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Amplex™ Red Glutamic Acid/Glutamate Oxidase Assay Kit
Amplex™ Red Glutamic Acid/Glutamate Oxidase Assay Kit
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Amplex™ Red Glutamic Acid/Glutamate Oxidase Assay Kit

Das Amplex™ Rot Glutaminsäure/Glutamatoxidase-Assay-Kit liefert eine empfindliche und einfache Methode für den Nachweis von Glutaminsäure/Glutamatoxidase-Aktivität mit einem Fluoreszenz-Mikrotiterplatten-Lesegerät oder Fluorometer.SehenWeitere Informationen
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KatalognummerMenge
A12221200 Assays
Katalognummer A12221
Preis (EUR)
668,00
Each
Zum Warenkorb hinzufügen
Menge:
200 Assays
Preis (EUR)
668,00
Each
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Das Amplex™ Rot Glutaminsäure/Glutamatoxidase-Assay-Kit liefert eine empfindliche und einfache Methode für den Nachweis von Glutaminsäure/Glutamatoxidase-Aktivität mit einem Fluoreszenz-Mikrotiterplatten-Lesegerät oder Fluorometer.

Sehen Sie sich unser komplettes Sortiment an Fluoreszenz-Mikrotiterplatten-Assays an.

• Nachweis von Konzentrationen bis zu 10 nM L-Glutaminsäure oder 40 µU/ml aufgereinigter L-Glutamatoxidase
• Das Format ermöglicht Messungen zu mehreren Zeitpunkten
• Ausgelegt für minimale Autofluoreszenzinterferenz

Das Amplex™ Red Glutaminsäure/Glutamatoxidase-Assay-Kit bietet eine ultrasensitive Methode zum Nachweis von Glutaminsäure oder zur kontinuierlichen Überwachung der Glutamatoxidaseaktivität mit einem Fluoreszenz-Mikrotiterplatten-Lesegerät oder Fluorometer. Im Assay wird L-Glutaminsäure durch Glutamatoxidase oxidiert, um α-Ketoglutarat, NH3 und Wasserstoffperoxid zu erzeugen. L-Alanin und L-Glutamat–Pyruvat-Transaminase sind an der Reaktion zur Regeneration von L-Glutaminsäure durch Transaminierung von α-Ketoglutarat beteiligt, was zu mehreren Zyklen der Ausgangsreaktion und einer signifikanten Zunahme des erzeugten Wasserstoffperoxids führt. Wasserstoffperoxid-Peroxidase reagiert mit 10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazin (Amplex™ Red Reagenz) in einem stöchiometrischen Verhältnis von 1:1 in einer katalytischen Reaktion mit Meerrettich-Peroxidase (HRP) und erzeugt stark fluoreszierendes Resorufin.

Da Resorufin Absorptions- und Fluoreszenz-Emissionsmaxima von etwa 571 nm bzw. 585 nm aufweist, gibt es in den meisten biologischen Proben nur geringe Interferenzen durch die Autofluoreszenz.

Verwenden Sie Amplex™ Red Assays für eine breite Palette von Untersuchungen
Eine Vielzahl validierter Amplex™ Red Assays steht für die Untersuchung von Zellsignalisierungs- und Lipiden, Neurobiologie, Entzündungen und Immunfunktionen sowie Metabolismen zur Verfügung. Wir bieten auch Amplex™ UltraRot Reagenz an (Kat.- Nr. A36006), ein Reagenz der zweiten Generation mit einer größeren Empfindlichkeit und helleren Fluoreszenz, sowie das Amplex™ Rot/UltraRot Stoppreagenz (Kat.- Nr. A33855). Das Amplex™ Rot/UltraRot Stoppreagenz sorgt für praktische und kontrollierte Bedingungen, da damit die Reaktion zur Erzeugung des Fluoreszenzsignals zu einem vom Anwender bestimmten Zeitpunkt beendet werden kann. Nach Zugabe des Stoppreagenzes bleibt das Fluoreszenzsignal für mindestens drei Stunden stabil. Kundenspezifische Assay-Designs und Verpackungen sind ebenfalls erhältlich.
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
Specifications
NachweisverfahrenFluoreszent, Fluoreszent
FarbstofftypAndere Etiketten oder Farbstoffe
Format96 Well-Platte, 96-Well Platte
Menge200 Assays
VersandbedingungRaumtemperatur, Raumtemperatur
Zur Verwendung mit (Anwendung)Glutaminsäure/Glutamatoxidaseassay
Zur Verwendung mit (Geräte)Fluorometer, Mikrotiterplatten-Lesegerät, Fluorometer, Mikrotiterplatten-Lesegerät
ProduktlinieAmplex
ProdukttypGlutaminsäure/Glutamatoxidaseassay-Kit Rot
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
In einem Tiefkühlgerät (-5 bis -30 °C) lagern und vor Licht schützen.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

I'm using an Amplex Red kit, the reagent changes color to pink almost immediately in my own Krebs-Ringer buffer but not in HBSS. Why is this?

