ADN plasmídico pBR322

pBR322 Thermo Scientific es uno de los vectores de clonación de E. coli más utilizados.

Aspectos destacados

• Aislado a partir de E. coli (dam+, dcm+)
• Más del 90 % en forma superenrollada
• Purificado por cromatografía utilizando tecnología patentada

Aplicaciones

• Clonación
• Preparación de patrones de peso molecular de ADN

pBR322 mide 4361 bp y contiene:
• El replicón rep responsable de la replicación del plásmido (fuente: plásmido pMB1)
• El gen rop, codificando para la proteína Rop, que promueve la conversión del complejo inestable RNA I – RNA II en un complejo estable y sirve para disminuir el número de copias (fuente: plásmido pMB1)
• El gen bla, codificando para la beta-lactamasa, que confiere resistencia a la ampicilina (fuente: transposon TN3)
• El gen tet, codificando la proteína de resistencia a la tetraciclina (fuente: plásmido pSC101)
• La secuencia circular está numerada de tal manera que 1 es la primera T del sitio único de EcoRI GAATTC y la numeración aumenta a través del gen tet y el material pMB1 y finalmente a través de la región TN3.

El mapa muestra enzimas que cortan el ADN de pBR322 una vez. Las enzimas producidas por Thermo Scientific se muestran en naranja. Las coordenadas se refieren a la posición del primer nucleótido en cada secuencia de reconocimiento.
Las posiciones exactas de los elementos genéticos se muestran en el mapa (codones de terminación incluidos). El gen bla nucleótidos 4153-4085 (cadena complementaria) codifica para un péptido de señal. La región rep indicada es suficiente para promover la replicación. La replicación del ADN se inicia en la posición 2533 (± 1) y procede en la dirección indicada. Los plásmidos que portan los replicones pMB1 y ColE1 son incompatibles, pero son totalmente compatibles con los que portan el replicón p15A (pACYC177, pACYC184). Los plásmidos derivados de pMB1 pueden amplificarse con cloranfenicol.