DES™-Inducible Kit with pCoBlast

El kit DES™-Inducible proporciona el vector de expresión pMT/V5-His y una selección de blasticidina (pCoBlast) o higromicina (pCoHygro). Este vectorMás información

Número de catálogo	Cantidad
K512001	1 kit

Número de catálogo K512001

Precio (MXN)

Cantidad:

1 kit

El kit DES™-Inducible proporciona el vector de expresión pMT/V5-His y una selección de blasticidina (pCoBlast) o higromicina (pCoHygro). Este vector utiliza el promotor del gen de metalotioneína de la Drosophila que se induce en las células S2 al añadir sulfato de cobre o cloruro de cadmio al medio de cultivo. El vector pMT/V5-His ofrece las siguientes características:

• Tamaño reducido (3,5 kb) para mejorar el rendimiento del ADN y aumentar la eficacia de la subclonación
• Etiqueta de epítopo C-terminal V5 para la rápida detección con un anticuerpo anti-V5 de Invitrogen
• Etiqueta C-terminal 6xHis para la purificación sencilla de proteínas de fusión recombinantes utilizando una resina quelante del níquel

Para facilitar la clonación, se proporciona un conjunto de tres vectores: A, B y C. Cada vector tiene múltiples sitios de clonación en un marco de lectura diferente relacionado con la secuencia de codificación de la etiqueta C-terminal.

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

Especificaciones

Tipo de productoKit inducible

Posición de la etiqueta de la proteína (a su gen)C-terminal

Cantidad1 kit

VectorpMT

Método de clonaciónGateway

Línea de productosDES

PromotorMT

Etiqueta de proteínaEtiqueta His (6x), Etiqueta de epítopo V5

Unit SizeEach

Contenido y almacenamiento

Cada kit inducible DES™ contiene 20μg cada uno de un vector de selección (pCoHygro o pCoBlast), pMT/V5-His A, B, C, y pMT/V5-His/lacZ, kit de transfección de fosfato cálcico, cebadores directos e inversos (2μg cada uno), células S2 congeladas, medio GIBCO™ Schneider's Drosophila y el agente de selección apropiado. Almacenar las células S2 en nitrógeno líquido. Conservar el medio y el agente de selección a +4°C. Conservar todos los demás reactivos a -20°C. Se garantiza la estabilidad de todos los componentes durante 6 meses si se almacenan correctamente.

Preguntas frecuentes

What is the doubling time of Drosophila S2 cells?

When grown at the optimal temperature of 27-28ºC, Drosophila S2 cells grow very quickly, with an approximate 14-16 hr doubling time. The cells can also be grown at 22-25ºC with doubling time of 24hrs. Humidity is an issue, so a shallow pan of water can be left in the incubator, but the incubator does not need to be turned on.

Growth medium is also a factor in doubling time - the doubling times listed here are for Sf900 II medium.

The cells can reach maximum densities of 1 to 2.5 x 10E7 cells/ml in shake flask cultures.

Citations & References (1)

Citations & References

Abstract

A novel allelic variant of the human TSG-6 gene encoding an amino acid difference in the CUB module. Chromosomal localization, frequency analysis, modeling, and expression.

Authors: Nentwich Hilke A; Mustafa Zehra; Rugg Marilyn S; Marsden Brian D; Cordell Martin R; Mahoney David J; Jenkins Suzanne C; Dowling Barbara; Fries Erik; Milner Caroline M; Loughlin John; Day Anthony J;

Journal:J Biol Chem

PubMed ID:11854277

Tumor necrosis factor-stimulated gene-6 (TSG-6) encodes a 35-kDa protein, which is comprised of contiguous Link and CUB modules. TSG-6 protein has been detected in the articular joints of osteoarthritis (OA) patients, with little or no constitutive expression in normal adult tissues. It interacts with components of cartilage matrix (e.g. hyaluronan ... More