Das Thermo Scientific EZ–Link NHS-PEG4 Biotinylierungskit enthält EZ-Link NHS-PEG4-Biotin und Zubehörreagenzien, die für 8 Proteinmarkierungsreaktionen (1 bis 10 mg) erforderlich sind. EZ-Link NHS-PEG4-Biotin ist ein pegyliertes, wasserlösliches Reagenz zur einfachen und effizienten Biotinmarkierung von Antikörpern, Proteinen und anderen primären aminhaltigen Makromolekülen.
Merkmale von EZ-Link NHS-PEG4-Biotin:
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Proteinkennzeichnung—biotinyliert Antikörper oder andere Proteine zum Nachweis oder zur Aufreinigung mit Streptavidinproben oder Harzen
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aminreaktiv —reagiert mit primären Aminen (-NH2), wie der Seitenkette von Lysinen (K) oder den Aminotermini von Polypeptiden
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Pegyliert – der Spacerarm enthält eine hydrophile Polyethylenglycol (PEG)-Gruppe mit 4 Einheiten
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Verbesserte Löslichkeit –Pegylation verbessert die Wasserlöslichkeit des biotinylierten Moleküls, um die Aggregation von in der Lösung befindlichen biotinylierten Antikörpern zu verhindern
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Irreversibel—bildet dauerhafte Amid-Verbindungen; der Spacerarm kann nicht gespalten werden
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Große Reichweite – die Länge des Spacerarms (gesamte Länge zum Ziel hinzugefügt) beträgt 29 Angström. Dadurch wird die sterische Behinderung der Bindung an Avidin-Moleküle verringert.
NHS-PEG4-Biotin ist ein langes (29,0 Å), pegyliertes, wasserlösliches Biotinylierungsreagenz aus NHS-Ester zur Kennzeichnung von Aminen und Maximierung der Löslichkeit von Antikörpern und anderen Proteinen. Die
N-Hydroxysuccinimid-Estergruppe (NHS) reagiert spezifisch und effizient mit Lysin- und N-terminalen Aminogruppen und bildet so stabile Amid-Verbindungen. Der hydrophile
Polyethylenglykol (PEG)-Spacerarm gewährleistet die Wasserlöslichkeit, die auf das biotinylierte Molekül übertragen wird, wodurch die Aggregation markierter Proteine in der Lösung reduziert wird. Der PEG-Spacerarm bietet dem Reagenz außerdem eine lange und flexible Verbindung, um die sterische Behinderung der Bindung an Avidin-Moleküle zu minimieren.
Unsere Biotin Reagenzien gewährleisten die höchstmögliche Gesamtproduktintegrität, -konsistenz und -leistung für die vorgesehenen Forschungsanwendungen.
N-Hydroxysulfosuccinimid (NHS) Ester aus Biotin sind die beliebtesten Biotinylierungsreagenzien. NHS-aktivierte Biotine reagieren effizient mit primären Aminogruppen (-NH2) in alkalischen Puffern und bilden stabile Amidbindungen. Proteine (z. B. Antikörper) haben in der Regel mehrere primäre Amine, die als Kennzeichnungsziele zur Verfügung stehen, einschließlich der Seitenkette von Lysinrückständen (K) und des N-Endterminus jedes Polypeptids.
Biotinvielfalt NHS-Ester unterscheiden sich in Länge, Löslichkeit, Zelldurchlässigkeit und Spaltbarkeit. Nicht sulfonierte NHS-Biotine sind zellpermeabel, müssen jedoch in einem organischen Lösungsmittel wie DMSO oder DMF gelöst werden. Sulfo-NHS-Biotine (und solche mit PEGyliertem Spacer) sind direkt wasserlöslich, können jedoch nicht die Zellmembran durchdringen. Sorten, die Disulfid-Bindungen enthalten, können mit Reduktionsmitteln gespalten werden, wodurch die Biotin-Gruppe vom markierten Protein getrennt werden kann.
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