Pierce™ NHS-Activated Agarose Spin Columns, 0.2 mL

Thermo Pierce Scientific Pierce Spin-Säulen für NHS-aktivierte Agarose, 0,2 ml, enthalten ein hochwertiges aminreaktives, Agaroseharz in Beadform für die schnelle und stabile Immobilisierung von Proteinen, Peptiden und anderen Liganden über primäre Amine.

Merkmale von NHS-aktivierter Agarose:

• Einfach zu verwenden— Immobilisieren in einer einfachen Reaktion in einem Schritt bei minimaler Bedienerintervention
• Schnell und effizient— mehr als 85 % Kopplung für die meisten Proteine innerhalb von 30 Minuten
• Innovatives Format —die Trockenagarose konzentriert die Probe, wodurch sie ideal für die Immobilisierung verdünnter Proteine geeignet ist
• Sicher— keine gefährlichen Chemikalien erforderlich (z. B. Natriumcyanoborohydrid, Cyanogen-Bromid)
• Vielseitig— Affinitätsharz ist an Säulen- und Chargenaffinitätschromatographietechniken und FPLC-Anwendungen anpassbar
• Kompatibel— mit jeder primären aminhaltigen Verbindung zu verwenden
• Wiederverwendbar— durch die lecksichere Chemie können Sie das Affinitätsharz wiederverwenden
• Hohes Bindungsvermögen— Bindungsvermögen von >25 mg/ml (Trockenharz)

Die NHS-aktivierte Agarose ist ein vernetztes 6 %-Agarose-Harz in Beadform, das funktionelle Gruppen von N-Hydroxysuccinimid (NHS) enthält. Das aktivierte Harz reagiert mit primären Aminen und bildet stabile Amidverbindungen, die Antikörper oder andere Proteine kovalent immobilisieren und in Affinitätsreinigungsverfahren eingesetzt werden können. Pierce NHS-Activated Agarose hat eine Kopplungskapazität von mehr als 25 mg/ml für das rekonstituierte Trockenharz.

Anwendungen:
• Schnelle Immobilisierung von Ziege-Anti-Maus- und Anti-Kaninchen-Antikörpern zur Reinigung von IgG, das in Tieren oder Hybridomen produziert wird.
• Bulk-Immobilisierung von Protein A zur Aufreinigung monoklonaler Antikörper
• Immobilisierung von Liganden zur Aufreinigung rekombinanter Proteine

Pierce NHS Activated Agarose-Harz verwendet zuverlässige NHS-Ester-Chemie und benötigt keine gefährlichen Chemikalien zur Immobilisierung. Andere aminreaktive Träger, wie z. B. periodatoxidierte Harze, müssen mit dem toxischen Natriumcyanoborhydrid behandelt werden, um die Reaktionsbindung an die primären Amine zu stabilisieren; darüber hinaus beläuft sich der Zeitaufwand auf 4 bis 6 Stunden. Auch herkömmliche Methoden, z. B. Bromcyan-aktivierte Träger, können zur Aminkopplung eingesetzt werden; allerdings ist diese Chemie mit nicht spezifischen Bindungen und konstantem, langsamem Auslaugen der gekoppelten Liganden verbunden. Die Reaktionen mit Pierce NHS-Activated Agarose sind in weniger als einer Stunde abgeschlossen und führen zu deutlich stabileren Verbindungen.

Die NHS-aktivierte Agarose-Kopplungsreaktion wird in einem aminfreien Puffer bei pH 7 bis 9 durchgeführt. Der Wirkungsgrad der Proteinkopplung liegt in der Regel über 80 %, unabhängig von der Molekülmasse oder vom isolektrischen Punkt des Liganden. Nach Immobilisierung eines Liganden kann das dermaßen präparierte Harz mehrfach für Protein-Affinitätsreinigungsverfahren eingesetzt werden. Die vernetzten Agarosebeads haben ein schnelles lineares Flusspotenzial und sind daher für Anwendungen mit Schwerkraft und niedrigem bis mittlerem Druck nützlich.

Die einzigartige trockene Form erfordert keine Lagerung oder Entfernung und Entsorgung des Aceton-Lösungsmittels. Darüber hinaus eignet sich das Trockenharz ideal für Kopplungsreaktionen mit verdünnten Proben, da es die Probe konzentriert, wenn das Harz schwillt, wodurch das Volumen des Ausgangsmaterials reduziert und eine hocheffiziente Ligandenimmobilisierung ermöglicht wird.

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