Shop All Expression Competent Cells

One Shot™ BL21 Star™ (DE3) Chemically Competent E. coli (Invitrogen™)

Les cellules chimiquement compétentes One Shot® BL21 Star™ (DE3) E. coli sont destinées aux applications nécessitant une expression de haut niveau des protéines recombinantes non toxiques à partir d’un faible nombre de copies, des systèmes d’expression basés sur le promoteur T7 (p. ex. vecteurs pET Champion™). Les cellules chimiquement compétentes One Shot® BL21 Star™ (DE3) ont une efficacité de transformation de 1 x 108 cfu/µg d’ADN plasmidique. Caractéristiques des cellules One Shot® BL21 Star™ :

• Contiennent un génotype qui favorise une haute stabilité d’ARNm et un haut débit de protéines
• Optimisées pour une utilisation en faible nombre de copies, plasmides basés sur le promoteur T7
• Fournies dans un format de tube unique et à usage unique. Toutes les étapes de transformation sont effectuées dans le même tube, ce qui permet de gagner du temps et d’empêcher toute contamination

Expression améliorée des protéines recombinantes non toxiques
Les cellules One Shot® BL21 Star™ (DE3) contiennent le lysogène DE3 qui porte le gène pour l’ARN polymérase T7 sous le contrôle du promoteur lacUV5. IPTG est requis pour induire l’expression. Cette souche offre également une meilleure stabilité d’ARNm compte tenu d’une mutation dans le gène RNaseE (rne131) qui réduit les niveaux de RNase endogènes et la dégradation d’ARNm, augmentant ainsi la stabilité des transcripts d’ARNm et le rendement des protéines. L’expression protéique est encore améliorée par l’absence de protéases lon et de membrane externe (OmpT), qui réduit la dégradation des protéines hétérologues.

Remarque : Les souches BL21 Star™ comportent une expression basale de gènes hétérologues supérieure aux souches BL21 compte tenu de la stabilité accrue de l’ARNm. C’est pourquoi, ces souches peuvent être inutiles pour l’expression des gènes toxiques.

Génotype :F-ompT hsdSB (rB-, mB-) galdcmrne131 (DE3)

Trouvez la souche et le format les mieux adaptés à vos besoins
Nous proposons également un grand nombre d’autres souches et formats de cellules chimiquement compétentes et de cellules électrocompétentes pour répondre à vos besoins spécifiques de transformation. Pour l’expression des protéines toxiques, pensez aux cellules chimiquement compétentes BL21-AI™ One Shot® E. coli.

BL21-AI™ One Shot™ Chemically Competent E. coli (Invitrogen™)

Les E. coli One Shot® BL21-AI™ sont des cellules chimiquement compétentes conçues pour les applications qui nécessitent une réglementation rigoureuse et une forte expression des protéines toxiques de tous les systèmes d’expression basés sur l’accélérateur T7. Les cellules chimiquement compétentes One Shot® BL21-AI™ présentent une efficacité de transformation de >1×108 cfu/µg d’ADN plasmidique.
• Idéales pour induire l’expression des protéines toxiques
• Expression génétique régulée par l’addition de L-arabinose à la culture
• Peuvent être utilisées avec tous les plasmides à base d’accélérateur T7
• Fournies dans un format pratique One Shot®

Excellente expression des protéines recombinantes toxiques
E. coli One Shot® BL21-AI™ contient une insertion chromosomique du gène encodant l’ARN polymérase T7 (T7RNAP) dans le locus araB de l’opéron araBAD, plaçant la régulation de l’ARN T7RNAP sous le contrôle de l’accélérateur inductible par l’arabinose araBAD (1). Par conséquent, cette souche est particulièrement utile pour l’expression de gènes qui peuvent être toxiques pour les autres souches BL21 lorsque l’expression basale de T7 RNAP fuit. La souche BL21-AI™ ne contient pas la protéase Ion et elle est déficiente en protéase membranaire externe OmpT. Ce génotype réduit la dégradation des protéines hétérologues exprimées dans cette souche. Enfin, le rendement de protéines recombinantes obtenu à partir de BL21-AI™ est généralement semblable à celui obtenu à partir d’autres souches BL21.

Génotype :
F-ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm araB::T7RNAP-tetA

Format en un seul tube, facile d’emploi
Le format de tube unique et à usage unique permet de réaliser toutes les étapes de transformation dans un seul et même tube, ce qui permet de gagner du temps et d’empêcher la contamination.

