TOPO™ TA Cloning™ Kit, with One Shot™ MAX Efficiency™ DH5α-T1R E. coli
TOPO&trade; TA Cloning&trade; Kit, with One Shot&trade; MAX Efficiency&trade; DH5&alpha;-T1<sup>R</sup> <i>E. coli</i>
Citas y referencias (1)
Invitrogen™

TOPO™ TA Cloning™ Kit, with One Shot™ MAX Efficiency™ DH5α-T1R E. coli

Los kits TOPO™ TA Cloning™ se han diseñado para clonar productos de PCR directamente a partir de una reacción deMás información
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Número de catálogoCantidad
K45200125 reacciones
K45204050 reacciones
Número de catálogo K452001
Precio (MXN)
-
Cantidad:
25 reacciones
Los kits TOPO™ TA Cloning™ se han diseñado para clonar productos de PCR directamente a partir de una reacción de PCR en tan solo 5 minutos (1). Utilizan un vector pCR™-TOPO™ con topoisomerasa I unida covalentemente para la clonación rápida y la generación de recombinantes. Los vectores pCR™-TOPO™ incluyen:

• Salientes 3´-T para la ligadura directa de productos de PCR amplificados con Taq
• Selección de promotores de T7 (pCR™2.1-TOPO™) o T7 y SP6 (pCR™II-TOPO™) para la transcripción y secuenciación in vitro de ARN. Cada vector también contiene sitios de primers directos e inversos M13 para secuenciación.
• Sitios EcoR I que flanquean el sitio de inserción del producto de PCR para una sencilla escisión de insertos
• Diversas opciones de genes de resistencia a kanamicina y ampicilina en E. coli
• Fácil detección de colonias azules/blancas para la selección de recombinantes

Los kits TOPO™ TA Cloning™ están también disponibles en kits combinados junto con un kit de minipreparación de plásmidos PureLink™ Quick (50 preparaciones) para una purificación rápida de plásmidos de sus insertos clonados TOPO™ para los posteriores análisis.

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

Especificaciones
Cepa bacteriana o de levaduraDH5α
Método de clonaciónTOPO™-TA
Línea de productosOne Shot
Tipo de productoKit de clonación
PromotorT7, SP6
Cantidad25 reacciones
VectorVectores TOPO-TA Cloning
FormatoKit
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Caja 1:
• Vector pCR™2.1-TOPO™ activado con la topoisomerasa I
• Tampón de PCR
• Solución salina
• dNTP
• Plantilla de control
• Primers directos e inversos M13
• Primers de PCR de control
• Agua estéril

Almacenar entre -5 y -30 °C.
Todos los reactivos son estables durante 6 meses si se almacenan adecuadamente.

Caja 2:
• E. coli químicamente competente One Shot™ o Electrocomp™
• Medio S.O.C.
• Plásmido de control superhelicoidal pUC19

Almacenar a entre -68 y -85 °C.

Preguntas frecuentes

Can I store my competent E. coli in liquid nitrogen?

We do not recommend storing competent E. coli strains in liquid nitrogen as the extreme temperature can be harmful to the cells. Also, the plastic storage vials are not intended to withstand the extreme temperature and may crack or break.

How should I store my competent E. coli?

We recommend storing our competent E. coli strains at -80°C. Storage at warmer temperatures, even for a brief period of time, will significantly decrease transformation efficiency.

What is the difference between the pCR2.1-TOPO and pCR4-TOPO vectors?

The vector backbones for both of these vectors are very similar. The main difference is that the pCR4-TOPO vector has sequencing primer sites located as close as 33 base pairs from the PCR product insertion site. This minimizes the amount of vector DNA sequence that needs to be read before reaching the sequence of the insert, making the pCR4-TOPO vector very useful for sequencing applications.

What is the difference between the pCR2.1-TOPO and pCRII-TOPO vectors?

The vector backbones for both of these vectors are very similar. The main difference is that the pCRII-TOPO vector is a dual promoter vector, containing the SP6 and T7 promoters for in vitro transcription/sequencing, whereas the pCR2.1-TOPO vector contains only the T7 promoter for in vitro transcription/sequencing. Both vectors contain the M13 Forward and Reverse primer sites for sequencing or PCR screening.

Your TOPO cloning kits contain a control template and control primers. Can I obtain the sequence of the control template?

The sequence of the control template is proprietary.

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Citations & References (1)

Citations & References
Abstract
Allurin, a 21-kDa sperm chemoattractant from Xenopus egg jelly, is related to mammalian sperm-binding proteins.
Authors: Olson J H; Xiang X; Ziegert T; Kittelson A; Rawls A; Bieber A L; Chandler D E;
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:11562501
Previously, we demonstrated that a protein from Xenopus egg jelly exhibits sperm chemoattractant activity when assayed by either video microscopy or by sperm passage across a porous filter. Here we describe the isolation and purification of allurin, the protein responsible for this activity. Freshly oviposited jellied eggs were soaked in ... More