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Thermo Scientific™

EZ-Link™ Micro NHS-PEG4-Biotinylation Kit

Le kit de biotinylation Thermo Scientific EZ-Link NHS-PEG4 contient l’EZ-Link NHS-PEG4-Biotine et des réactifs accessoires nécessaires pour 8 réactions deAfficher plus
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RéférenceQuantité
21955Kit de 8 réactions
Référence 21955
Prix (EUR)
392,00
Each
Quantité:
Kit de 8 réactions
Grand volume ou format personnalisé
Prix (EUR)
392,00
Each
Le kit de biotinylation Thermo Scientific EZ-Link NHS-PEG4 contient l’EZ-Link NHS-PEG4-Biotine et des réactifs accessoires nécessaires pour 8 réactions de marquage des protéines de 0,05 à 0,2 mg. L’EZ-Link NHS-PEG4-Biotine est un réactif pégylé hydrosoluble pour le marquage simple et efficace de la biotine des anticorps, des protéines et d’autres macromolécules contenant des amines primaires.

Caractéristiques de l’EZ-Link NHS-PEG4-Biotine :

Marquage des protéines : anticorps biotinylés ou autres protéines pour la détection ou la purification à l’aide de sondes ou de résines de streptavidine
Réactif aux amines : réagit avec les amines primaires (-NH2), telles que les chaînes latérales de lysine (K) ou les terminaisons aminées des polypeptides
Pégylée : le bras espaceur contient un groupe polyéthylèneglycol (PEG) hydrophile à 4 unités
Améliore la solubilité : la pégylation confère une solubilité dans l’eau à la molécule biotinylée, ce qui contribue à empêcher l’agrégation des anticorps biotinylés stockés en solution
Irréversible : forme des liaisons amides permanentes ; le bras espaceur ne peut pas être clivé
Longue portée : le bras espaceur (longueur totale ajoutée à la cible) est de 29 angströms ; cela réduit les obstacles stériques associés à la liaison aux molécules d’avidine

La NHS-PEG4-Biotine est un réactif de biotinylation par ester de NHS, pégylé et hydrosoluble, long (29,0 Å) qui permet de marquer les amines et d’optimiser la solubilité des anticorps et d’autres protéines. Le groupe d’ester N-hydroxysuccinimide (NHS) réagit spécifiquement et efficacement avec les groupes amino lysine et d’extrémité N-terminale pour former des liaisons amides stables. Le bras espaceur de polyéthylène glycol (PEG) hydrophile confère une hydrosolubilité qui est transférée vers la molécule biotinylée, réduisant ainsi l’agrégation des protéines marquées stockées en solution. Le bras espaceur PEG permet également au réactif d’établir une connexion longue et flexible afin de réduire l’obstacle stérique pour la liaison aux molécules d’avidine.

Nous fabriquons des réactifs de biotine pour garantir l’intégrité, la cohérence et les performances globales les plus élevées possibles pour les applications de recherche prévues.

Les esters N-Hydroxysulfosuccinimide (NHS) de la biotine sont les réactifs de biotinylation les plus populaires. Les biotines activées par NHS réagissent efficacement avec les groupes amines primaires (-NH2) des tampons alcalins pour former des liaisons amides stables. Les protéines (par ex., anticorps) possèdent plusieurs amines primaires qui sont disponibles sous forme de cibles pour le marquage, notamment la chaîne latérale des résidus de lysine (K) et les extrémités N-terminale de chaque polypeptide.

Grande variété de biotines Les réactifs d’ester NHS diffèrent en longueur, solubilité, perméabilité cellulaire et clivabilité. Les réactifs NHS-biotine non sulfonatés sont perméables aux cellules, mais doivent être dissous dans un solvant organique comme le DMSO ou le DMF. Les sulfo-NHS biotine (et ceux avec les espaceurs pégylés) sont directement solubles dans l’eau mais pas perméables aux membranes. Les variétés contenant des liaisons disulfures peuvent être clivées à l’aide d’agents réducteurs, ce qui permet de séparer le groupe biotine de la protéine marquée.

Produits associés
EZ-Link™ NHS-PEG4-Biotine
Kit de biotinylation EZ-Link™ NHS-PEG4
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
DescriptionKit de biotinylation EZ-Link Micro NHS-PEG4
Balance d’étiquetage100 μg
Gamme de produitsEZ-Link
Type de produitKit de biotinylation Micro NHS-PEG4
QuantitéKit de 8 réactions
Labeling TargetAnticorps, Protéines
Marqueur ou colorantBiotine
SolubilitéEau
EntretoisePégylé
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Suffisant pour : 8 réactions de marquage, chacune avec 0,05 à 0,2 mg d’anticorps
• EZ-Link NHS-PEG4-Biotine, 8 x 2 mg
• Boîte de PBS (500 ml), 1 boîte
• Colonnes de centrifugation de dessalage Zeba (MWCO 7 K), 2 ml, 10 colonnes

Conservez les microtubes de réactif de biotine à -20°C. Conservez le PBS à température ambiante. Conservez la colonne de dessalage à 4°C. Expédié à température ambiante.