Trouvez la souche et le format les mieux adaptés à vos besoins
Nous proposons également un grand nombre d’autres souches et formats de cellules chimiquement compétentes et de cellules électrocompétentes pour répondre à vos besoins spécifiques de transformation. Pour l’expression de protéines recombinantes non toxiques, choisissez nos cellules chimiquement compétentes One Shot® BL21 Star™ (DE3) ou nos cellules chimiquement compétentes One Shot® BL21 Star™ (DE3) pLysS.

Usage exclusivement réservé à la recherche. Non utilisé à des fins diagnostiques ou thérapeutiques humaines ou animales.

One Shot™ BL21(DE3) Chemically Competent E. coli (Invitrogen™)

Les cellules chimiquement compétentes One Shot® BL21(DE3) E. coli conviennent parfaitement aux systèmes d’expression basés sur le promoteur du bactériophage T7 (p. ex. pRSET, pCR™T7 et pET). Les cellules BL21(DE3) transportent le lambda lysogène DE3. En règle générale, les protéines recombinantes non toxiques pour E. coli sont exprimées dans les cellules BL21(DE3) à des niveaux supérieurs que BL21(DE3)pLysS ou BL21(DE3)pLysE. Néanmoins, les niveaux d’expression basale des gènes hétérologues sont nettement supérieurs dans BL21(DE3) que dans BL21(DE3)pLysS ou BL21(DE3)pLysE.

À propos des souches BL21
Les souches BL21 proviennent de la souche E. coli B et ont été spécifiquement créées pour l’expression de haut niveau des protéines recombinantes. Ces souches ont deux attributs importants qui les rendent idéales pour l’expression des protéines : marqueurs génétiques clés et inductibilité de l’expression des protéines. Les marqueurs génétiques les plus importants permettent à l’ARN recombinant et/ou à la protéine de s’accumuler à des niveaux élevés sans dégradation. L’inductibilité permet de minimiser les effets toxiques de certaines protéines recombinantes.

One Shot™ BL21(DE3)pLysS Chemically Competent E. coli (Invitrogen™)

BL21(DE3)pLysS cells are ideal for use with T7 promoter-based expression systems (e.g., pRSET, pCR™T7, and pET). BL21(DE3)pLysS E. coli carry both the DE3 lysogen and the plasmid pLysS. pLysS constitutively expresses low levels of T7 lysozyme, which reduces basal expression of recombinant genes by inhibiting basal levels of T7 RNA polymerase.

PichiaPink™ Expression Strain Set (Invitrogen™)

The PichiaPink™ Expression Strain Set contains the 4 Pichia pastoris strains for use with the PichiaPink™ Expression System Kits. Each strain comes as a frozen stock in YPD media with 15% glycerol. All PichiaPink™ strains have the ade2 deletion. 3 strains have deletions of two protease genes, PEP4 and PRB1. You can use the PichiaPink™ Expression Strain Set to refill your PichiaPink™ Yeast Expression System Kits.

The PichiaPink™ Expression Strain Set includes the following Pichia strains:
•     PichiaPink™ Strain 1: ade2
•     PichiaPink™ Strain 2: ade2, pep4
•     PichiaPink™ Strain 3: ade2, prb1
•     PichiaPink™ Strain 4: ade2, prb1, pep4

Select Transformants by Color
The PichiaPink™ Yeast Expression System makes it easy to select for transformed colonies by color. Untransformed PichiaPink™ strains form pink colonies. When grown on plates without adenine, transformed PichiaPink™ strains form white colonies (Fig 1).

Get Reduced Protein Degradation
The PichiaPink™ Expression Strain Set comes with 3 strains that include knockouts in two protease genes. Protease-deficient strains reduce the need for protease inhibitors when growing your cells and improve the yield of your protein. Test a single protease knockout or the double protease knockout to find the one that works best for you.

Why Choose the PichiaPink™ Yeast Expression System?
The PichiaPink™ Yeast Expression System is based on the yeast Pichia pastoris. Advantages of Pichia pastoris include rapid growth, well-defined genetic background, simple media formulation, and easy handling. For over 30 years, Pichia pastoris has been used by labs around the world for producing hundreds of different proteins from many species including human (Ref 1, 2). The PichiaPink™ Yeast Expression System allows convenient and cost-effective protein production from small to large scales.

For information on obtaining a commercial-use license for the PichiaPink™Yeast Expression System, please inquire at outlicensing@lifetech.com.

