Detección de mutaciones mediante PCR digital

La biopsia líquida se utiliza para identificar y realizar un seguimiento de las mutaciones genéticas que causan cáncer, lo que permite a los investigadores detectar el cáncer en sus primeras etapas, medir la respuesta terapéutica, cuantificar la carga residual del tumor y supervisar la resistencia emergente a los tratamientos potenciales. En las biopsias líquidas se utiliza ADN extracelular circulante (ADNec), obtenido a partir de células normales y cancerosas que han sufrido apoptosis o necrosis y han liberado su contenido de ADN en su entorno (1). El componente del ADNec liberado por las células cancerosas se conoce más comúnmente como ADN tumoral circulante o ADNtc.

La detección de ADNtc en aplicaciones de biopsia líquida constituye un reto, debido a que las moléculas que aportan mutaciones de cáncer son sólo una pequeña fracción del ADNec  circulante total recogido en la muestra. La PCR digital (dPCR) es un método establecido para la identificación rápida y fiable de mutaciones genéticas. La cuantificación precisa de polimorfismos de nucleótidos únicos que se producen en baja abundancia entre el ADN de fondo natural requiere un ensayo de biopsia líquida adecuado con una sensibilidad y especificidad excepcionales. Los ensayos de dPCR de biopsia líquida Absolute Q de Applied Biosystems son un método preciso, rentable y rápido para controlar la respuesta y la resistencia al tratamiento, a través de pruebas para detectar las mutaciones relevantes que provocan el cáncer y son resistentes el tratamiento.

Los ensayos de dPCR de biopsia líquida Absolute Q permiten la detección específica y reproducible de mutaciones somáticas conocidas. Cada ensayo prediseñado se ha validado mediante controles para detectar una frecuencia de alelos variantes del 0,1 % en genes relevantes para la investigación del cáncer.

Los ensayos de dPCR de biopsia líquida Absolute Q ofrecen:

• Sencillez: preformulados y verificados en un solo tubo, lo que le permite iniciar inmediatamente su investigación
• Rapidez: tiempo de manipulación mínimo; resultados en 90 minutos cuando se utiliza con el sistema de PCR digital QuantStudio Absolute Q
• Alta sensibilidad: detectan una frecuencia de alelos variante de hasta 0,1 %
• Eficacia: análisis de datos de alta fiabilidad mediante ensayos verificados respaldados por una garantía de rendimiento*
   

Para objetivos de ADN/ADNc

Absolute Q DNA Digital PCR Master Mix (5X) se ha optimizado para su uso con el sistema de PCR digital QuantStudio Absolute Q. La mezcla está diseñada como una formulación de un solo paso y un solo tubo con la que se lleva a cabo una cuantificación de ARN rápida, sencilla y reproducible, en la que se precisan mínimos pasos de procesamiento de preparación.

Características principales del producto:

• Obtención rápida de resultados : unos cinco minutos de tiempo de manipulación y resultados en menos de dos horas
• Formulación práctica de 1 paso : ahorre tiempo y esfuerzo gracias a la reducción de los pasos de conversión previos del ADNc
• Alta sensibilidad : detecte < 1 copia/μl de un objetivo específico en una reacción 4 plex
• Optimización para multiplexado : capaz de detectar hasta cuatro objetivos en una sola reacción
• Alta precisión : detecta un 20 % de diferencias en la concentración de ARN