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Thermo Scientific™

EZ-Link™ Micro NHS-PEG4-Biotinylation Kit

Das Thermo Scientific EZ–Link NHS-PEG4 Biotinylierungskit enthält EZ-Link NHS-PEG4-Biotin und Zubehörreagenzien, die für 8 Proteinmarkierungsreaktionen (0,05 bis 0,2 mg) erforderlichWeitere Informationen
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KatalognummerMenge
21955Kit für 8 Reaktionen
Katalognummer 21955
Preis (EUR)
392,00
Each
Menge:
Kit für 8 Reaktionen
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Preis (EUR)
392,00
Each
Das Thermo Scientific EZ–Link NHS-PEG4 Biotinylierungskit enthält EZ-Link NHS-PEG4-Biotin und Zubehörreagenzien, die für 8 Proteinmarkierungsreaktionen (0,05 bis 0,2 mg) erforderlich sind. EZ-Link NHS-PEG4-Biotin ist ein pegyliertes, wasserlösliches Reagenz zur einfachen und effizienten Biotinmarkierung von Antikörpern, Proteinen und anderen primären aminhaltigen Makromolekülen.

Merkmale von EZ-Link NHS-PEG4-Biotin:

Proteinkennzeichnung—biotinyliert Antikörper oder andere Proteine zum Nachweis oder zur Aufreinigung mit Streptavidinproben oder Harzen
aminreaktiv —reagiert mit primären Aminen (-NH2), wie der Seitenkette von Lysinen (K) oder den Aminotermini von Polypeptiden
Pegyliert – der Spacerarm enthält eine hydrophile Polyethylenglycol (PEG)-Gruppe mit 4 Einheiten
Verbesserte Löslichkeit –Pegylation verbessert die Wasserlöslichkeit des biotinylierten Moleküls, um die Aggregation von in der Lösung befindlichen biotinylierten Antikörpern zu verhindern
Irreversibel—bildet dauerhafte Amid-Verbindungen; der Spacerarm kann nicht gespalten werden
Große Reichweite – die Länge des Spacerarms (gesamte Länge zum Ziel hinzugefügt) beträgt 29 Angström. Dadurch wird die sterische Behinderung der Bindung an Avidin-Moleküle verringert.

NHS-PEG4-Biotin ist ein langes (29,0 Å), pegyliertes, wasserlösliches Biotinylierungsreagenz aus NHS-Ester zur Kennzeichnung von Aminen und Maximierung der Löslichkeit von Antikörpern und anderen Proteinen. Die N-Hydroxysuccinimid-Estergruppe (NHS) reagiert spezifisch und effizient mit Lysin- und N-terminalen Aminogruppen und bildet so stabile Amid-Verbindungen. Der hydrophile Polyethylenglykol (PEG)-Spacerarm gewährleistet die Wasserlöslichkeit, die auf das biotinylierte Molekül übertragen wird, wodurch die Aggregation markierter Proteine in der Lösung reduziert wird. Der PEG-Spacerarm bietet dem Reagenz außerdem eine lange und flexible Verbindung, um die sterische Behinderung der Bindung an Avidin-Moleküle zu minimieren.

Unsere Biotin Reagenzien gewährleisten die höchstmögliche Gesamtproduktintegrität, -konsistenz und -leistung für die vorgesehenen Forschungsanwendungen.

N-Hydroxysulfosuccinimid (NHS) Ester aus Biotin sind die beliebtesten Biotinylierungsreagenzien. NHS-aktivierte Biotine reagieren effizient mit primären Aminogruppen (-NH2) in alkalischen Puffern und bilden stabile Amidbindungen. Proteine (z. B. Antikörper) haben in der Regel mehrere primäre Amine, die als Kennzeichnungsziele zur Verfügung stehen, einschließlich der Seitenkette von Lysinrückständen (K) und des N-Endterminus jedes Polypeptids.

Biotinvielfalt NHS-Ester unterscheiden sich in Länge, Löslichkeit, Zelldurchlässigkeit und Spaltbarkeit. Nicht sulfonierte NHS-Biotine sind zellpermeabel, müssen jedoch in einem organischen Lösungsmittel wie DMSO oder DMF gelöst werden. Sulfo-NHS-Biotine (und solche mit pegyliertem Spacer) sind direkt wasserlöslich, können jedoch nicht die Zellmembran durchdringen. Varianten mit Disulfid-Bindungen sind mit Reduktionsmitteln spaltbar, wodurch sich die Biotingruppe vom markierten Protein trennen lässt.

