Lipofectamine 3000 试剂

注意:也许你付出很多却得到非常低的细胞转染效率

每个反应仅需几分钱便可获得超过70%的转染效率。

  • 卓越的细胞转染效率—针对最广泛类型的难转染细胞,可将效率提升10倍
  • 作用温和,细胞毒性低—可改善细胞活力
  • 性价比最高— 经济的价格,同时实现最顶级的转染结果

Lipofectamine 3000转染试剂提供针对肺癌、乳腺癌、肝癌、胰腺癌等多种癌症细胞系的经验证优化转染实验方案。高效稳定的转染是建立可靠细胞模型的基础。
Lipofectamine 3000转染试剂助力您的癌症研究,推进新型肿瘤标记物的发现。

了解更多特殊应用转染指南   下载Lipofectamine 3000应用说明

本页面内容:

针对最广泛类型的难转染细胞可实现超高转染效率

Lipofectamine 3000试剂采用我们最先进的脂质纳米颗粒技术,实现绝佳转染性能和可重复性的结果。 其可针对最广泛类型的常见及难转染细胞,实现超高转染效率(图1),同时提供更高的细胞活力。

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图 1. Lipofectamine® 3000试剂性能优于Lipofectamine® 2000和FuGENE® HD试剂。使用上述试剂分别在96孔板内转染HEK 293、HeLa、LNCaP、HepG2和A549细胞,并在48小时后观察GFP表达。 在所有5种细胞系内,Lipofectamine 3000试剂GFP转染效率均高于Lipofectamine 2000和FuGENE HD试剂。

图 2: Lipofectamine® 3000的转染步骤简单易用,同时确保了在多种细胞类型中的最佳性能和可靠性。

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性质温和毒性低

研发Lipofectamine® 3000时,我们优化了转染过程的全部四个步骤并结合了我们最先进的脂质纳米颗粒技术。绝佳的转染性能可以降低所需的试剂量并降低所有可能对您的细胞系产生毒性的风险。

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图 3. 使用3种不同试剂以图中所示的用量在96孔板内向Hela细胞中转染绿色荧光蛋白(GFP)表达载体。
转染后48小时使用流式分析测定转染效率和GFP表达强度。 Lipofectamine® 3000试剂相比Lipofectamine® 2000试剂和Lipofectamine® LTX试剂获得了更高的转染效率和蛋白表达。


提升您的癌症研究

使用与癌症最相关的细胞系得到与您研究的问题最相关的答案。凭借更广的适用细胞类型、更高的转染效率,Lipofectamine 3000试剂能让您灵活选择研究所用的细胞系。

表 1. Lipofectamine® 3000试剂在多种细胞系上都能获得比Lipofectamine® 2000试剂更高的转染效率。

细胞类型 Lipofectamine® 3000试剂转染效率 Lipofectamine® 3000 和 2000蛋白表达提高倍数 细胞类型来源
4 小鼠胚胎成纤维细胞系
2 小鼠乳腺肿瘤细胞系
2 人表皮样癌细胞系
3 人肺癌细胞系
2 人肾癌细胞系
9 小鼠脑内皮细胞系
3 人皮肤成纤维细胞系
4 人乳腺肿瘤细胞系
3 小鼠成肌细胞系
5 大鼠神经胶质瘤细胞系
Caco-2 2 人结肠癌细胞系
4 人肾透明细胞癌细胞系
CHO-K1 1 中国仓鼠卵巢细胞系
1 中国仓鼠卵巢细胞系
SP 205 4 人结肠癌细胞系
SP -7 4 猴成纤维细胞样细胞系

转染效率(%)* <30%     30–50%    51–79%    >80%

细胞类型 Lipofectamine® 3000试剂转染效率 Lipofectamine® 3000 和 2000蛋白表达提高倍数 细胞类型来源
4 小鼠胚胎成纤维细胞系
2 小鼠乳腺肿瘤细胞系
2 人表皮样癌细胞系
3 人肺癌细胞系
2 人肾癌细胞系
9 小鼠脑内皮细胞系
3 人皮肤成纤维细胞系
4 人乳腺肿瘤细胞系
3 小鼠成肌细胞系
5 大鼠神经胶质瘤细胞系
Caco-2 2 人结肠癌细胞系
4 人肾透明细胞癌细胞系
CHO-K1 1 中国仓鼠卵巢细胞系
1 中国仓鼠卵巢细胞系
SP 205 4 人结肠癌细胞系
SP -7 4 猴成纤维细胞样细胞系

转染效率(%)* <30%     30–50%    51–79%    >80%

Lipofectamine 3000试剂在一系列不同组织来源的癌症细胞系中比其他领先的转染试剂如Lipofectamine 2000试剂,转染效率更高。 在我们精选的癌症细胞系系组合中,仅有25%的细胞可采用Lipofectamine 2000 试剂轻松转染(转染效率>50%),60%的细胞却可采用Lipofectamine 3000试剂轻松转染。

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图 4. 使用Lipofectamine® 2000 试剂和Lipofectamine® 3000试剂向17个细胞系内转染GFP表达质粒,转染在24孔板内进行,0.5 µg质粒/孔。
48小时后分析基因表达。 每个条件重复了3次,数据点表示转染效率+SD.


制备诱导多能干细胞(iPSC)

Lipofectamine® 3000的高转染效率和Epi5™ Episomal iPSC重编程试剂盒结合可以实现高效体细胞重编程,无需电转染。

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图 5. Lipofectamine® 3000试剂盒电转染的重编程效率比较。 使用Lipofectamine® 3000 试剂或Neon®转染系统将Epi5™载体转染进入BJ成纤维细胞以及新生儿(HDFn)和成人(HDFa)皮肤成纤维细胞并将其重编程为iPSC。 采用明场显微镜和碱性磷酸酶(B) 染色法,对克隆进行(A)可视化。


提升基因组编辑结果

Lipofectamine® 3000试剂的研发突破了细胞转染的界限并促进了新技术例如基因组编辑在生物学相关领域的应用。 采用此试剂,Invitrogen GeneArt TALsCRISPR系列可以靶向HepG2和U2OS细胞中的AAVS1位点,呈现更高的转染效率、平均荧光强度以及基因组切割效果。这些转染技术上的进步简化了令人头疼的下游工作流程,使得对干细胞的操作更为简单,并提高了转基因在细胞基因组上的位点特异性插入效率。

 下载应用说明

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图 6. GeneArt TALsCRISPRs切割效率。 TALs 和 CRISPRs 靶向 (A) U2OS 和(B) HepG2 细胞系内的AAVS1 位点。 采用Invitrogen GeneArt 基因组切割检测试剂盒分析切割效果。

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图 7. CRISPR载体的转染效率和蛋白表达。含有报告基因开放阅读框(OFP)的载体被Lipofectamine 2000或Lipofectamine 3000 试剂转染进 (A) U2OS 和 (B) HepG2细胞系。柱状图显示报告基因表达,图片显示相应的细胞内OFP荧光蛋白的表达。


转染干细胞

转染干细胞

图 8. 干细胞转染。 (A) H9 ESCs或(B) iPSCs采用Lipofectamine 3000试剂转染。 使用荧光显微镜观察细胞并通过流式细胞仪检测转染效率。

资源

应用资料

海报

实验流程