E. coli químicamente competente One Shot™ PIR1

El sistema de clonación Echo™ es un sistema de dos vectores que utiliza el sistema de recombinación específico del sitio Cre-Lox de bacteriófago P1 (1,2) para una clonación rápida en varios vectores. Su gen de interés se clona en uno de los vectores de donantes especialmente diseñados que pueden ser recombinados con tantos vectores aceptores Eccho™ diferentes como desee. Los vectores de donante y aceptores se colocan en un tampón que contiene CRE recombinasa para una reacción de recombinación in vitro de 25 minutos. El CRE se une al sitio de Lox presente en cada vector, los une, se divide y vuelve a unir covalentemente los filamentos de ADN. El resultado final es una fusión de los vectores de donante y aceptor que forman un único vector de expresión funcional.
Las células competentes PIR1 se utilizan para la clonación y mantenimiento de la construcción del vector de donante (es decir, pUniV5/HIS-TOPO™) (u otro vector que contenga el R6K origen). Contiene un alelo mutante del gen pir que mantiene la construcción del vector de donante a aproximadamente ∼250 copias por célula.