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Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
Specifications
BeschreibungEZ-Link Micro NHS-PEG4-Biotinylierungskit
Kennzeichnungsmaßstab100 μg
ProduktlinieEZ-Link
ProdukttypMicro NHS-PEG4-Biotinylisierungskit
MengeKit für 8 Reaktionen
Labeling TargetAntikörper, Proteine
Marker oder FarbstoffBiotin
LöslichkeitWasser
AbstandshalterPEGyliert
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
Ausreichend für: 8 Markierungsreaktionen, jeweils mit 0,05 bis 0,2 mg Antikörper
• EZ–Link-NHS-PEG4-Biotin, 8 x 2 mg
• PBS-Packung (ergibt 500 ml), 1 Packung
• Zeba Spin Entsalzungssäulen (7K MWCO), 2 ml, 10 Säulen

Mikroröhrchen mit Biotinreagenz bei -20 °C lagern. PBS bei Raumtemperatur lagern. Die Entsalzungssäule bei 4 °C lagern. Versand bei Umgebungstemperatur.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

Which EZ-Link Micro Biotinylation Kit is best for my application?

All four Micro Biotinylation Kits will label proteins for use in many applications. Consider the following guidelines for choosing among the kits:

• Choose the Sulfo-NHS-Biotinylation Kit (Cat. No. 21925) when it is important to minimize the molecular mass contributed by the label.
• Choose the Sulfo-NHS-SS-Biotinylation Kit (Cat. No. 21945) only when the downstream application require cleaving the biotin tag with a reducing agent.
• Choose the NHS-PEG4-Biotinylation Kit (Cat. No. 21955) to maximize protein solubility and prevent protein aggregation during storage.
• Choose the Sulfo-NHS-LC-Biotinylation Kit (Cat. No. 21935) for routine purposes when a feature of one of the other reagents is not required. The longer spacer arm offers the possibility of optimizing detection experiments where steric hindrance of biotin binding is an important factor.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Assays and Analysis Support Center.

How long does it take to biotinylate a protein using the EZ-Link Micro Biotinylation kits?

The entire procedure can be completed in less than 3 hours.

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What types of proteins can be labeled with the EZ-Link Micro Biotinylation kits?

Any molecule containing a primary amine can be labeled. Any protein that has been labeled using the standard biotinylation kits, including antibodies and peptides, also can be labeled with the micro kits.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Assays and Analysis Support Center.

Are the biotinylation reagents in the EZ-Link Micro Biotinylation Kits cleavable?

Only the sulfo-NHS-SS-Biotin is cleavable because it has a disulfide bond in its spacer arm, enabling labeled proteins to be cleaved from the biotin group by treatment with reducing agents.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Assays and Analysis Support Center.

What are the reaction chemistries of the reagents in the EZ-Link Micro Biotinylation Kits?

The reagents in the Micro kits are amine reactive. NHS esters react with a-amines at the N-termini and the epsilon-amines of lysine side chains at pH 7-9 to form stable amide bonds and the release of NHS.

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Zitierungen und Referenzen (3)

Zitierungen und Referenzen
Abstract
Mechanism of human antibody-mediated neutralization of Marburg virus.
Authors:Flyak AI, Ilinykh PA, Murin CD, Garron T, Shen X, Fusco ML, Hashiguchi T, Bornholdt ZA, Slaughter JC, Sapparapu G, Klages C, Ksiazek TG, Ward AB, Saphire EO, Bukreyev A, Crowe JE
Journal:
PubMed ID:25723164
'The mechanisms by which neutralizing antibodies inhibit Marburg virus (MARV) are not known. We isolated a panel of neutralizing antibodies from a human MARV survivor that bind to MARV glycoprotein (GP) and compete for binding to a single major antigenic site. Remarkably, several of the antibodies also bind to Ebola ... More
Broadly neutralizing antibodies from human survivors target a conserved site in the Ebola virus glycoprotein HR2-MPER region.
Authors:Flyak AI, Kuzmina N, Murin CD, Bryan C, Davidson E, Gilchuk P, Gulka CP, Ilinykh PA, Shen X, Huang K, Ramanathan P, Turner H, Fusco ML, Lampley R, Kose N, King H, Sapparapu G, Doranz BJ, Ksiazek TG, Wright DW, Saphire EO, Ward AB, Bukreyev A, Crowe JE
Journal:Nat Microbiol
PubMed ID:29736037
'Ebola virus (EBOV) in humans causes a severe illness with high mortality rates. Several strategies have been developed in the past to treat EBOV infection, including the antibody cocktail ZMapp, which has been shown to be effective in nonhuman primate models of infection' ... More
Cross-Reactive and Potent Neutralizing Antibody Responses in Human Survivors of Natural Ebolavirus Infection.
Authors:Flyak AI, Shen X, Murin CD, Turner HL, David JA, Fusco ML, Lampley R, Kose N, Ilinykh PA, Kuzmina N, Branchizio A, King H, Brown L, Bryan C, Davidson E, Doranz BJ, Slaughter JC, Sapparapu G, Klages C, Ksiazek TG, Saphire EO, Ward AB, Bukreyev A, Crowe JE
Journal:Cell
PubMed ID:26806128
'Recent studies have suggested that antibody-mediated protection against the Ebolaviruses may be achievable, but little is known about whether or not antibodies can confer cross-reactive protection against viruses belonging to diverse Ebolavirus species, such as Ebola virus (EBOV), Sudan virus (SUDV), and Bundibugyo virus (BDBV). We isolated a large panel ... More