For Research Use Only. Not intended for any animal or human therapeutic or diagnostic use.

Related Links
Learn more about the PichiaPink™ Yeast Expression System.
Learn more about our other protein expression systems.

References

1. Cereghino JL, Cregg JM. Heterologous protein expression in the methylotrophic yeast Pichia pastoris. FEMS Microbiol Rev. 2000 Jan;24(1):45-66. [PubMed]
2. Cereghino GP, Cereghino JL, Ilgen C, Cregg JM. Production of recombinant proteins in fermenter cultures of the yeast Pichia pastoris. Curr Opin Biotechnol. 2002 Aug;13(4):329-32. [PubMed]

BL21 Star™ (DE3)pLysS One Shot™ Chemically Competent E. coli (Invitrogen™)

One Shot® BL21 Star™ (DE3) pLysS E. coli are chemically competent cells designed for applications that require high-level expression of non-toxic recombinant proteins from high copy number, T7 promoter-based expression systems (e.g., pRSET T7 vectors). One Shot® BL21 Star™ (DE3) pLysS Chemically Competent cells have a transformation efficiency of >1 x 108 cfu/ µg plasmid DNA.
• High mRNA stability results in increased protein yield
• Ideal for use with high copy number, T7 promoter-based plasmids
• Low background expression in uninduced cells

Increased mRNA Stability Improves Protein Yield
One Shot® BL21 Star™ (DE3) pLysS E. coli offers enhanced mRNA stability so that abundant mRNA is available for protein expression. This enhanced stability is due to a mutation in the RNaseE gene (rne131), which is involved in mRNA degradation.

High Expression of Non-Toxic Recombinant Proteins
One Shot® BL21 Star™ (DE3) pLysS cells are ideal for high-level expression of non-toxic but potentially growth-inhibiting recombinant proteins from high copy number, T7 promoter-based expression systems. The pLysS CamR plasmid carried by the BL21 Star™ (DE3) pLysS strain expresses T7 lysozyme, a T7 RNA polymerase inhibitor that prevents leaky expression in uninduced cells. The p15a origin of pLysS makes this plasmid compatible with pUC or pBR322-derived plasmids. This strain also contains the DE3 lysogen that carries the T7 RNA polymerase gene under control of the lacUV5 promoter, and IPTG is required to induce expression of the T7 RNA polymerase. One Shot® BL21 Star™ (DE3) pLysS cells do not contain the lon protease and are also deficient in the outer membrane protease, OmpT. The absence of these proteases reduces degradation of heterologous proteins.

Note: The BL21 Star™ strains have higher basal expression of heterologous genes than BL21 strains, due to the increased stability of mRNA. Therefore, these strains may not be useful for expression of toxic genes. However, the BL21 Star™ (DE3) pLysS strains offer lower expression levels than the BL21 Star™ strains.

Genotype:
F-ompT hsdSB (rB-, mB-) galdcmrne131 (DE3) pLysS (CamR)

Easy-to-use, Single Tube Format
The single tube, single use, format allows for all steps of transformation up to plating to take place in the same tube, thereby helping to save time and prevent contamination.

Find the Strain and Format That You Need
We also offer many other different strains and formats of chemically competent cells and electrocompetent cells to help meet your specific transformation needs. For expression of toxic proteins, choose BL21-AI™ One Shot® Chemically Competent E. coli. For expression of non-toxic recombinant proteins from low copy number (e.g. Champion™ pET vectors), T7 promoter-based expression system, choose our One Shot® BL21 Star™ (DE3) chemically competent cells.

For Research Use Only. Not intended for animal or human diagnostic or therapeutic use.

One Shot™ BL21(DE3)pLysE Chemically Competent E. coli (Invitrogen™)

BL21(DE3)pLysE E. coli are ideal for use with T7 promoter-based expression vectors. Like BL21(DE3)pLysS E. coli, BL21(DE3)pLysE carry the lambda DE3 lysogen. In addition, BL21(DE3)pLysE cells contain the pLysE plasmid, which constitutively expresses T7 lysozyme. T7 lysozyme reduces the basal expression of target genes by inhibiting T7 RNA polymerase. The pLysE plasmid in BL21(DE3)pLysE expresses higher levels of T7 lysozyme than the pLysS plasmid in BL21(DE3)pLysS.
The BL21(DE3)pLysE strain provides tighter control of T7 RNA polymerase, which is necessary when the recombinant protein to be expressed is toxic.