Pierce™ Colorimetric Protease Assay Kit

El kit de ensayo colorimétrico de proteasas Thermo Scientific Pierce mide la actividad de las proteasas totales en muestras, loMás información

Número de catálogo	Cantidad
23263	Kit para 250 pruebas

Número de catálogo 23263

Precio (MXN)

Cantidad:

Kit para 250 pruebas

Pedido a granel o personalizado

El kit de ensayo colorimétrico de proteasas Thermo Scientific Pierce mide la actividad de las proteasas totales en muestras, lo que permite evaluar el progreso de procedimientos de aislamiento de proteasas o cuantificar la contaminación por proteasas en muestras biológicas. Este kit utiliza caseína completamente succinilada como sustrato para el ensayo. La hidrólisis de este sustrato en presencia de proteasa provoca la liberación de fragmentos de péptidos con grupos amino terminales libres. Estos péptidos reaccionan con ácido trinitrobencenosulfónico (TNBSA), tras lo que se mide el incremento de absorbencia producido por la formación de aductos TNB-péptidos de color amarillo.

Características del kit de ensayo de proteasas colorimétrico:

• Sustrato de caseína: mide la actividad de cualquier proteasa que escinda la caseína en fragmentos peptídicos
• Patrón de tripsina: cuantifica la actividad proteasa en relación con la tripsina, una referencia universalmente aceptada
• Sensible: 1000 veces más sensible que los ensayos que utilizan formas no modificadas de caseína
• Sencillo y rápido: los protocolos para tubos de ensayos y para microplacas se realizan en menos de una hora
• Homogéneo: con pasos de adición solamente; no requiere pasos de separación, transferencia o parada
• Personalizable: permite adaptar fácilmente el tiempo, la temperatura y el pH para optimizar la sensibilidad a las proteasas de interés

Aplicaciones:
• Evaluar la integridad funcional y el progreso global de la purificación de proteasas
• Cuantificar la contaminación por proteasas en muestras de proteínas
• Caracterizar la actividad de proteasas poco comunes mediante comparación con tripsina
• Evaluar las condiciones de los tampones en relación con sus efectos sobre la función y la actividad de las proteasas

Especificaciones adicionales:
• Sustrato: caseína succinilada (no disponible por separado)
• Base del ensayo: detección de aminas primarias resultantes de la proteólisis
• Reactivo de detección: ácido trinitrobencenosulfónico (TNBSA)
• Medición: absorbencia a 450 nm (lector de placas o espectrofotómetro)

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Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

Especificaciones

ensayoEnsayo de proteasa

Para utilizar con (aplicación)Absorbancia

Para utilizar con (equipo)Lector de microplacas

Línea de productosPierce

Tipo de productoEnsayos de actividad de proteínas

CantidadKit para 250 pruebas

SustratoCaseína

Propiedades de sustratoSustrato basado en proteínas

Tipo de sustratoSustrato de proteasa

Suficiente para250 ensayos en microplaca

ObjetivoProteasas

Método de detecciónColorimétrico

Formato del kit de inmunoensayoPlaca de 96 pocillos

Unit SizeEach

Contenido y almacenamiento

Suficiente para: 250 ensayos de microplacas con un lector de placas estándar (absorbencia a 450 nm)
• Caseína succinilada, 5 x 10 mg
• Solución TNBSA, 2 ml
• Patrón de tripsina TPCK, 50 mg
• Paquete de tampones de borato (hace 500 ml), 1 paquete

Almacenar a 4 °C.

Preguntas frecuentes

In the Colorimetric Protease Assay Kit (Cat. No. 23263), my standard curve is not linear. Why?

Check the scale used for your X-axis. A logarithmic scale should be used for the X-axis (protease enzyme concentration) rather than a linear scale.

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In the Colorimetric Protease Assay Kit (Cat. No. 23263), my sample absorbance values are lower than smallest trypsin or other protease standard values. Why?

It could be that the sample protease activity is low relative to the range of dilutions used for the standard curve. You can prepare and use additional standard dilutions to ensure that the full range of assay sensitivity is utilized. Alternatively, the sample protease activity is low relative to the protease used to make standard curve. You can prepare a standard curve using the known amounts of the specific protease being tested.

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In the Colorimetric Protease Assay Kit (Cat. No. 23263), all of my sample absorbance values for non-trypsin proteases are low. What can I do?

There are two potential causes for low absorbance values in the unknown samples. The first being that pH and other buffer conditions were not optimal for the protease being tested. You can repeat the assay using buffer conditions that are optimal for the protease being tested and used to make standard curve. Secondly, it is possible that the protease being tested digests the casein substrate more slowly or less fully than the trypsin standard for which the default assay method was developed. You can perform the digestion step for >20 minutes (e.g., 40 mins); if necessary, also perform the TNBSA development step for longer. You can also use the specific substrate for the protease being tested.

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Do you offer any protein assays that are protein specific?

We offer several “specialty” protein assays including: Protease assay kits (Cat. Nos. 23263 and 23266), Glycoprotein Carbohydrate Estimation Kit (Cat. No. 23260), Phosphoprotein Phosphate Estimation Kit (Cat. No. 23270), Quantitative Peroxide assay kits (Cat. Nos. 23280 and 23285), and Easy-Titer Assay kits for IgG and IgM.

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