Kits de apoptosis de células muertas con anexina V para citometría de flujo
Kits de apoptosis de células muertas con anexina V para citometría de flujo
Invitrogen™

Kits de apoptosis de células muertas con anexina V para citometría de flujo

Evalúe la viabilidad celular con los kits de apoptosis de células muertas con anexina V y tintes fluorescentes conjugados como Alexa Fluor 488, FITC, PI, PE, APC y SYTOX Green.
Have Questions?
Cambiar vistabuttonViewtableView
Número de catálogoCantidadEtiqueta o tinte
V132421 kitFITC, yoduro de propidio
V1324150 ensayosAlexa Fluor 488, yoduro de propidio
V351121 kitSYTOX Green, R-PE
V351131 kitSYTOX Green, APC
V13245250 ensayosAlexa Fluor 488, yoduro de propidio
Número de catálogo V13242
Precio (MXN)
-
Cantidad:
1 kit
Etiqueta o tinte:
FITC, yoduro de propidio
Diferencie fácilmente células vivas, muertas y apoptóticas durante la citometría de flujo con nuestros kits de apoptosis de células muertas con conjugados de anexina V que incluyen Alexa Fluor 488, FITC, yoduro de propidio, PE, APC y SYTOX Green. Estos conjugados distinguen células vivas, muertas o apoptóticas mediante diferentes tintes, lo cual es fundamental para confirmar la viabilidad celular y la apoptosis mediante estudios multiparamétricos.
Hay varias ventajas en el uso de kits de apoptosis de células muertas con anexina V para citometría de flujo con el fin de analizar la viabilidad celular:

Brillo superior
A diferencia de otros kits de anexina V que tienen concentraciones de proteínas o niveles de purificación más bajos, el conjugado de anexina V Alexa Fluor 488 está optimizado para la citometría de flujo para proporcionar la mayor separación posible entre células apoptóticas y vivas. El tinte Alexa Fluor 488 es un tinte verde fluorescente superior con un espectro similar al de la fluoresceína (FITC o isotiocianato de fluoresceína).

Alta eficacia de unión
Los conjugados de anexina V se obtienen a partir de cisteína-anexina altamente purificada, lo que da como resultado un aumento de la eficacia de unión y una caracterización muy precisa del proceso apoptótico.

Multiparamétrico
Muchas publicaciones requieren un mínimo de dos métodos diferentes para identificar células apoptóticas. Este kit multiparamétrico detecta fosfatidilserina (PS) sobre la superficie citoplasmática de la membrana celular, mientras que la integridad de la membrana se determina mediante yoduro de propidio.

Kit de apoptosis de células muertas con anexina V Alexa Fluor 488 y PI
El kit de apoptosis de células muertas con anexina V Alexa Fluor 488 y yoduro de propidio (PI) (V13241, V13245) se utiliza en citometría de flujo para medir la apoptosis temprana mediante la detección de la expresión de fosfatidilserina (PS) y la permeabilidad de la membrana. Cuando las células se tiñen con anexina V y yoduro de propidio, las células apoptóticas que expresan PS muestran fluorescencia verde, que se puede detectar en el canal del FITC, así como baja fluorescencia roja. Las células muertas o necróticas muestran fluorescencia de color rojo brillante y ninguna fluorescencia verde, mientras que las células vivas no muestran ninguna fluorescencia, ni verde ni roja.

Kit de apoptosis de células muertas con anexina V PE y SYTOX Green
El kit de apoptosis de células muertas con anexina V PE y SYTOX Green detecta la externalización de PS en células apoptóticas durante la citometría de flujo mediante la anexina V recombinante conjugada con la ficobiliproteína R-PE fluorescente naranja, mientras que las células muertas se detectan con la tinción de ácido nucleico SYTOX Green. Después del tratamiento con ambas sondas, las células apoptóticas muestran una fluorescencia naranja, las células muertas se muestran con una fluorescencia verde y las células vivas muestran poca o ninguna fluorescencia. Estas poblaciones pueden distinguirse fácilmente en los filtros de paso de banda de 530/30 nm y 585/42 nm con un citómetro de flujo láser de 488 nm.