Foire aux questions (FAQ)

Which EZ-Link Micro Biotinylation Kit is best for my application?

All four Micro Biotinylation Kits will label proteins for use in many applications. Consider the following guidelines for choosing among the kits:

• Choose the Sulfo-NHS-Biotinylation Kit (Cat. No. 21925) when it is important to minimize the molecular mass contributed by the label.
• Choose the Sulfo-NHS-SS-Biotinylation Kit (Cat. No. 21945) only when the downstream application require cleaving the biotin tag with a reducing agent.
• Choose the NHS-PEG4-Biotinylation Kit (Cat. No. 21955) to maximize protein solubility and prevent protein aggregation during storage.
• Choose the Sulfo-NHS-LC-Biotinylation Kit (Cat. No. 21935) for routine purposes when a feature of one of the other reagents is not required. The longer spacer arm offers the possibility of optimizing detection experiments where steric hindrance of biotin binding is an important factor.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Assays and Analysis Support Center.

How long does it take to biotinylate a protein using the EZ-Link Micro Biotinylation kits?

The entire procedure can be completed in less than 3 hours.

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What types of proteins can be labeled with the EZ-Link Micro Biotinylation kits?

Any molecule containing a primary amine can be labeled. Any protein that has been labeled using the standard biotinylation kits, including antibodies and peptides, also can be labeled with the micro kits.

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Are the biotinylation reagents in the EZ-Link Micro Biotinylation Kits cleavable?

Only the sulfo-NHS-SS-Biotin is cleavable because it has a disulfide bond in its spacer arm, enabling labeled proteins to be cleaved from the biotin group by treatment with reducing agents.

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What are the reaction chemistries of the reagents in the EZ-Link Micro Biotinylation Kits?

The reagents in the Micro kits are amine reactive. NHS esters react with a-amines at the N-termini and the epsilon-amines of lysine side chains at pH 7-9 to form stable amide bonds and the release of NHS.

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Citations et références (3)

Citations et références
Abstract
Mechanism of human antibody-mediated neutralization of Marburg virus.
Authors:Flyak AI, Ilinykh PA, Murin CD, Garron T, Shen X, Fusco ML, Hashiguchi T, Bornholdt ZA, Slaughter JC, Sapparapu G, Klages C, Ksiazek TG, Ward AB, Saphire EO, Bukreyev A, Crowe JE
Journal:
PubMed ID:25723164
'The mechanisms by which neutralizing antibodies inhibit Marburg virus (MARV) are not known. We isolated a panel of neutralizing antibodies from a human MARV survivor that bind to MARV glycoprotein (GP) and compete for binding to a single major antigenic site. Remarkably, several of the antibodies also bind to Ebola ... More
Broadly neutralizing antibodies from human survivors target a conserved site in the Ebola virus glycoprotein HR2-MPER region.
Authors:Flyak AI, Kuzmina N, Murin CD, Bryan C, Davidson E, Gilchuk P, Gulka CP, Ilinykh PA, Shen X, Huang K, Ramanathan P, Turner H, Fusco ML, Lampley R, Kose N, King H, Sapparapu G, Doranz BJ, Ksiazek TG, Wright DW, Saphire EO, Ward AB, Bukreyev A, Crowe JE
Journal:Nat Microbiol
PubMed ID:29736037
'Ebola virus (EBOV) in humans causes a severe illness with high mortality rates. Several strategies have been developed in the past to treat EBOV infection, including the antibody cocktail ZMapp, which has been shown to be effective in nonhuman primate models of infection' ... More
Cross-Reactive and Potent Neutralizing Antibody Responses in Human Survivors of Natural Ebolavirus Infection.
Authors:Flyak AI, Shen X, Murin CD, Turner HL, David JA, Fusco ML, Lampley R, Kose N, Ilinykh PA, Kuzmina N, Branchizio A, King H, Brown L, Bryan C, Davidson E, Doranz BJ, Slaughter JC, Sapparapu G, Klages C, Ksiazek TG, Saphire EO, Ward AB, Bukreyev A, Crowe JE
Journal:Cell
PubMed ID:26806128
'Recent studies have suggested that antibody-mediated protection against the Ebolaviruses may be achievable, but little is known about whether or not antibodies can confer cross-reactive protection against viruses belonging to diverse Ebolavirus species, such as Ebola virus (EBOV), Sudan virus (SUDV), and Bundibugyo virus (BDBV). We isolated a large panel ... More