polimerasas de corrección termoestables. El kit de clonación Zero Blunt™ PCR Cloning usa el vector multifunción de clonación pCR™-Blunt y la ligasa de ADN T4 ExpressLink™ para generar un producto de ligadura en un paso de ligadura de quince minutos a temperatura ambiente.

Características del kit Zero Blunt™ Cloning™ con el vector pCR™-Blunt:
Rápida y práctica: ligadura a temperatura ambiente en 5 minutos
Eficaz: gen ccdB para unos resultados de selección positivos en > 80 % de clones con el inserto adecuado
Flexible: elección de resistencia a kanamicina o Zeocin™ para selección flexible de antibióticos

El vector pCR™-Blunt proporciona:
• Sitios EcoR I que flanquean el sitio de inserción del producto de la PCR para una sencilla escisión de insertos
• Sitio de primer o promotor T7 para la transcripción y secuenciación de ARN in vitro
• Sitios de primer directo e inverso M13 para secuenciación o detección de PCR

Funcionamiento de Zero Blunt™PCR Cloning
El kit Zero Blunt™ PCR Cloning se ha diseñado para clonar fragmentos de PCR con extremo romo (o cualquier fragmento de ADN con extremo romo) con un bajo fondo de no recombinantes. El vector pCR™-Blunt contiene el letal gen E. coliccdB fusionado al extremo C del fragmento LacZα (Bernard et al., 1994). La ligadura de un fragmento de PCR con extremo romo altera la expresión de la fusión del gen lacZα-ccdB, lo que solo permite el crecimiento de recombinantes positivos durante la transformación. Las células que contienen un vector no recombinante mueren durante la siembra en la mezcla de transformación.

Configuraciones del kit
El kit Zero Blunt™ PCR Cloning se ofrece con una serie de configuraciones: con E. coli químicamente competente One Shot™ TOPO10 (K2700-20 y K2700-40) y sin células competentes (K2750-20 y K2750-40) en tamaños de kit de 20 y 40 reacciones.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Cepa bacteriana o de levaduraNo incluida
Método de clonaciónBlunt PCR
Línea de productosTOPO, Zero Blunt
Tipo de productoKit de clonación de PCR
PromotorT7
Cantidad40 reacciones
VectorVectores de clonación de ADN romos
FormatoKit
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Los kits de clonación de PCR Zero Blunt™ contienen vector pCR™-Blunt linealizado, ligasa de ADN T4 ExpressLink™, tampón de ligasa de ADN T4 ExpressLink™ 5X, plantilla de control, dNTP, agua estéril y primers directos e inversos M13.

Almacene todos los componentes a - 20 °C. Se garantiza la estabilidad de todos los reactivos durante 6 meses si se almacenan correctamente.

Preguntas frecuentes

Which of the following products will usually give the best cloning efficiency in terms of positive clones and number of colonies: Zero Blunt PCR, Zero Blunt PCR-TOPO, or Zero Blunt PCR-TOPO for Sequencing?

Typically 200-300 colonies are obtained for the TOPO kits with 100% inserts (20/20). For the Zero Blunt kit that uses standard ligase, typically 600-1000 colonies are obtained with 95-100% inserts.

Is it possible to generate nested deletions using the TOPO Cloning Kit for Sequencing and the ZeroBlunt TOPO PCR Cloning Kits?

Yes. Both vectors (pCR4 and pCR-Blunt II) are designed to allow the creation of nested deletions for sequencing large inserts using the same sequencing primer. In addition, a comprehensive protocol is provided in the TOPO manual for these kits.