Kit de apoptosis de células muertas con anexina V APC y SYTOX Green
El kit de apoptosis de células muertas con anexina V APC y SYTOX Green detecta la externalización de PS en células apoptóticas durante la citometría de flujo mediante la anexina V recombinante conjugada con aloficocianina excitada por láser rojo, y las células muertas mediante la tinción de ácido nucleico SYTOX Green. Las células apoptóticas se detectan mediante la unión de la anexina V al PS externalizado. Las células vivas muestran poca o ninguna fluorescencia, las células apoptóticas muestran fluorescencia roja y muy poca fluorescencia verde, y las células apoptóticas tardías muestran un nivel más alto de fluorescencia roja y naranja. Estas poblaciones pueden distinguirse fácilmente utilizando un citómetro de flujo con fuentes de excitación de 488 nm y 633 nm (un láser de iones de argón y uno HeNe).

Kit de apoptosis de células muertas con anexina V FITC y PI
El kit de apoptosis de células muertas con anexina V FITC y PI detecta la externalización de PS en células apoptóticas mediante la anexina V recombinante conjugada con colorante FITC verde fluorescente, y las células muertas mediante PI. Las células necróticas que se tiñen con PI muestran fluorescencia roja. Después del tratamiento con ambas sondas, las células apoptóticas muestran una fluorescencia verde, las células muertas se muestran con fluorescencia roja y verde, y las células vivas muestran poca o ninguna fluorescencia.

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
Especificaciones
DescripciónKit de apoptosis de células muertas con anexina V-FITC y PI para citometría de flujo
Excitación/emisión494, 535/518, 617
Líneas láser del citómetro de flujo488
Para utilizar con (equipo)Citómetro de flujo
Contenido del kitContiene 1 vial de conjugado de anexina V, FITC (250 μl), 1 vial de yoduro de propidio (PI, 100 μl) y 1 frasco de tampón de unión de anexina (solución 5X, 15 ml).
Etiqueta o tinteFITC, yoduro de propidio
N.º de reacciones50
Tipo de productoKit de detección de apoptosis
Cantidad1 kit
Condiciones de envíoHielo húmedo
Unit Size1 kit
Contenido y almacenamiento
Almacenar en el refrigerador (2 °C a 8 °C) y proteger de la luz.

Preguntas frecuentes

I want to study apoptosis using an Annexin V conjugate, but with adherent cells via microscopy instead of flow cytometry. Can this be done?

It has been done, but we don‘t recommend it. Both healthy cells and apoptotic cells possess phosphatidylserine on the cell surface, which can be detected with Annexin V, but apoptotic cells have significantly more of it. You can easily tell the difference between these two populations with flow cytometry, because flow cytometers are more sensitive and have a higher throughput. But with a microscope, you cannot always tell the difference, especially for adherent cells. Instead, for microscopy, we recommend a different technique, such as detecting caspases with CellEvent Caspase Detection Reagents.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

When using Dead Cell Apoptosis Kits with Annexin V for Flow Cytometry, what does a PI+ only population (hence Annexin V negative) correspond to?

These products are cells that died without undergoing apoptosis. A PI+ only population could be either a result of experimental condition or sample preparation.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

I trypsinized my adherent cells and labeled with annexin V, and now my flow data is showing a high percentage of apoptotic cells even for control, untreated cells. What is the problem?

Trypsinization or mechanical scraping of cells temporarily disrupts the plasma membrane, allowing annexin V to bind phosphatidylserine on the cytoplasmic surface of the cell membrane and thus leading to false positive staining. Allow the cells to recover for about 30 minutes in optimal cell culture conditions and medium after trypsinizing/scraping so that they can recover their membrane integrity before staining. For lightly adherent cell lines, such as HeLa and NIH 3T3, another option is to use non-enzyme treatments like Gibco Cell Dissociation Buffer (Cat. No. 13151014).

