ZOOM™ urea

El fraccionador de IEF ZOOM™ ofrece un método rápido y fiable para reducir la complejidad de las muestras, enriquecer las proteínas de baja abundancia y aumentar el rango dinámico de detección. El enfoque isoeléctrico en fase de solución con el fraccionador de IEF ZOOM™ proporciona separaciones reproducibles en tres horas. Las muestras fraccionadas están listas para su posterior análisis mediante electroforesis bidimensional en gel (2DE), electroforesis en gel unidimensional (1DE) o cromatografía líquida bidimensional/espectrometría de masas (LC/MS 2D).

El sistema fraccionador ZOOM™ IEF (figura 1) consta de los siguientes componentes:

• El fraccionador ZOOM™ IEF está diseñado para ofrecer seguridad, fiabilidad y durabilidad. Incluye cámaras de muestras fáciles de montar, cámaras de tampón integradas, una cubeta de tampón, un conjunto de electrodos extraíble y una tapa de seguridad.
• Los discos ZOOM™ son geles de poliacrilamida prefundidos que eliminan la necesidad de preparación manual y minimizan cualquier posibilidad de contaminación cruzada. Estos discos inmovilizados con tampón están preetiquetados, son desechables y están diseñados para un solo uso, lo que garantiza un fraccionamiento uniforme y reproducible. Resuelven las muestras en hasta 7 fracciones (usando 8 discos de pH específico) a 6 fracciones (usando 6 discos de pH específico) de pH 3-12. Solo tiene que colocar cada disco entre las cámaras de muestras en el fraccionador de IEF ZOOM™ para permitir la separación en un intervalo de pH específico.
• Los reactivos ZOOM™ son reactivos de grado proteómico, incluidos los solubilizadores de proteínas urea, tiourea, CHAPS y anfolitos en 2D ZOOM™, que garantizan unas condiciones óptimas para la preparación de las muestras.
• Kit básico de proteínas que incluye discos ZOOM™ y tiras ZOOM para IEF de proteínas básicas, tampones de enfoque y kits solubilizadores.

Procedimiento de montaje de la cámara de muestras y de la unidad fraccionadora
Las figuras 4-6 ilustran el montaje de las cámaras de muestras y la unidad fraccionadora. La cámara de muestras y los componentes encajan fácilmente y ofrecen un sellado a prueba de fugas. Solo tiene que colocar los discos entre las cámaras de muestras en el fraccionador de IEF ZOOM™ para permitir la separación en un rango de pH específico. Por ejemplo, si desea fraccionar proteínas con pH entre 4,6 y 5,4, flanquee una cámara de muestras con un disco ZOOM (r) de pH 4,6 y uno de pH 5,4.

Procesamiento posterior mediante electroforesis en gel 2D
Tras el fraccionamiento, las muestras separadas se pueden someter a análisis adicionales utilizando tiras ZOOM™ de amplio o estrecho alcance en el sistema ZOOM™ IPGRunner™. Siga con el análisis de segunda dimensión utilizando geles NuPAGE™ ZOOM™ de pH neutro.