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Invitrogen™

Silencer™ Negative Control No. 2 siRNA

L’ARNsi #2 de contrôle négatif Ambion™ Silencer™ ne possède pas de similarité de séquence significative avec les séquences de gènesAfficher plus
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RéférenceQuantité
AM463740 nmol
AM46135 nmol
Référence AM4637
Prix (EUR)
854,00
Each
Quantité:
40 nmol
Prix (EUR)
854,00
Each
L’ARNsi #2 de contrôle négatif Ambion™ Silencer™ ne possède pas de similarité de séquence significative avec les séquences de gènes de souris, de rat ou d’humain. Le contrôle a également été testé dans des analyses à base de cellules et il a été prouvé qu’il n’avait aucun effet significatif sur la prolifération, la viabilité ou la morphologie cellulaire. 40 nmol sont fournis.

• Non-ciblant avec une similarité de séquence limitée avec les gènes connus
• Validé pour utilisation dans des cellules d’humain, de souris et de rat
• Fonctionnellement prouvé comme ayant des effets minimaux sur la prolifération et la viabilité cellulaires
• Purifié par HPLC, duplexé et prêt à l’emploi

Les ARNsi de contrôle négatif sont essentiels pour déterminer l’efficacité de transfection et contrôler les effets de l’apport des ARNsi. Dans les applications d’analyse d’ARNsi, les ARNsi de contrôle négatif sont également essentiels pour définir le seuil à “atteindre” qui détermine si un des ARNsi est considéré comme ayant un effet positif, négatif ou neutre lors d’un test particulier.

Produit accessoire : Panneau de contrôle d’ARNsi (n° cat. AM4640) Silencer
Le panneau de contrôle d’ARNsi Silencer™ comprend sept ARNsi de contrôle négatif et est destiné aux chercheurs qui effectuent des écrans ARNsi qui utilisent des centaines ou des milliers d’ARNsi par expérience. Les ARNsi de contrôle négatif pouvant avoir des effets non désirés lors d’un essai particulier, un ARNsi de contrôle négatif doit être choisi avec soin. Le paneau de contrôle pour l’analyse d’ARNsi Silencer™ simplifie ce processus. Comme avantage supplémentaire, un ARNsi de contrôle positif pour le KIF11 humain, de souris et de rat (Eg5) est compris dans le panneau. L’inactivation de KIF11, qui encode une protéine motrice de la famille des kinésines, entraîne l’arrêt mitotique. Les ARNsi de contrôle Silencer™ sont des 21-mères non modifiés ; ils sont conçus pour être utilisés avec les ARNsi Silencer™, les ARNsi BLOCK-iT™ et d’autres ARNsi 21-mères non modifiés. Si vous utilisez d’autres produits ARNsi , comme les ARNsi Ambion™ Silencer™ Select ou les ARNsi STEALTH RNAi™, nous recommandons que vous utilisiez des ARNsi de contrôle conçus pour utilisation avec ces ARNsi pour des résultats expérimentaux plus fiables.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
À utiliser avec (application)Transfection, ARNi
Marqueur ou colorantNon conjugué(e)
Gamme de produitsSilencer, Ambion
Type de produitARNsi
PuretéHPLC
Quantité40 nmol
Conditions d’expéditionTempérature ambiante
Type de contrôleContrôle négatif
RNAi TypesiARN
EspècesHumain, souris, rat
Unit SizeEach
Contenu et stockage
L’ARNsi est fourni sous forme sèche dans un tube unique, avec de l’eau exempte de nucléase pour la remise en suspension, et doit être conservé à –20°C.

Foire aux questions (FAQ)

What are the benefits of using a vector to deliver RNAi?

Vector technologies allow you to:

Achieve transient or stable target knockdown
Perform RNAi in any cell type, even hard-to-transfect, primary, and non-dividing cells
Regulate gene inhibition with inducible siRNA expression
Select for a pure population of cells stably expressing an siRNA sequence
Control gene expression in vivo with tissue-specific promoters

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Why are my cells dying after transfection?

We would suggest running a transfection reagent control only to determine if your cells are sensitive to the transfection reagent. Additionally, you can try using different cell densities and siRNA concentrations to diminish any toxic effects from the transfection itself.

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I transfected my siRNA and the mRNA levels are down, but the protein is not. Why is that?

In some cases, knockdown of a protein can be affected by other variables such as protein turnover rate, even though the RNA is knocked down. Additionally, a longer time course may be needed to see an effect on protein compared to mRNA.

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I am not getting my target knockdown. What could be the cause of this?

Please see the following possibilities and suggestions:

- How many siRNA did you test? Is there any knockdown? If there is no knockdown (<10%) in any of the siRNA, then the assay is likely the problem. Try using a different qRT-PCR assay to assess knockdown.
- What was the positioning of the qRT-PCR assay target site relative to the cut site for the siRNA? If greater than 3,000 bases away, the problem could be alternative splice transcripts.
- What are the Cts for the experiment? They should be below 35 in a 40-cycle qRT-PCR experiment.
- Did you confirm the siRNA got into the cell? We recommend using a validated positive control siRNA to check the transfection efficiency.

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I am not getting any knockdown with my siRNA. What do you suggest I try?

Please see the following possibilities and suggestions:

- Were the mRNA levels checked? The most reliable method is real-time PCR. In some cases, knockdown of a protein can be affected by other variables, such as protein turnover rate, even though the RNA is knocked down.
- How is the RNA being isolated? Has the quality of the isolated RNA been checked? Ensure that the RNA has not been degraded.
- Was a positive control used? This can help to determine whether the reagents are working and whether the siRNA was delivered correctly to the cell. Run your experiment in parallel with the positive control siRNA.
- Was a transfection control used? What is the percentage of transfected cells?
- Was a time course used? Generally, gene silencing can be assessed as early as 24 hours posttransfection. However, the duration and level of knockdown are dependent on cell type and concentration of siRNA.
- Was optimization of transfection conditions performed? You can try using different cell densities and siRNA concentrations.
- Which concentration of siRNA did you use? We recommend testing multiple concentrations between 5 nM and 100 nM.

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