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Can I detect annexin V staining in an imaging assay?

Annexin V staining is not typically used in imaging experiments; it is a better reagent for flow cytometry analysis. All cells will stain to some extent, so it can be difficult to distinguish a relatively bright annexin V-stained cell from a dimmer non-apoptotic cell. Caspase activation, detected using our CellEvent Caspase 3/7 or Image-iT LIVE Caspase detection kits, is a better method for detecting apoptosis in an imaging assay.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

When should I stain adherent cells with annexin V for flow cytometric analysis? Before or after I trypsinize them?

Trypsinize first and then allow the cells to recover about 30 minutes in optimal cell culture conditions and medium before staining with annexin V conjugates. Trypsinization or mechanical scraping of cells temporarily disrupts the plasma membrane, allowing for annexin V to bind phosphatidylserine on the cytoplasmic surface of the cell membrane and thus leading to false positive staining. For lightly adherent cell lines such as HeLa and NIH 3T3, you could use a less harsh (non-enzymatic) dissociation product like Gibco Cell Dissociation Buffer (Cat. No. 13151014).

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Citations & References (34)

Citations & References
Abstract
Phenotypic and functional effects of heat shock protein 90 inhibition on dendritic cell.
Authors:Bae J,Mitsiades C,Tai YT,Bertheau R,Shammas M,Batchu RB,Li C,Catley L,Prabhala R,Anderson KC,Munshi NC
Journal:Journal of immunology (Baltimore, Md. : 1950)
PubMed ID:17548610
Chitin is a size-dependent regulator of macrophage TNF and IL-10 production.
Authors:Da Silva CA, Chalouni C, Williams A, Hartl D, Lee CG, Elias JA,
Journal:J Immunol
PubMed ID:19265136
'Chitin is a ubiquitous polysaccharide in fungi, insects, and parasites. We hypothesized that chitin is a size-dependent regulator of innate immunity. To test this hypothesis, we characterized the effects of chitins of different sizes on murine bronchoalveolar or peritoneal macrophages. In these studies, large chitin fragments were inert, while both ... More
The ubiquitin-like protein FAT10 forms covalent conjugates and induces apoptosis.
Authors:Raasi S, Schmidtke G, Groettrup M
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:11445583
'FAT10 is a ubiquitin-like protein that is encoded in the major histocompatibility complex class I locus and is synergistically inducible with interferon-gamma and tumor necrosis factor alpha. The molecule consists of two ubiquitin-like domains in tandem arrangement and bears a conserved diglycine motif at its carboxyl terminus commonly used in ... More
Apoptosis in tumour cells photosensitized with Rose Bengal acetate is induced by multiple organelle photodamage.
Authors:Soldani C, Croce AC, Bottone MG, Fraschini A, Biggiogera M, Bottiroli G, Pellicciari C,
Journal:Histochem Cell Biol
PubMed ID:17849139
'Rose Bengal (RB) is a very efficient photosensitizer which undergoes inactivation of its photophysical and photochemical properties upon addition of a quencher group-i.e. acetate-to the xanthene rings. The resulting RB acetate (RB-Ac) derivative behaves as a fluorogenic substrate: it easily enters the cells where the native photoactive molecule is restored ... More
Thiol/disulfide exchange is required for membrane fusion directed by the Newcastle disease virus fusion protein.
Authors:Jain S, McGinnes LW, Morrison TG
Journal:J Virol
PubMed ID:17151113
'Newcastle disease virus (NDV), an avian paramyxovirus, initiates infection with attachment of the viral hemagglutinin-neuraminidase (HN) protein to sialic acid-containing receptors, followed by fusion of viral and cell membranes, which is mediated by the fusion (F) protein. Like all class 1 viral fusion proteins, the paramyxovirus F protein is thought ... More