Pierce™ Universal-Nuklease für die Zelllyse

Thermo Scientific Pierce Universal Nuclease for Cell Lysis ist ideal für eine Vielzahl von Anwendungen, bei denen für die Vorbereitung von Zelllysaten ein vollständiger Aufschluss von Nukleinsäuren erforderlich ist.

Merkmale von Universal Nuclease for Cell Lysis:

• Breites Spektrum: Degradiert alle Formen von DNA und RNA
• Höchste Enzymqualität: Die Nuklease ist zu ≥ 99 % rein, durch SDS-PAGE überprüft
• Robuste Aktivität: 100-fach höhere spezifische Aktivität als DNase I
• Vielseitig einsetzbar: Kann mit einer Vielzahl von Zelllysereagenzien verwendet werden

Pierce Universal Nuclease for Cell Lysis ist eine gentechnisch hergestellte Endonuklease aus Serratia marcescens. Das Enzym wird in E. coli synthetisiert und aufgereinigt und besteht aus zwei identischen 30-kDa-Untereinheiten mit zwei kritischen Disulfidbindungen. Diese nicht zu unterscheidende Endonuklease degradiert einsträngige, doppelsträngige, lineare und zirkuläre DNA und RNA und ist über einen breiten Temperatur- und pH-Bereich wirksam. Dieses Enzym hat eine hohe spezifische Aktivität (100-fach größer als DNase I) und im Vergleich zu anderen Nukleasen eine erhöhte thermische Stabilität. Pierce Universal Nuclease ist ein ≥ 99 % reines Enzym, enthält keine messbare Proteaseaktivität und wird in 250 E/µl geliefert. Die Pierce Universal Nuclease for Cell Lysis ist genauso leistungsfähig wie die Benzonase™ Nuklease (EMD Merck).

Anwendungen:
• Verwendung mit B-PER, Y-PER oder anderen handelsüblichen oder selbst angesetzten Zelllysereagenzien und/oder mit mechanischem Aufschluss zur Verringerung der Viskosität in Proteinextrakten
• Entfernen von DNA und RNA aus rekombinanten Proteinpräparaten vor der nachgelagerten Verarbeitung

Pierce Universal Nuclease for Cell Lysis wird häufig zur Verringerung der Viskosität von Proteinextrakten aus Bakterien und Säugetieren für Downstream-Prozesse verwendet, durch Entfernen der Nukleinsäuren aus Proteinpräparaten. Das Enzym verdaut Nukleinsäuren vollständig zu Oligonukleotiden mit einer Länge von weniger als 5 Basen. Pierce Universal Nuclease for Cell Lysis unterstützt die Trennung von Lysatpellet und -überstand, verbessert die Filtration des behandelten Lysats, beschleunigt die Verarbeitung mittels Chromatographie und erhöht die Gesamtproteinausbeute. Die Endonuklease verbessert zudem die Kompatibilität von Proteinextrakten für die 2D-Gelelektrophorese. Entsprechend dem volumetrischen Aktivitätsassay mit der Standardnuklease von Merck™ Serratia marcescens entspricht eine Einheit der Enzymmenge, die erforderlich ist, um über 30 Minuten bei 37 °C bei mit Ultraschall behandelter Herring-DNA in der Extinktion bei 260 nm eine Änderung von 1,0 zu erzeugen.

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