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Transfection CRISPR |
La transfection est le processus par lequel les molécules CRISPR de ribonucléoprotéine (RNP), d’ADN et d’ARN sont délivrées dans les cellules. Une étape difficile du flux de travail CRISPR-Cas9 est l’étape de transfection : comment fournir efficacement les composants CRISPR-Cas9 dans la lignée cellulaire de choix. Il existe de nombreuses méthodes de délivrance CRISPR, mais la méthode la plus appropriée dépend de l’application.
Guide de sélection des solutions de transfection CRISPR
Entre le système d’électroporation Neon et la gamme de réactifs Invitrogen Lipofectamine, Thermo Fisher Scientific propose des solutions complètes pour tous les besoins de transfection CRISPR. Avec chaque produit, des protocoles optimisés ont été développés pour faciliter la délivrance et assurer une grande efficacité de transfection. Explorez le guide ci-dessous pour trouver la meilleure solution adaptée à vos besoins de flux de travaux en matière de modification génétique.
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Méthodes de livraison CRISPR
Il existe plusieurs méthodes de délivrance CRISPR, notamment la transfection par nanoparticules lipidiques et les méthodes physiques, telles que l’électroporation et la microinjection.
Lipofection CRISPR
La lipofection, également connue sous le nom de transfection par nanoparticules lipidiques, est le processus de délivrer de l’ADN, de l’ARN ou du RNP CRISPR dans le cytoplasme des cellules ciblées via de petites structures cellulaires appelées liposomes.
Les réactifs de transfection Lipofectamine sont utilisés pour faciliter la délivrance CRISPR-Cas9 à un large éventail de types de cellules. Le réactif de transfection Cas9 Lipofectamine CRISPRMAX est une solution de qualité supérieure pour la délivrance du RNP comprenant une protéine TrueCut Cas9 et un ARNsg synthétique TrueGuide.
Électroporation CRISPR
Souvent utilisée pour transfecter des cellules difficiles à transfecter, l’électroporation applique du courant électrique aux cellules cibles, créant ainsi de petites ouvertures dans leurs membranes. Ces ouvertures permettent aux composants du CRISPR-Cas9 de pénétrer dans les cellules.
Le système de transfection Neon est un excellent choix pour la transfection CRISPR-Cas9 de toutes les cellules de mammifères, y compris les cellules primaires, les cellules souches et les cellules difficiles à transfecter.
Transduction lentivirale CRISPR
La transduction lentivirale utilise des vecteurs lentiviraux pour transférer des acides nucléiques dans la cellule. Une fois que le lentivirus Cas9 pénètre dans les cellules, le système CRISPR-Cas9 modifie l’ADN cellulaire. Par la suite, cet hôte transgénique continuera d’exprimer la modification génétique. La transduction lentivirale est souvent utilisée pour créer des lignées cellulaires stables qui expriment continuellement la séquence d’intérêt modifiée par CRISPR.
Ressources et support de transfection CRISPR
Gene editing resources and support
Resources
Support
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.