The components of Krebs-Ringer buffer (salts) should not cause oxidation of the Amplex reagent (which, in the presence of peroxidase and H2O2 oxidizes to resorufin, which is pink in color and fluorescent). Try water alone (the water used to make the Krebs-Ringer buffer). Since Hank's Buffered Saline Solution is typically purchased rather than made in the lab, it likely would not have the same contaminant. Another option is to degas the buffer prior to use to removed dissolved oxygen radicals.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Can Amplex Red Assays be performed using cell lysates?

This is not recommended. The presence of endogenous proteases can complicate the assay by degrading the horseradish peroxidase (HRP). Endogenous peroxidases and antioxidants can modify the H2O2 required for the reaction, competing with HRP (and catalase) for the substrate.

The Amplex Red Assays are best performed with either purified enzymes or extracted H2O2 in a defined buffer system, extracellular solutions or body fluids (media, serum, etc.) that do not exhibit high levels of endogenous protease or oxidase activity and do not contain antioxidants.

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Zitierungen und Referenzen (13)

Zitierungen und Referenzen
Abstract
Glutamate excitotoxicity is involved in cell death caused by tributyltin in cultured rat cortical neurons.
Authors:Nakatsu Y, Kotake Y, Komasaka K, Hakozaki H, Taguchi R, Kume T, Akaike A, Ohta S,
Journal:Toxicol Sci
PubMed ID:16207939
'Tributyltin, an endocrine-disrupting chemical, has been used as a heat stabilizer, agricultural pesticide, and component of antifouling paints. In this study, the neurotoxicity of tributyltin was investigated in cultured rat cortical neurons. Tributyltin caused marked time- and dose-dependent increases in the number of trypan blue-stained cells. Measurement of extracellular glutamate ... More
Iron alters glutamate secretion by regulating cytosolic aconitase activity.
Authors:McGahan MC, Harned J, Mukunnemkeril M, Goralska M, Fleisher L, Ferrell JB
Journal:Am J Physiol Cell Physiol
PubMed ID:15613494
'Glutamate has many important physiological functions, including its role as a neurotransmitter in the retina and the central nervous system. We have made the novel observations that retinal pigment epithelial cells underlying and intimately interacting with the retina secrete glutamate and that this secretion is significantly affected by iron. In ... More
Bispecific small molecule-antibody conjugate targeting prostate cancer.
Authors:Kim CH, Axup JY, Lawson BR, Yun H, Tardif V, Choi SH, Zhou Q, Dubrovska A, Biroc SL, Marsden R, Pinstaff J, Smider VV, Schultz PG,
Journal:
PubMed ID:24127589
'Bispecific antibodies, which simultaneously target CD3 on T cells and tumor-associated antigens to recruit cytotoxic T cells to cancer cells, are a promising new approach to the treatment of hormone-refractory prostate cancer. Here we report a site-specific, semisynthetic method for the production of bispecific antibody-like therapeutics in which a derivative ... More
Single cell glutamate analysis in Aplysia sensory neurons.
Authors:Drake TJ, Jezzini S, Lovell P, Moroz LL, Tan W
Journal:J Neurosci Methods
PubMed ID:15848241
'Glutamate is the major excitatory neurotransmitter in the central nervous system. However, techniques and assays available for the determination and detection of glutamate are limited. Here we have applied an effective glutamate assay toward the high-throughput analysis of single neurons. Initial physiological studies and recent immunohistochemical data strongly suggested that ... More
P2X agonist BzATP interferes with amplex-red-coupled fluorescence assays.
Authors:León D, Marín-García P, Sánchez-Nogueiro J, de la O FO, García-Carmona F, Miras-Portugal MT,
Journal:Anal Biochem
PubMed ID:17562321
'This paper does not have an abstract.'
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