Das Thermo Scientific Pierce Classic IP-Kit verwendet hochwertige Agarose-Beads für Protein A/G, Spin-Säulen für Mikrozentrifugen und Puffer für die Durchführung herkömmlicher Immunpräzipitationsassays.
Das Kit nutzt hochwertiges Protein-A/G-Agarose-Affinitätsharz zur wirksamen Bindung von IP-Antikörpern der meisten Spezies und Unterklassen. Im Vergleich zur herkömmlichen Methode, die auf dem Kochen in reduzierendem Probenpuffer für SDS-PAGE besteht, sorgt der im Lieferumfang enthaltene IgG-Elutionspuffer auf mildere und weniger denaturierende Weise für die Rückgewinnung der Antikörper-Antigen-Komplexe. Dadurch erweitert sich das Spektrum an Methoden, die im Rahmen nachfolgender Analyseschritte einsetzbar sind. Das auf Spin-Säulen für Mikrozentrifugen basierende Format trägt zur effektiven Wäsche und Trennung der Proben vom Affinitätsharz mit Agarose-Beads bei.
Merkmale des Classic IP Kits:
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Konsistente Assays—Spin-Säulen (
siehe Abmessungen) beseitigen Harzverluste und trennen Lösungen effizienter als herkömmliche IP-Methoden, die nur Mikrozentrifugenröhrchen nutzen
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Schnell—Immunpräzipitate (IP) in unter einer Stunde
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Schonende Elutionsbedingungen—Wiedergewinnung von Antigenen ohne aggressive Reinigungs- oder Reduktionsmittel
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Einfache Anleitungen—Aufreinigen von Target-Protein aus Rohlysat in vier einfachen Schritten
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Geeignet für die meisten gängigen Antikörpertypen—Protein A/G bietet ausgezeichnete Bindung für die meisten IgG-Subklassen von Maus, Kaninchen, Mensch und Ziege.
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Komplettkit—-enthält Lyse-/Waschpuffer, Binde- und Elutionspuffer, Kontrollagaroseharz, Probenladepuffer und Spin-Säulen
Anwendungen:• Routinemäßige, herkömmliche IP-Untersuchungen
• Immunoprecipitation for analysis in nonreducing conditions
Wie klassische IP-Verfahren sient das Pierce Classic IP-Kit die Bildung von Antikörper-Antigen-Komplexen in einer Probenlösung vor. Im nächsten Schritt werden diese Komplexe durch ein IgG-bindendes, kovalent an Agarose-Beads gebundenes Protein (Protein A/G Agarose) gebunden. Nachdem die ungebundenen (und daher vermutlich unerwünschten) Komponenten aus der Probe gewaschen wurden, wird diese mit einem im Kit enthaltenen Elutionspuffer behandelt, um Antigen und Antikörper von den Beads zu lösen. Das gesamte Verfahren läuft in der Spin-Säule einer Mikrozentrifuge ab, um die Lösungen durch eine kurze Zentrifugation einwandfrei vom Agaroseharz zu trennen.
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