pHrodo™ Dyes for Amine Labeling

Realice estudios de internalización celular con baja relación señal-fondo y alta especificidad mediante los colorantes con sensor de pH pHrodo, incluidos los colorantes pHrodo Red, Green y Deep Red. Estos colorantes pueden conjugarse con biomoléculas como anticuerpos y convertirse en altamente fluorescentes solo cuando se encuentran en entornos ácidos, como los de los lisosomas celulares y endosomas. Esto permite la detección de la biomolécula conjugada en el ensayo de células vivas sin necesidad de realizar pasos de lavado ni colorantes de supresión en el flujo de trabajo experimental.

Colorantes pHrodo Red, Green y Deep Red
Los colorantes sensibles al pH y reactivos a aminas pHrodo Red, Green y Deep Red, están optimizados para la creación de bioconjugados utilizados en el estudio de la internalización de anticuerpos, la endocitosis y la fagocitosis en ensayos de células vivas. Los colorantes pHrodo reactivos a aminas permiten etiquetar aminas primarias en un anticuerpo, proteína, célula, virus u otra biomolécula que contenga aminas para crear un conjugado con fluorescencia dentro de entornos ácidos, pero que muestra poca o ninguna señal con pH neutro. La falta de fluorescencia de los colorantes pHrodo en un entorno extracelular típico elimina la necesidad de realizar pasos de lavado o de colorantes de supresión en el flujo de trabajo experimental.

Colorantes de éster pHrodo iFL Red y Green STP
Los colorantes de éster pHrodo iFL Red y Green STP son versiones mejoradas de los colorantes pHrodo Red y Green originales y están optimizados para crear conjugados más solubles que los colorantes originales. Esta propiedad mejorada los hace útiles para el etiquetado de anticuerpos que de otro modo pueden precipitarse fuera de la solución durante el conjugado.

Éster de TFP rojo profundo pHrodo
El éster de TFP rojo profundo pHrodo es distinto de los tintes de éster rojo y verde pHrodo IFL en el sentido de que tiene una pKa inferior y, como resultado, muestra una relación señal-fondo mejorada y fluorescencia más adelante en la vía endocítica. Nuestro colorante pHrodo Deep Red de fondo bajo facilita más que nunca el estudio de la internalización con una mayor certeza de los resultados y una menor optimización porque el colorante pHrodo Deep Red solo produce fluorescencia en el endosoma y el lisosoma tardíos.

Características y ventajas de los colorantes pHrodo para el etiquetado de aminas

• Personalización: utilice tintes pHrodo sensibles al pH para realizar bioconjugados sensibles al pH de su elección
• Velocidad y precisión- obtenga resultados más rápidos y precisos que con cualquier otro ensayo de endocitosis o fagocitosis, sin la necesidad de realizar pasos de lavado ni de supresores
• Multiplexing: multiplexado con marcadores fluorescentes verdes o rojos, como GFP o RFP, con tres opciones de color diferentes
• Ventana de señal superior: con el fondo mínimo del colorante pHrodo Deep Red a pH neutro, la relación señal-ruido máxima está habilitada para obtener la máxima certeza en los resultados
• Baja pKa: el colorante pHrodo Deep Red elimina la señal no específica de la carga no internalizada, con el resultado de que la fluorescencia solo se produce en los endosomas y lisosomas tardíos

El aumento de la fluorescencia de los colorantes pHrodo a medida que el pH se acidifica se correlaciona con la acidificación de las vesículas intracelulares, haciendo que estos colorantes sean herramientas valiosas para el estudio de la endocitosis o la fagocitosis y su regulación por factores ambientales, fármacos o patógenos. Las propiedades espectrales de los colorantes pHrodo iFL los hacen útiles para experimentos multicolores. Los colorantes pHrodo iFL Red, iFL Green y Deep Red pueden detectarse utilizando la mayoría de los conjuntos de filtros fluorescentes estándar rojos, verdes y rojo oscuro. Los conjugados de colorantes pHrodo han sido validados para su uso en una variedad de aplicaciones, incluidas la citometría de flujo, la microscopía fluorescente y la detección de alto contenido (HCS).

El colorante pHrodo Deep Red tiene una pKa inferior por diseño y no muestra ninguna señal en condiciones neutras, produciendo fluorescencia solo en entornos ácidos. Esta propiedad exclusiva permite el desarrollo rápido de ensayos y la certeza de los resultados al investigar la internalización de anticuerpos y las vías endocíticas/fagocíticas. El colorante pHrodo Deep Red permite una mejor discriminación de la carga internalizada desde fuera de la célula, mientras que los colorantes pHrodo IFL Red y Green producen fluorescencia en el endosoma temprano.