AmpliTaq Gold™ 360 DNA-Polymerase

Bei Verwendung mit dem verbesserten AmpliTaq Gold 360 Puffer und dem optionalen 360 GC-Enhancer amplifiziert Applied Biosystems™ AmpliTaq Gold™ 360 DNA-Polymerase eine Vielzahl von DNA-Sequenzen. AmpliTaq Gold™ 360 DNA-Polymerase sorgt für eine 360°-Abdeckung einer ganzen Reihe von Zielen.
* Optimiert für ein extrem breites Spektrum an Zielsequenzen – von alltäglichen bis zu anspruchsvollen Zielen
* Beispiellose Empfindlichkeit, Spezifität und Ausbeute
* Robuste Amplifikation GC-reicher Sequenzen mit marktführendem 360 GC-Enhancer
* Sequenzierungsdaten von höchster Qualität

Optimiert für einfache und anspruchsvolle Ziele
Zu den herausfordernden Zielen zählen AT-reiche, GC-reiche oder Primer-Dimer-bildende Amplikone, Homopolymer-Wiederholungen und Amplikone, die Herausforderungen bei der Sequenzierung darstellen. Amplikone, für die in der Vergangenheit spezielle Enzyme und Reaktionsbedingungen erforderlich waren, können jetzt reproduzierbar mit einem einzigen Reagenz unter standardisierten Bedingungen vervielfältigt werden (Abbildung 1). Das Benchmarking von Mitbewerbern mit mehr als 40 Amplikonen charakterisiert AmpliTaq Gold™ 360 als leistungsstärkstes Enzym und gewährleistet so die höchste Erfolgswahrscheinlichkeit für die Amplifikation von alltäglichen und anspruchsvollen Zielen (Tabelle 1).
Wie in Abbildung 1 gezeigt, werden GC-reiche Regionen besonders schlecht mit den DNA-Polymerasen der Mitbewerber und dem original AmpliTaq Gold amplifiziert, während AmpliTaq Gold 360 eine erfolgreiche, robuste Amplifikation bietet.

Optimiert für die Heißstart-PCR
Die AmpliTaq Gold 360 DNA-Polymerase bietet die gleiche Heißstart-Spezifität wie die AmpliTaq Gold DNA-Polymerase. Zur Aktivierung der AmpliTaq Gold DNA-Polymerase ist ein Inkubationsschritt bei hoher Temperatur erforderlich, der sicherstellt, dass das aktive Enzym nur bei Temperaturen erzeugt wird, bei denen die DNA vollständig denaturiert ist und kein Primer-Annealing stattfindet.
Wenn die Polymerase bei Raumtemperatur zum Reaktionsgemisch hinzugefügt wird, kommt es nicht zu einer Primer-Extension, da das Enzym inaktiviert ist. Ein möglicherweise aufgetretenes Fehlpriming bei niedriger Stringenz wird nicht enzymatisch extendiert und nicht amplifiziert. Daher kann die PCR-Vorbereitung bei Raumtemperatur erfolgen, ohne dass eine Extension an falsch geprimten Stellen auftritt. Die Menge der AmpliTaq Gold 360 DNA-Polymerase steigt bei der Reaktion mit jedem Zyklus langsam an, und die spezifische Produktausbeute erhöht sich ohne Anreicherung unspezifischer Produkte, einschließlich Primer-Dimere. Eine hervorragende Spezifität über einen breiten Bereich von Zielen ist in Abbildung 1 dargestellt und in Abbildung 2 zusammengefasst. Die hervorragende Spezifität ermöglicht ein einfacheres Multiplexing und eine einfachere allelische Diskriminierung.
Die Menge der AmpliTaq Gold 360 DNA-Polymerase steigt bei der Reaktion mit jedem Zyklus langsam an, und die spezifische Produktausbeute erhöht sich ohne Anreicherung unspezifischer Produkte, einschließlich Primer-Dimere. Die hervorragende Spezifität über eine breite Palette von Zielen ist in Abbildung 1 dargestellt und in den Abbildungen 2A und B zusammengefasst. Die hervorragende Spezifität ermöglicht ein einfacheres Multiplexing und eine einfachere allelische Diskriminierung.

Ausgezeichnete Empfindlichkeit und Amplifikationslänge
Im Vergleich zur original AmpliTaq Gold™ DNA-Polymerase wird die AmpliTaq Gold™ 360 DNA-Polymerase durch einen zusätzlichen, firmeneigenen Trennungsprozess gereinigt, um kontaminierende bakterielle DNA-Sequenzen aus dem Enzympräparat zu eliminieren. Zusätzlich zu den Hot-Start-Eigenschaften reduziert dieses ultrareine Enzym bei Verwendung mit dem verbesserten 360 Gold Puffer falsch positive Ergebnisse, verstärkt Low-Level-Zielsequenzen und fördert die Amplifikation einer Vielzahl von Templates, einschließlich der aus bakteriellen und menschlichen Genomen.
Die AmpliTaq Gold 360 DNA-Polymerase amplifiziert effizient Ziele mit niedriger Kopienzahl (Abbildung 3), selbst bei hohen Konzentrationen komplexer DNA, wodurch sie besonders für den Nachweis von Pathogenen in niedriger Kopienzahl und die Amplifikation von Zielen aus degradierten DNA-Proben geeignet ist. Die extreme Reinheit des Enzyms trägt zu seiner unübertroffenen Empfindlichkeit bei. AmpliTaq Gold 360 DNA-Polymerase amplifiziert effizient und reproduzierbar auch lange Sequenzen (bis zu 5 kb). Abbildung 4 zeigt die robuste PCR-Amplifikation von langer humaner und Plasmid-DNA.
 

Hinweis:
Informationen zu Lizenzbestimmungen (Limited Label Licence) und Warenzeichen finden Sie im Benutzerhandbuch oder in der Packungsbeilage.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für die Diagnostik bestimmt.