Pierce™ Agarose ChIP Kit

Das Thermo Scientific Pierce Agarose-ChIP-Kit enthält einen vollständigen Reagenziensatz und ein einfaches, schnelles und reproduzierbares Protokoll zur Durchführung von Chromatin-Immunpräzipitationsassays (ChIP).

Merkmale des Agarose-ChIP-Kits:

• Einfaches und schnelles ChIP-Assay-Protokoll (< 8 Stunden)
• Hocheffiziente Isolierung und Lyse von Zellkernen
• Einfacher und reproduzierbarer enzymatischer Verdau
• Protein A/G-Agaroseharz mit niedrigem Hintergrund und hohem Bindungsvermögen
• Hochspezifische Positivkontrollen sind enthalten: RNA-Polymerase-II-Antikörper und GAPDH PCR-Primer
• Schnelles und reproduzierbares Spin-Säulen-Format
• DNA-Aufreinigung mit hoher Rückgewinnung
• ChIP-validierte Antikörper erhältlich

Das Pierce Agarose-ChIP-Kit enthält ausreichend Reagenzien für 30 ChIP-Assays mit geeigneten Kontrollen unter Verwendung eines optimierten Protokolls und eines praktischen Spin-Säulen-Formats. Außerdem sind ChIP-validierte Antikörper mit Qualitätsgarantie für das Pierce Agarose-ChIP-Kit erhältlich. Da Antikörper, die für Western Blotting geeignet sind, in ChIP-Assays möglicherweise nicht funktionieren, haben wir hier unsere beliebtesten ChIP-validierten monoklonalen und polyklonalen Antikörper zusammengestellt, um Ihnen den schnellen Übergang von der experimentellen Einrichtung zu Ergebnissen zu erleichtern.

Die Stärke des ChIP-Assays ist seine Fähigkeit, einen Schnappschuss spezifischer Protein-DNA-Interaktionen zu erfassen, wie sie in lebenden Zellen auftreten, und die Interaktionen anschließend mit Standard- oder quantitativer PCR zu quantifizieren. Für einen erfolgreichen ChIP-Assay müssen mehrere entscheidende Schritte (Vernetzung, Chromatin-Vorbereitung, Immunpräzipitation) durchgeführt werden, bevor die genomische DNA-Zielsequenz detektiert werden kann. Die Optimierung dieser Einzelschritte des ChIP-Assay-Protokolls kann zeitraubend sein. Das Pierce Agarose-ChIP-Assay-Kit vereinfacht den Prozess und erleichtert die Erzielung genauer und reproduzierbarer Ergebnisse.

Für die Durchführung von ChIP-Assays mit dem Pierce Agarose-ChIP-Kit werden Protein-DNA-Komplexe stabilisiert und anschließend extrahiert. Die In-vivo-Vernetzung wird traditionell mit Formaldehyd erreicht. Durch Vernetzung direkt in den Zellen werden die Protein-DNA-Komplexe eingeschlossen, wodurch diese instabilen und manchmal transiente Interaktionen festgehalten werden. Für die Lyse, Extraktion und Solubilisierung der vernetzten Komplexe enthält das ChIP-Assay-Kit das Chromatin-Aufarbeitungsmodul (auch separat unter der Bestell-Nr. 26158 erhältlich). Zusammen bietet dieses vollständige ChIP-Assay-Kit ein einfaches, zuverlässiges und praktisches Mittel zur Isolierung von chromatingebundener DNA und Anreicherung von Proben für die zu untersuchenden Proteine mit weniger als 15 % Kontamination aus anderen Zellkompartimenten – ohne Dounce-Homogenisator.

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